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CC160-100ML

Sigma-Aldrich

Substrat de laminine ECMatrix-511 E8

Xeno-free laminin-511 coating for feeder-free pluripotent stem cell cultures, 100 mL (CHO-S derived, Ready-to-use)

Synonyme(s) :

Laminin coating

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About This Item

Code UNSPSC :
12352202
Nomenclature NACRES :
NA.81

Forme

liquid

Conditionnement

pkg of 100 mL

Technique(s)

cell culture | stem cell: suitable

Température de stockage

2-8°C

Description générale

"Le substrat ECMatrix permet de mettre en place des procédures de travail plus simples pour le traitement des cellules souches pluripotentes induites (CSPi) humaines. Nous gagnons du temps en n'ayant plus besoin de pré-enduire notre matériel de culture, tout en maintenant des cultures de cellules souches pluripotentes de haute qualité." - Chercheur, groupe Bioprocédés de thérapies cellulaires.

"Les cellules souches embryonnaires (SE) humaines cultivées sur le substrat ECMatrix présentent une grande viabilité cellulaire et une forte prolifération et ont pu se différencier après plusieurs repiquages. De plus, le substrat nous fait gagner du temps car nous n'avons plus besoin de pré-enduire le matériel de culture." - Scientifique sénior spécialiste des cellules souches, groupe Développement de procédés de médecine régénérative.

Les cellules souches pluripotentes humaines (CSE et CSPi) expriment principalement le type d'intégrine α6β1 et peuvent donc être maintenues de manière stable et cultivées efficacement sans cellules nourricières sur des récipients de culture enduits de sa partenaire de liaison, la laminine-511. Toutefois, la laminine-511 n'est pas adaptée à la production à grande échelle en raison de son haut poids moléculaire et de sa nature hétérotrimère. Le groupe du professeur Kiyotoshi Sekiguchi (Matrixome, Inc.) a résolu ce problème en produisant un fragment E8 recombinant de la laminine-511 à grande échelle, conservant la totalité de l'activité de liaison à l'intégrine.

Application

Revêtement de laminine-511 exempt de xéno-contaminants pour cultures de cellules souches pluripotentes sans cellules nourricières, 100 ml (dérivé de cellules CHO-S, prêt à l'emploi)

Caractéristiques et avantages

Le substrat de laminine ECMatrix-511 E8 peut être utilisé pour la culture de cellules souches pluripotentes dans des conditions exemptes de cellules nourricières avec de nombreux avantages supplémentaires par rapport aux méthodes traditionnelles, notamment :

  • Format sans contaminants animaux ni xéno-contaminants : uniforme d'un lot à l'autre, sans qu'aucun précriblage ne soit nécessaire.
  • Pas besoin de pré-enduire les plaques : gagnez du temps en l'ajoutant simplement lors du repiquage des cellules.
  • Permet de repiquer des cellules isolées sans utiliser l'inhibiteur de kinase ROCKi : idéal pour l'édition du type CRISPR ou l'isolement de clones.
  • Taux d'adhésion et vitesse de croissance plus élevés : pour démarrer plus rapidement vos expériences.
  • Facile à manipuler : pas besoin de refroidir les consommables de culture cellulaire.

Conditionnement

100 ml

Composants

1 x 100 ml de substrat de laminine ECMatrix-511 E8 (1,6 μg/ml dans un mélange PBS/HSA recombinante). Produit exprimé dans des cellules CHO-S.

Qualité

  • Pureté (SDS-Page) : > 95 %
  • Analyse d'endotoxines : = 750 UE/mg
  • Analyse de mycoplasmes : Négatif
  • Essai de stérilité : Négatif
  • Test de liaison à l'intégrine (kDa) = 10 nM

Notes préparatoires

Méthode avec pré-enduction :

1. Enduire d'ECMatrix-511 les supports à une concentration de 0,25 μg/cm2 (par exemple, pour un puits d'une plaque à 6 puits, ajouter 1,5 ml).
2. Incuber pendant 1 heure à 37 °C, 3 heures à température ambiante ou toute une nuit à 4 °C.
3. Avant utilisation, retirer de la surface enduite le fluide restant (ne pas rincer).
4. Détacher les cellules sous forme de petits amas en utilisant Accutase.
5. Cultiver les cellules à la densité souhaitée.

Remarque : Ne pas laisser sécher les plaques.

Stockage et stabilité

Les substrats de laminine ECMatrix-511 E8 doivent être conservés entre 2 et 8 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées et protéger de la lumière.

Clause de non-responsabilité

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 2

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Certificats d'analyse (COA)

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