TAQN-RO

DNA polimerasi Taq, dNTPack

suitable for PCR, optimum pH ~9.0 (20 °C), dNTPs included

• Sinonimo/i: amplificazione dna, estensione dei primer, pcr, polimerasi
• Classificazione EC (Enzyme Commission): 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• Codice UNSPSC: 41106300
• NACRES: NA.55

Proprietà

• Origine biologica: bacterial (Thermus aquaticus BM)
• Livello qualitativo: 100
• Ricombinante: expressed in E. coli
• Descrizione: 5 U/βl; Number of Reactions:; If 1.25 U are used per 50 μL reaction, Taq DNA Polymerase, dNTPack is designed for approximately sufficient for number of reactions, mentioned in the usage.
• Forma fisica: liquid
• impiego: sufficient for 2,000 reactions (04728904001); sufficient for 4,000 reactions (04728858001); sufficient for 400 reactions (04728874001); sufficient for 80 reactions (04728866001); sufficient for 800 reactions (04728882001)
• PM: 95 kDa
• Caratteristiche: dNTPs included; hotstart: no
• Confezionamento: pkg of 1,000 U (04728882001 [4 x 250 U]); pkg of 2,500 U (04728904001 [10 x 250 U]); pkg of 5,000 U (04728858001 [20 x 250 U]); pkg of 100 U (04728866001); pkg of 500 U (04728874001 [2 x 250 U])
• Produttore/marchio commerciale: Roche
• Concentrazione: 0.025 units/reaction
• Parametri: 72 °C optimum reaction temp.
• tecniche: PCR: suitable
• Colore: colorless
• input: purified DNA
• pH ottimale: ~9.0 (20 °C)
• Solubilità: water: soluble
• Compatibilità: suitable for PCR and automated sequencing reactions
• N° accesso UniProt: (P19821 · DPO1_THEAQ)
• applicazioni: genomic analysis; life science and biopharma
• Attività estranea: endonucleases, none detected; exonuclease, none detected; nicking activitities, none detected
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

Contenuto
DNA polimerasi Taq, 5 U/μL
Tampone PCR, concentrato 10x con MgCl₂
PCR Nucleotide Mix

Per la massima comodità, selezionare il PCR Master pronto per l′uso a concentrazione 2x.

Ciascun dNTPack contiene 10 mM di sali di sodio di nucleotidi privi di additivi sotto forma di miscela pronta all′uso.

La DNA polimerasi Taq è una DNA polimerasi 5′→3′ fortemente attiva priva di attività esonucleasica 3′→5′. È una singola catena polipeptidica con un peso molecolare di circa 95 kDa.
La DNA polimerasi Taq fu isolata in origine dall′eubatterio termofilo Thermus aquaticus BM un ceppo privo dell′endonucleasi di restrizione Taq I. Conformemente alle procedure di controllo di qualità attuali, la preparazione dell′enzima ottenuta da E. coli è priva di endo o esonucleasi non specifiche.

Applicazioni

Ottenere la massima coerenza dei risultati con una semplice PCR di routine grazie alla DNA polimerasi Taq Roche Applied Science, che rispetta i nostri standard rigorosi di purezza e qualità. DNA polimerasi Taq, dNTPack, combina la preparazione standard (5 U/μL) di DNA polimerasi Taq con il comodo PCR Nucleotide Mix, di facile utilizzo. Per il resto, questa preparazione è identica alla nostra preparazione standard e può essere usata per:

• PCR
• RT-PCR
• Altre reazioni di estensione dei primer, come sequenziamento e marcatura

Caratteristiche e vantaggi

• Risultati affidabili e riproducibili: elevata concordanza fra lotti diversi.
• Nessun bisogno di testare ciascun lotto: la DNA polimerasi Taq è analizzata in modo rigoroso.
• Prevenzione del carryover nella PCR: l′incorporazione di dUTP in combinazione con l′uracil-DNA glicosilasi impedisce la contaminazione incrociata nella PCR.

Confezionamento

1 kit con 3 componenti

Qualità

Ogni lotto è analizzato con PCR usando λDNA. Ciascun lotto è anche analizzato per l′assenza di eso/endonucleasi e attività di incisione conformemente alle procedure di controllo di qualità attuali.

Definizione di unità

Una unità di DNA polimerasi Taq è definita come la quantità di enzima che incorpora 10 nmol of desossiribonucleosidi trifosfati totali in DNA precipitabile in acido entro 30 minuti a +75 °C nelle condizioni di analisi riportate nel saggio dell′unità.

Saggio di unità: Tampone di incubazione:
67 mM Tris/HCl; pH 8,3/25 °C, 5 mM MgCl₂, 10 mM mercaptoetanolo, 0,2% polidocanolo, 0,2 mg/mL gelatina, 0,2 mM ciascuno di dATP, dGTP, dTTP e 0,1 mM di dCTP.

Procedura di incubazione:
M13mp9ss, primer (17mer) M13 e 1 μCi (α^-32P) dCTP sono incubati con DNA polimerasi Taq alle diluizione idonee in un tampone di incubazione da 50 μl a +65 °C per 60 minuti. La quantità di dNTP incorporati è determinata per precipitazione in acido tricloroacetico.

Attività per volume: 5 U/μL

Stoccaggio e stabilità

I contenitori che vengono aperti devono essere nuovamente sigillati con cura e
conservati in posizione verticale per evitare fuoriuscite.

Altre note

Da utilizzare solo per ricerca nelle scienze naturali. Non usare in procedure diagnostiche.

I saggi di routine hanno amplicon di medie dimensioni e un contenuto in GC del 50%. La DNA polimerasi Taq non svolge attività di proofreading o hot start. Attività ottimale a +75 °C e pH 9.

Priva di endonucleasi di restrizione:
L′enzima isolato originariamente da T. aquaticus BM è privo di attività dell′endonucleasi di restrizione Taq I.

Note legali

L'utilizzo di questo prodotto è coperto da richieste di brevetto USA e dalle corrispondenti richieste di brevetto al di fuori degli USA. L′acquisto di questo prodotto include un'immunità limitata e non trasferibile dalle azioni giudiziarie ai sensi delle suddette richieste di brevetto per l'utilizzo limitato a questa quantità di prodotto per la ricerca interna dell'acquirente. Non è espresso esplicitamente, implicitamente o per malafede, alcun diritto ai sensi di qualsiasi altra richiesta di brevetto, alcun diritto a eseguire metodi brevettati e alcun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa senza limitazioni la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti a fronte di un pagamento o di altro corrispettivo commerciale. Questo prodotto è destinato esclusivamente a scopi di ricerca. Gli usi diagnostici sotto richieste di brevetto Roche richiedono una licenza separata da Roche. Ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze possono essere ottenute contattando il Direttore Licenze, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA.

Solo come componenti del kit

• Taq DNA Polymerase 5 U/μl
• PCR Buffer with MgCl₂ 10x concentrated
• PCR Nucleotide Mix

Informazioni sulla sicurezza

• Indicazioni di pericolo: H412
• Consigli di prudenza: P273 - P501
• Classi di pericolo: Aquatic Chronic 3
• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 2
• Punto d’infiammabilità (°F): does not flash
• Punto d’infiammabilità (°C): does not flash