05-321X
Anticorpo anti-fosfotirosina, clone 4G10®
clone 4G10®, Upstate®, from mouse
Sinonimo/i:
Clone 4G10 Anti-Phosphotyrosine, Phosphotyrosine Detection Antibody
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Prodotti consigliati
Origine biologica
mouse
Livello qualitativo
Forma dell’anticorpo
purified immunoglobulin
Tipo di anticorpo
primary antibodies
Clone
4G10®, monoclonal
Reattività contro le specie
vertebrates
Produttore/marchio commerciale
Upstate®
tecniche
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
Isotipo
IgG2bκ
Condizioni di spedizione
wet ice
modifica post-traduzionali bersaglio
phosphorylation (pTyr)
Descrizione generale
Per mezzo delle protein chinasi è possibile marcare alcuni residui della tirosina con un gruppo fosfato (fosforilazione). (Nello stato fosforilato assume il nome di fosfotirosina.) La fosforilazione della tirosina è considerata uno dei passaggi chiave nella trasduzione del segnale e nella regolazione dell′attività enzimatica.
L′avvento degli anticorpi anti-fosfotirosina è uno degli eventi significativi nella ricerca sulla trasduzione del segnale. Prima che fossero disponibili gli anticorpi anti-fosfotirosina, la tirosil fosforilazione delle proteine e degli enzimi era studiata per mezzo di esperimenti radioattivi pericolosi e che richiedevano molto tempo. Gli anticorpi anti-fosfotirosina sono comunemente usati nei western blot dopo immunoprecipitazione delle proteine bersaglio per misurare la tirosil fosforilazione delle proteine. Gli anticorpi anti-fosfotirosina si usano anche direttamente sulle cellule lisate per esaminare la variazione complessiva del livello di fosforilazione della tirosina in risposta a diversi trattamenti.
L′avvento degli anticorpi anti-fosfotirosina è uno degli eventi significativi nella ricerca sulla trasduzione del segnale. Prima che fossero disponibili gli anticorpi anti-fosfotirosina, la tirosil fosforilazione delle proteine e degli enzimi era studiata per mezzo di esperimenti radioattivi pericolosi e che richiedevano molto tempo. Gli anticorpi anti-fosfotirosina sono comunemente usati nei western blot dopo immunoprecipitazione delle proteine bersaglio per misurare la tirosil fosforilazione delle proteine. Gli anticorpi anti-fosfotirosina si usano anche direttamente sulle cellule lisate per esaminare la variazione complessiva del livello di fosforilazione della tirosina in risposta a diversi trattamenti.
Specificità
Questo anticorpo riconosce le proteine con tirosina fosforilata da tutte le specie.
Immunogeno
Fosfotiramina-KLH
Applicazioni
Categoria di ricerca
Trasduzione del segnale
Trasduzione del segnale
Immunoprecipitazione:
2-4 μg di un lotto precedente inducevano l′immunoprecipitazione quantitativa delle proteine contenenti fosfotirosina nel lisato di una coltura confluente (piastra da 10 cm) di cellule che esprimevano una tirosin chinasi attivata. Per conservare la fosfotirosina, aggiungere: 0,2 mM di sodio ortovanadato al tampone di lisi.
2-4 μg di un lotto precedente inducevano l′immunoprecipitazione quantitativa delle proteine contenenti fosfotirosina nel lisato di una coltura confluente (piastra da 10 cm) di cellule che esprimevano una tirosin chinasi attivata. Per conservare la fosfotirosina, aggiungere: 0,2 mM di sodio ortovanadato al tampone di lisi.
L′anticorpo anti-fosfotirosina, clone 4G10, rileva le proteine con tirosina fosforilata in tutte le specie. Questo anticorpo monoclonale esclusivo è convalidato per l′uso nei saggi di IC, IH, IP, WB ed è supportato da centinaia di pubblicazioni.
Sottocategoria di ricerca
Comuni modificazioni post traduzionali
Comuni modificazioni post traduzionali
Qualità
Valutata di routine su cellule di carcinoma umano A431 trattate con EGF.
Saggio di Western blotting:
questo lotto alla concentrazione di 0,5-2 μg/mL ha rivelato le proteine fosforilate in tirosina n un lisato per RIPA modificato ottenuto da cellule A431 di carcinoma umano trattate con EGF (Cohen, B., 1990; Druker, B. J.,1989; Kanakura, Y., 1991).
Saggio di Western blotting:
questo lotto alla concentrazione di 0,5-2 μg/mL ha rivelato le proteine fosforilate in tirosina n un lisato per RIPA modificato ottenuto da cellule A431 di carcinoma umano trattate con EGF (Cohen, B., 1990; Druker, B. J.,1989; Kanakura, Y., 1991).
Descrizione del bersaglio
Dipende dal peso molecolare della proteina con tirosina fosforilata rilevata.
Stato fisico
Cromatografia con Protein G-Sepharose
Formato: purificato
IgG2bκ monoclonali purificate di topo in tampone contenente Tris-glicina 0,1 M, pH 7,4, NaCl 0,15 M, azoturo di sodio allo 0,05%. Liquido a 2-8ºC.
IgG2bκ monoclonali di topo prodotte in vitro da ibridoma murino 4G10 (linea cellulare FOX-NY [derivata dalla linea cellulare NS-1] - cellule di mieloma x cellule spleniche).
IgG2bκ monoclonali di topo prodotte in vitro da ibridoma murino 4G10 (linea cellulare FOX-NY [derivata dalla linea cellulare NS-1] - cellule di mieloma x cellule spleniche).
Stoccaggio e stabilità
A 2-8°C stabile per 1 anno dalla data di ricezione.
NON CONGELARE.
Per recuperare il massimo del prodotto, centrifugare il flaconcino originale prima di togliere il tappo. Se il prodotto è stato inavvertitamente congelato e scongelato, farlo girare a 13.000 x g per 10 minuti a 2-8ºC. Tenere da parte il surnatante per l′applicazione.
NON CONGELARE.
Per recuperare il massimo del prodotto, centrifugare il flaconcino originale prima di togliere il tappo. Se il prodotto è stato inavvertitamente congelato e scongelato, farlo girare a 13.000 x g per 10 minuti a 2-8ºC. Tenere da parte il surnatante per l′applicazione.
Risultati analitici
Controllo
controllo antigenico positivo: N° Cat. 12-302, lisato di cellule A431 stimolate con EGF. Aggiungere 2,5 µL di 2-mercaptoetanolo/100 µL di lisato e fare bollire per 5 minuti per ridurre la preparazione. Caricare 20 µg di lisato ridotto per corsia di minigel.
controllo antigenico positivo: N° Cat. 12-302, lisato di cellule A431 stimolate con EGF. Aggiungere 2,5 µL di 2-mercaptoetanolo/100 µL di lisato e fare bollire per 5 minuti per ridurre la preparazione. Caricare 20 µg di lisato ridotto per corsia di minigel.
Altre note
Concentrazione: per la concentrazione specifica del lotto, fare riferimento al Certificato di Analisi.
Note legali
4G10 is a registered trademark of Upstate Group, Inc.
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Esclusione di responsabilità
Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.
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Raccomandato
N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo
Codice della classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
nwg
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
Certificati d'analisi (COA)
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