KCQS08

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™, ROX Low^™

with Low ROX for ABI and Stratagene instruments

• Synonym(e): KiCqStart^® One Step Probe RT-qPCR Readymix^™
• UNSPSC-Code: 41106300
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Form: liquid
• Verwendung: sufficient for 500 reactions
• Leistungsmerkmale: dNTPs included; hotstart
• Lagerbedingungen: protect from light
• Methode(n): qPCR: suitable
• Farbe: light blue
• Aufnahme: purified RNA
• Kompatibilität: ABI 7500 Fast; ABI 7500; ABI QuantStudio; ABI ViiA 7; Agilent AriaMx; Douglas Scientific IntelliQube; Qiagen Corbett Rotor-Gene Q; Strategene Mx3000P; Strategene Mx3005P; Strategene Mx4000
• Nachweisverfahren: probe-based
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ ist ein gebrauchsfertiger, hochempfindlicher Master-Mix zur quantitativen Reverse-Transkriptase-PCR (RT-qPCR) von RNA-Templates mittels Hybridisierungssonden-Nachweischemikalien wie z. B. TaqMan^® 5′-Hydrolysesonden bei Einsatz von Echtzeit-PCR-Systemen (Informationen zur Auswahl der geeigneten Reagenz für Ihre Maschine finden Sie im Abschnitt zur Gerätekompatibilität). Erststrang-cDNA-Synthese und PCR-Amplifikation werden im selben Röhrchen durchgeführt, ohne dass das Röhrchen zwischen den Verfahren geöffnet werden muss. Es eignet sich ideal zur hochempfindlichen Quantifizierung von RNA-Viren oder niedrig abundanten RNA-Zielen sowie für Genexpressionsstudien mit hohem Durchsatz. Das System wurde so optimiert, dass es bei der RT-PCR maximale Effizienz, Sensitivität und Spezifität mit geringeren Reaktionsvolumen und kürzeren Durchlaufzeiten aufweist.

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ enthält alle zur RT-qPCR benötigten Bestandteile mit Ausnahme von RNA-Template und RNA-Sonde. Es ist mit allen doppelt markierten Sondenchemikalien kompatibel. Die reverse Transkriptase ist ein modifiziertes M-MLV mit reduzierter RNase-H-Aktivität und verbesserter Aktivität und Stabilität bei hohen Temperaturen. Der Einsatz hoher Temperaturen (50 bis 55 °C) beim Erststrangschritt der einstufigen RT-qPCR führt zu einer höheren Spezifität für das Primer-Annealing und zu einer Unterbrechung der RNA-Sekundärstruktur, die die cDNA-Synthese beeinträchtigen kann.

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ ist höchst resistent gegenüber PCR-Hemmern. Ein wichtiger Bestandteil von ReadyMix^™ ist eine hochreine, hochprozessive und wärmebeständige DNA-Polymerase, die mit hochaviden monoklonalen Antikörpern kombiniert ist. Dadurch wird ein extrem starker automatischer Heißstart erzielt, der die Möglichkeit von Primer-Dimeren und anderen nichtspezifischen PCR-Artefakten stark reduziert. Die hellblaue Farbe des Inertfarbstoffs vereinfacht die Mischung der Reagenzien in weißen oder farblosen Platten und trägt dazu bei, Pipettier- und Mischfehler zu reduzieren. Der Farbstoff hat keinen Einfluss auf die qPCR-Leistung oder die Stabilität des Produkts.

Anwendung

Verschiedene Echtzeit-PCR-Systeme nutzen verschiedene Strategien für die Normalisierung von Fluoreszenzsignalen und die Korrektur optischer Variationen zwischen den Wells. Es ist äußerst wichtig, das geeignete qPCR-Reagenz für Ihr spezifisches Gerät zu wählen. KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ enthält keinen internen Referenzfarbstoff. Kompatible Geräte sind u. a.:

• Applied Biosystems^® 7500
• Applied Biosystems 7500 Fast
• Applied Biosystems ViiA 7
• Applied Biosystems QuantStudio
• Agilent^® AriaMx
• Douglas Scientific IntelliQube
• QIAGEN^® Rotor-Gene^® Q
• Stratagene Mx3000P^®
• Stratagene Mx3005P^®
• Stratagene Mx4000^™

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Assay-Ergebnisse in nur 33 Minuten
• Hocheffiziente und empfindliche Echtzeit-PCR-Ergebnisse
• Wenig bis keine Optimierung erforderlich

Komponenten

2x Reaktionspuffer mit dATP, dCTP, dGTP, dTTP, Magnesiumchlorid, reverser Transkriptase, RNase-Inhibitorprotein, Heißstart-DNA-Polymerase, ROX-Referenzfarbstoff, blauem qPCR-Inertfarbstoff und Stabilisatoren

Verpackung:
500 Reaktionen* = 5 x 1-mL-Röhrchen
* Anzahl der Reaktionen auf Grundlage eines Volumens von 20 μL

Rechtliche Hinweise

Agilent is a registered trademark of Agilent Technologies, Inc.

Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

KiCqStart is a registered trademark of QIAGEN Beverly Inc.

Mx3000P is a registered trademark of Agilent Technologies, Inc.

Mx3005P is a registered trademark of Agilent Technologies, Inc.

Mx4000 is a trademark of Agilent Technologies, Inc.

Qiagen is a registered trademark of Qiagen Group

ROX is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Rotor-Gene is a registered trademark of Qiagen GmbH

TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable