Ultrafiltration von Proteinproben
Was ist Ultrafiltration?
Ultrafiltration (UF) ist ein Verfahren zur Trennung extrem kleiner Partikel und gelöster Moleküle von Flüssigkeiten. Die primäre Grundlage für die Trennung ist die Molekülgröße, obwohl die Filterdurchlässigkeit durch die chemischen, molekularen oder elektrostatischen Eigenschaften der Probe beeinflusst werden kann. Damit eine Trennung durch Ultrafiltration erfolgen kann, müssen sich die Moleküle in ihrer Größe um mindestens eine Größenordnung unterscheiden und ein Molekulargewicht zwischen 1 kDa und 1000 kDa aufweisen. Ultrafiltrationsmembranen können entweder zur Aufreinigung des Filtrats (durch den Filter geleitete Lösung) oder zum Sammeln des Retentats (vom Filter zurückgehaltenes Material) verwendet werden.
Die Ultrafiltration wird in der Regel zu folgenden Zwecken eingesetzt:
- Trennen von Proteinen und Pufferbestandteilen für Pufferaustausch, Entsalzung oder Konzentration
- Entfernen oder Austauschen von Zuckern
- Entfernen oder Austauschen von nicht-wässrigen Lösungsmitteln
- Trennung von freien und proteingebundenen Liganden
- Entfernen von Materialien mit niedrigem Molekulargewicht
- Schnell wechselnde Ionen- und/oder pH-Umgebung
Ultrafiltration vs Dialyse
Als Dialyse wird die Abtrennung von Partikeln und gelösten Molekülen aus Flüssigkeiten aufgrund ihrer Fähigkeit, eine Membran zu durchdringen, bezeichnet. Ähnlich wie die Ultrafiltration wird die Dialyse zur Trennung von Produkten nach ihrem Molekulargewicht eingesetzt. Sowohl die Ultrafiltration als auch die Dialyse können für die Aufreinigung, den Austausch von Lösungsmitteln und die Entsalzung eingesetzt werden, wobei jedes Verfahren Vorteile für bestimmte Anwendungen bietet. Laden Sie unsere Infografik zur Ultrafiltration herunter, um mehr über die Vorteile von Dialyse und Ultrafiltration zu erfahren.
Ultrafiltration vs Mikrofiltrationsmembranen
Ultrafiltrationsmembranen, einschließlich Ultracel® Membranen aus regenerierter Zellulose, sind Membranen, die aus zwei verschiedenen Schichten bestehen (Abbildung 1):
- Einer dünnen (0,1-1,5 µm), dichten Hautschicht mit einem Porendurchmesser von 10-400 Angström
- Einer hochporösen Unterstruktur
Im Gegensatz zur porösen Unterstruktur ermöglicht die dichte Hautschicht auf Zellulosebasis aufgrund ihrer hochgradig kontrollierten und präzisen Porengröße präzise molekulare Ausschlussgrenzen (MWCO). Wenn die Partikel unterhalb der MWCO liegen und die dichte Hautschicht durchdringen können, sind sie in der Lage, frei durch die poröse Membran zu gelangen.
Mikroporöse Membranen sind starre, kontinuierliche Netze aus polymerem Material mit definierten Porengrößen. Sie werden zum Zurückhalten von Bakterien, Kolloiden und Partikeln verwendet (Abbildung 2). Die Partikel werden entweder auf der Membranoberfläche zurückgehalten oder in ihrer Unterstruktur (Tiefenfilter) eingeschlossen.
Abbildung 1.Querschnitt einer Ultrafiltrationsmembran mit Haut und poröser Unterstruktur
Abbildung 2.Querschnitt einer traditionellen mikroporösen Membran mit durchgehend einheitlicher Porenstruktur
Ultrafiltration im Labor einsetzen
Wir bieten eine Vielzahl von Ultrafiltrationsmembranen und -einheiten an, um sicherzustellen, dass wir den Anforderungen Ihrer spezifischen Anwendung entsprechen. Auf der Grundlage allgemeiner Anwendungskriterien und Probeneigenschaften haben unsere Wissenschaftler eine Tabelle erstellt, in der aufgeführt ist, welches Amicon® Produkt für welche Anwendung am besten geeignet ist. Nutzen Sie die nachstehenden Links, um mehr über die Möglichkeiten unserer einzelnen Ultrafiltrationsprodukte zu erfahren.
Sie sind noch unsicher, wie die Ultrafiltration in Ihrem Labor eingesetzt werden kann? Sehen Sie sich unsere Ultrafiltrationsprotokolle für die Vorbereitung von Proteinproben an, um zu erfahren, wie Sie Ihre Probenvorbereitung beschleunigen und verbessern können.
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