Benzonase can be inactivated through various methods such as treatment with NaOH, EDTA and warming with EDTA at 70°C, or guanidine HCl. However, it is important to note that a guanidine HCl concentration exceeding 100 mM can completely inhibit the enzyme activity. Additionally, while an EDTA concentration of 1mM partially inhibits Benzonase endonuclease, a concentration of 5 mM EDTA leads to a loss of over 90% of enzyme activity due to the complexing of the essential Mg2+ ions.
70746
Benzonase® Nuclease
Purity > 99%
Synonyme(s) :
Endonucléase from Serratia marcescens
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About This Item
Numéro CAS:
Numéro MDL:
Code UNSPSC :
12352202
Nomenclature NACRES :
NA.54
Produits recommandés
Nom du produit
Nucléase Benzonase®, pureté > 90 %,
Source biologique
Serratia marcescens
Niveau de qualité
Produit recombinant
expressed in E. coli
Essai
>90% (SDS-PAGE)
Forme
buffered aqueous glycerol solution
Fabricant/nom de marque
Novagen®
Conditions de stockage
OK to freeze
Concentration
25-29 units/μL
Application(s)
research use
Conditions d'expédition
wet ice
Température de stockage
−20°C
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Description générale
La nucléase Benzonase® est une endonucléase génétiquement modifiée issue de Serratia marcescens. Elle dégrade toutes les formes d'ADN et d'ARN (simple brin, double brin, linéaire et circulaire) sans présenter la moindre activité protéolytique. Elle est efficace dans une multitude de conditions et possède une activité spécifique exceptionnellement élevée. Cette enzyme digère entièrement les acides nucléiques en oligonucléotides à extrémité 5′-monophosphate de 2 à 5 bases de long (en dessous du seuil d'hybridation), ce qui est idéal pour éliminer les acides nucléiques mélangés aux protéines recombinantes et permet de se conformer aux directives de la FDA concernant la contamination par les acides nucléiques. La capacité de la Benzonase à hydrolyser rapidement les acides nucléiques en fait l'enzyme de choix pour réduire la viscosité et ainsi abaisser le temps de traitement et accroître les rendements en protéine. Par exemple, cette enzyme est compatible avec les réactifs d'extraction protéique BugBuster et PopCulture et peut donc être ajoutée à ces derniers pour faire disparaître la viscosité et éliminer les acides nucléiques des extraits d'E. coli.
L'enzyme se compose de deux sous-unités de 30 kDa chacune. Elle est fonctionnelle entre pH 6 et pH 10 et entre 0 °C et 42 °C et son activation nécessite la présence de Mg2+ 1 à 2 mM. Elle est également active en présence de détergents ioniques et non ioniques, d'agents réducteurs, de PMSF (1 mM), d'EDTA (1 mM) et d'urée (l'activité relative dépend des conditions spécifiques). Son activité est inhibée par les cations monovalents > 150 mM, le phosphate > 100 mM, le sulfate d'ammonium > 100 mM et le chlorhydrate de guanidine > 100 mM.
La nucléase Benzonase est déclinée en deux qualités, ultrapure (> 99 % par SDS-PAGE) et pure (> 90 %), disponibles en concentration standard (25 à 29 U/µl) ou élevée (250 U/µl). Les deux préparations sont exemptes de protéases détectables et présentent une activité spécifique > 1 × 106 U/mg de protéine. La qualité ultrapure (> 99 %) est testée pour confirmer l'absence d'endotoxines et contient < 0,25 EU/1 000 unités. Le produit est fourni dans du glycérol à 50 %. À conserver à -20 °C.
Endotoxines totales : < 0,25 EU/1 000 unités. Pureté : > 90 % par SDS-PAGE.
L'enzyme se compose de deux sous-unités de 30 kDa chacune. Elle est fonctionnelle entre pH 6 et pH 10 et entre 0 °C et 42 °C et son activation nécessite la présence de Mg2+ 1 à 2 mM. Elle est également active en présence de détergents ioniques et non ioniques, d'agents réducteurs, de PMSF (1 mM), d'EDTA (1 mM) et d'urée (l'activité relative dépend des conditions spécifiques). Son activité est inhibée par les cations monovalents > 150 mM, le phosphate > 100 mM, le sulfate d'ammonium > 100 mM et le chlorhydrate de guanidine > 100 mM.
La nucléase Benzonase est déclinée en deux qualités, ultrapure (> 99 % par SDS-PAGE) et pure (> 90 %), disponibles en concentration standard (25 à 29 U/µl) ou élevée (250 U/µl). Les deux préparations sont exemptes de protéases détectables et présentent une activité spécifique > 1 × 106 U/mg de protéine. La qualité ultrapure (> 99 %) est testée pour confirmer l'absence d'endotoxines et contient < 0,25 EU/1 000 unités. Le produit est fourni dans du glycérol à 50 %. À conserver à -20 °C.
Endotoxines totales : < 0,25 EU/1 000 unités. Pureté : > 90 % par SDS-PAGE.
Application
Pour l'élimination des acides nucléiques présents dans les échantillons protéiques.
Actions biochimiques/physiologiques
Digère l′ADN et l′ARN endogènes ou dénaturés par voie thermique.
Avertissement
Toxicité : Manipulation standard (A)
Définition de l'unité
Une unité est définie comme la quantité d'enzyme provoquant un ΔA₂₆₀ de 1,0 en 30 minutes, ce qui correspond à la digestion complète de 37 µg d′ADN.
Informations légales
Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Code de la classe de stockage
10 - Combustible liquids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 2
Certificats d'analyse (COA)
Recherchez un Certificats d'analyse (COA) en saisissant le numéro de lot du produit. Les numéros de lot figurent sur l'étiquette du produit après les mots "Lot" ou "Batch".
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How can 70746 Benzofane be inactivated without using NaOH?
1 answer-
Helpful?
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Can proteinase K be utilized to inactivate Benzonase? This is to prevent further DNA degradation post-sampling. Would it be adequate to treat it with a final concentration of 10 mg/ml of proteinase K for 20 minutes at 55°C?
1 answer-
There is currently no available data on the conditions required for inactivating benzonase by proteinase K. However, it is known that benzonase can be reversibly inactivated by metal ion chelators, such as EDTA and EGTA. Irreversible inactivation can also be achieved through extreme conditions (100 mM NaOH at 70°C for 30 minutes).
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