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Anticorpo anti-fosfotirosina, clone 4G10^®

clone 4G10®, Upstate^®, from mouse

• Sinonimo/i: Anticorpo per rivelazione di fosfotirosina, Clone 4G10 anti-fosfotirosina
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 4G10®, monoclonal
• Species reactivity: vertebrates
• Application: ICC, IHC, IP, WB
• Citations: 26

Proprietà

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 4G10®, monoclonal
• species reactivity: vertebrates
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG2bκ
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: phosphorylation (pTyr)

Descrizione

General description

Dipende dal peso molecolare della proteina con tirosina fosforilata rilevata.

Per mezzo delle protein chinasi è possibile marcare alcuni residui della tirosina con un gruppo fosfato (fosforilazione). (Nello stato fosforilato assume il nome di fosfotirosina.) La fosforilazione della tirosina è considerata uno dei passaggi chiave nella trasduzione del segnale e nella regolazione dell′attività enzimatica.
L′avvento degli anticorpi anti-fosfotirosina è uno degli eventi significativi nella ricerca sulla trasduzione del segnale. Prima che fossero disponibili gli anticorpi anti-fosfotirosina, la tirosil fosforilazione delle proteine e degli enzimi era studiata per mezzo di esperimenti radioattivi pericolosi e che richiedevano molto tempo. Gli anticorpi anti-fosfotirosina sono comunemente usati nei western blot dopo immunoprecipitazione delle proteine bersaglio per misurare la tirosil fosforilazione delle proteine. Gli anticorpi anti-fosfotirosina si usano anche direttamente sulle cellule lisate per esaminare la variazione complessiva del livello di fosforilazione della tirosina in risposta a diversi trattamenti.

Immunogen

Fosfotiramina-KLH

Application

Categoria di ricerca
Trasduzione del segnale

Immunoprecipitazione:
2-4 μg di un lotto precedente inducevano l′immunoprecipitazione quantitativa delle proteine contenenti fosfotirosina nel lisato di una coltura confluente (piastra da 10 cm) di cellule che esprimevano una tirosin chinasi attivata. Per conservare la fosfotirosina, aggiungere: 0,2 mM di sodio ortovanadato al tampone di lisi.

L′anticorpo anti-fosfotirosina, clone 4G10, rileva le proteine con tirosina fosforilata in tutte le specie. Questo anticorpo monoclonale esclusivo è convalidato per l′uso nei saggi di IC, IH, IP, WB ed è supportato da centinaia di pubblicazioni.

Sottocategoria di ricerca
Comuni modificazioni post traduzionali

Biochem/physiol Actions

Questo anticorpo riconosce le proteine con tirosina fosforilata da tutte le specie.

Physical form

Cromatografia con Protein G-Sepharose

Formato: purificato

IgG2bκ monoclonali purificate di topo in tampone contenente Tris-glicina 0,1 M, pH 7,4, NaCl 0,15 M, azoturo di sodio allo 0,05%. Liquido a 2-8ºC.
IgG2bκ monoclonali di topo prodotte in vitro da ibridoma murino 4G10 (linea cellulare FOX-NY [derivata dalla linea cellulare NS-1] - cellule di mieloma x cellule spleniche).

Preparation Note

A 2-8°C stabile per 1 anno dalla data di ricezione.

NON CONGELARE.
Per recuperare il massimo del prodotto, centrifugare il flaconcino originale prima di togliere il tappo. Se il prodotto è stato inavvertitamente congelato e scongelato, farlo girare a 13.000 x g per 10 minuti a 2-8ºC. Tenere da parte il surnatante per l′applicazione.

Analysis Note

Controllo
controllo antigenico positivo: N° Cat. 12-302, lisato di cellule A431 stimolate con EGF. Aggiungere 2,5 µL di 2-mercaptoetanolo/100 µL di lisato e fare bollire per 5 minuti per ridurre la preparazione. Caricare 20 µg di lisato ridotto per corsia di minigel.

Valutata di routine su cellule di carcinoma umano A431 trattate con EGF.

Saggio di Western blotting:
questo lotto alla concentrazione di 0,5-2 μg/mL ha rivelato le proteine fosforilate in tirosina n un lisato per RIPA modificato ottenuto da cellule A431 di carcinoma umano trattate con EGF (Cohen, B., 1990; Druker, B. J.,1989; Kanakura, Y., 1991).

Other Notes

Concentrazione: per la concentrazione specifica del lotto, fare riferimento al Certificato di Analisi.

Legal Information

4G10 is a registered trademark of Upstate Group, Inc.

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

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Informazioni sulla sicurezza

• Classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: nwg
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable