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F2006

Human Fibronectin

from human plasma, powder, suitable for cell culture

Synonym(e):

Fibronectin

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Über diesen Artikel

UNSPSC Code:
12352202
eCl@ss:
42020141
NACRES:
NA.75
EC Number:
289-149-2
MDL number:
Biological source:
human plasma
Form:
lyophilized powder
Technique(s):
cell culture | mammalian: suitable
Concentration:
>1 mg/mL protein
Mol wt:
450 kDa
Assay:
≥85% (SDS-PAGE)

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Produktname

Fibronectin-Humanplasma, lyophilized powder, BioReagent, suitable for cell culture

biological source

human plasma

Quality Segment

sterility

sterile

product line

BioReagent

assay

≥85% (SDS-PAGE)

form

lyophilized powder

mol wt

450 kDa

packaging

pkg of 5 x 5 mg, pkg of 1 mg, pkg of 2 mg, pkg of 5 mg

concentration

>1 mg/mL protein

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

surface coverage

1‑5 μg/cm2

impurities

HBSAG, none detected, HCV, none detected, HIV-1/HIV-2, none detected

solubility

H2O: 1 mg/mL at 37 °C (Store reconstituted solution in working aliquots at -20°C or lower.)

NCBI accession no.

UniProt accession no.

binding specificity

Peptide Source: Collagen

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

Gene Information

human ... FN1(2335)

General description

Fibronektin (FN) ist ein multifunktionales Glykoprotein, dessen Gen auf dem menschlichen Chromosom 2q34-36 lokalisiert ist. Dieses Gen umspannt 75 kb und besitzt 50 Exone. Die Fibronektin-Struktur besteht aus Blöcken sich wiederholender Peptidsequenzen, die homolog sind und eine linear auf zwei Untereinheiten angeordnete Funktionseinheit bilden. Es existieren zwei Haupt-Isoformen, eine lösliche und eine unlösliche Form. Erstere ist im Plasma vorhanden, während die unlösliche Form in Geweben und der extrazellulären Matrix (ECM) von Knorpel vorhanden ist. Es gibt etwa 20 verschiedene Formen von Fibronektinproteinen aufgrund des alternativen Spleißens einer variablen Region und zwei Typ-III-Exonen, die als Extradomäne A und B bezeichnet werden.[1]

Application

Fibronektin aus Humanplasma wird für die folgenden Anwendungen eingesetzt:
  • Zellaussaat und neuronale Differenzierung (als eine der Komponenten in Expansionsmedium für die Resuspendierung von Nabelschnurblut-Stammzellen (CBSC) sowie in Differenzierungsmedium)[2]
  • Zellkultur (die Kulturkammer wird zur Expression von HEK293-Zellen mit Fibronektin beschichtet)[3]
  • In-vitro-Fibronektin(FN)-Pulldown-Assays[4]
  • Proteinspezifität[5]
  • Zellmigrationsstudien[6]

Biochem/physiol Actions

Fibronektin (FN) spielt eine wichtige Rolle bei zahlreichen biologischen Funktionen wie Angiogenese, Zellmigration, Adhäsion zwischen Zellen, Anhaftung zwischen Zellen und Basalmembran, Gerinnselstabilisierung, Embryogenese, Differenzierung, Wundheilung sowie die Bindung von Krankheitserregern an Säugetierzellen und die extrazelluläre Matrix. Studien in chinesischen Han-Populationen zeigen, dass Mutationen in diesem Gen mit einer Anfälligkeit für Kniearthrose verbunden sein könnten.[1] Die Spleißvariante Extradomäne B (EDB) von FN ist ein Kennzeichen der Tumorangiogenese, und mit erhöhter Matrixsteifigkeit ist eine gesteigerte Produktion dieser Isoform durch Endothelialzellen zu verzeichnen.[7] Beim Dickdarmkrebs wird EDA mit Metastasen, Vaskulogenese und Tumorgenese assoziiert und fördert die epitheliale-mesenchymale Transition.[8]

Preparation Note

Dieses Produkt wird aus 0,05 M Tris-gepufferter Kochsalzlösung bei einem pH-Wert von 7,5 lyophilisiert. Es ist zu 1 mg/ml in Wasser löslich und sollte mindestens 30 Minuten lang bei 37 °C aufgelöst werden. Dabei kann eine geringe Menge ungelösten Materials verbleiben, was jedoch die Leistung nicht beeinflusst. Die Proteinhomogenität wird mittels Immunelektrophorese beurteilt, das Protein wird auf Endotoxine getestet und der Befund des Ausgangsmaterials im Test auf HIV, Hepatitis B, Hepatitis C und Syphilis war negativ. Bei der Beschichtung von Kulturoberflächen sollte Fibronektin in ausgeglichener steriler Kochsalzlösung verdünnt und möglichst dünn aufgetragen werden. Die behandelte Oberfläche sollte anschließend 45 Minuten lang bei Raumtemperatur luftgetrocknet werden und kann 2 bis 4 Wochen bei 2–8 °C gelagert werden.

Disclaimer

Die rekonstituierte Lösung sollte in Arbeitsaliquoten bei -20 °C oder darunter aufbewahrt werden. Vortexen, übermäßiges Rühren oder zusätzliches Einfrieren/Auftauen des rekonstituierten Fibronectins werden nicht empfohlen.
NUR FÜR FORSCHUNGSZWECKE. Dieses Produkt unterliegt in Frankreich den Vorschriften für den Gebrauch zu wissenschaftlichen Zwecken, auch bei der Ein- und Ausfuhr (Artikel L 1211-1 Absatz 2 des französischen Gesundheitsgesetzes). Der Käufer (d. h. der Endverbraucher) ist verpflichtet, eine Einfuhrgenehmigung des französischen Forschungsministeriums gemäß Artikel L1245-5-1 II. des französischen Gesundheitsgesetzes einzuholen. Mit der Bestellung dieses Produkts bestätigen Sie, dass Sie über die entsprechende Einfuhrgenehmigung verfügen.

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F1056F0895F0162
description

lyophilized powder, BioReagent, suitable for cell culture

description

lyophilized powder, BioReagent, suitable for cell culture, ≥95% (SDS-PAGE)

description

liquid, 0.1% (Solution), BioReagent, suitable for cell culture

description

lyophilized powder, 45 kDa

biological source

human plasma

biological source

human plasma

biological source

human plasma

biological source

human plasma

sterility

sterile

sterility

sterile

sterility

sterile

sterility

-

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

assay

≥85% (SDS-PAGE)

assay

≥95% (SDS-PAGE)

assay

-

assay

≥90% (SDS-PAGE)

concentration

>1 mg/mL protein

concentration

-

concentration

0.1% (Solution)

concentration

-

Quality Level

200

Quality Level

200

Quality Level

200

Quality Level

200


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Lagerklasse

11 - Combustible Solids

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)



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Questions

1–9 of 9 Questions  
  1. How long can I store the fibronectin solution?

    1 answer
    1. Prepared solutions are stable for 2-4 weeks at 2-8 °C. Solutions may also be stored in working aliquots at -20°C for up to 2 years. Avoid repeated freeze/thaw cycles. Thaw frozen aliquots overnight at 2-8 °C. Please see the link below to review additional information available in the product datasheet:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/220/559/f2006pis.pdf

      Helpful?

  2. How long can I store fibronectin coated plates, etc?

    1 answer
    1. Fibronectin coated cultureware can be stored for 2-4 weeks at 2-8 °C in a closed sterile container, or in sterile sealable bags.

      Helpful?

  3. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

      Helpful?

  4. What is the procedure for coating culture surfaces with fibronectin?

    1 answer
    1. To coat culture surfaces: 1. Dilute fibronectin in sterile balanced salt solution and coat the culture surface (1-5 μg/cm2) with a minimal volume.  2. Allow to air dry for at least 45 minutes at room temperature.  Excess fibronectin may be removed by aspiration, but this is not necessary.

      Helpful?

  5. How do I determine how much fibronectin is in solution?

    1 answer
    1. As the product may contain undissolved material, the amount of fibronectin in solution can be determined by UV absorbance.  The extinction coefficient for a 1% solution (10 mg/ml) is 13.5 at 280 nm.

      Helpful?

  6. How do I test the wells/flasks that have been coated with fibronectin?

    1 answer
    1. We test the coated culture surface by culturing cells.  We compare the adherence of the cells to wells that have been coated with media containing BSA (negative) and media containing 10% FBS (positive).  The cell growth should be not less than 50% of the positive control and greater than 50% of the negative control.

      Helpful?

  7. How do I choose which fibronectin product to use to coat culture surfaces for cell growth?

    1 answer
    1. The species source for the fibronectin used when coating culture surfaces is not important.  It is the presence of the RGD binding site that is present in all fibronectins that promotes binding.

      Helpful?

  8. What is the difference between Fibronection Products F2006 and F1056?

    1 answer
    1. The difference between Product Nos. F2006 and F1056 is in the purity specifications and endotoxin testing.  Product  No. F2006 has a purity specification of ≥90% and is not tested for endotoxin contamination.  Product No. F1056 has a purity specification of ≥95% and is tested for endotoxin contamination with a specification of ≤100 EU/mg.

      Helpful?

  9. How do I solubilized Fibronectin?

    1 answer
    1. Dissolve at 1 mg/mL in water. Allow to dissolve for at least 30 minutes at 37 °C. A small amount of undissolved material may remain. This will not affect product performance.

      Helpful?

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