PEFBSC-RO

Pefabloc^® SC

powder, solubility: 100 mg/mL in aqueous buffer, suitable for blocking, suitable for protein purification

• Synonym(e): Pefabloc^® SC, 4-(2-Aminoethyl)benzolsulfonylfluorid, 4-2-Aminoethylbenzolsulfonylfluorid, AEBSF, Proteinase-K-Hemmer
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• form: powder
• mol wt: M_r 239.5
• packaging: pkg of 1 g (11429876001), pkg of 100 mg (11429868001), pkg of 500 mg (11585916001)
• manufacturer/tradename: Roche
• technique(s): blocking: suitable, protein purification: suitable
• mp: 175-185 °C
• solubility: aqueous buffer: 100 mg/mL
• storage temp.: 2-8°C

Beschreibung

General description

Pefabloc SC ist ein spezifischer, potenter und irreversibler Inhibitor von Serinproteasen. Die hemmende Aktivität ist mit PMSF oder DFP vergleichbar, aber Pefabloc SC ist nicht toxisch.

Application

• Pefabloc SC wird zur Hemmung der schädlichen Wirkungen von Proteasen während der präparativen Proteinaufreinigung verwendet.[1][2]
• Aufgrund seiner geringen Toxizität gegenüber eukaryotischen Zellen kann es für die Produktion von rekombinanten Proteinen und während der Fermentation von transformierten Zellen eingesetzt werden, wenn proteolytischer Verdau die Ausbeute an den gewünschten Proteinen verringern könnte.[3]
• Pefabloc SC wird für die vollständige Inaktivierung der Proteinase K während der Präparation von chromosomaler DNA in Agarose-Plugs verwendet. Zu diesem Zweck werden die Zellen in Agarose eingebettet und mit Proteinase K verdaut, um alle Proteine abzubauen. Bevor eine spezifische Restriktionsendonuklease hinzugefügt wird, wird die Proteinase K inaktiviert, indem die Agarose-Plugs in 1 bis 5 mM Pefabloc SC in 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA , pH 7 für 2 Stunden bei +37 °C oder über Nacht inkubiert werden.
• Im Gegensatz zu PMSF ist Pefabloc SC ein hervorragender Blocker der Thrombinaktivität in Serum oder Plasma. In diesen biologischen Flüssigkeiten interagiert PMSF reversibel mit Albumin. Dadurch wird dessen freie Konzentration verringert und die Inaktivierung des Thrombins verzögert. Pefabloc SC reagiert jedoch nicht mit Serumalbumin und zeigt eine dreifach höhere Kapazität zur Inaktivierung von Thrombin unter ähnlichen Bedingungen.[4][5]
• Pefabloc SC kann mit lebenden Zellen verwendet werden.
• Pefabloc SC kann zur Inaktivierung der Proteinase K zum Beispiel während der Pulsed-Field-Gelelektrophorese (PFGE) eingesetzt werden. Bei diesem Verfahren ist Proteinase K für den Abbau der zellulären Bestandteile bei der Isolierung der genomischen DNA erforderlich, und diese sehr robuste Protease ist schwierig zu inaktivieren. Pefabloc SC hemmt die Proteinase K und sichert die Stabilität der Restriktionsenzyme, die für die weitere DNA-Analyse eingesetzt werden.

Biochem/physiol Actions

Pefabloc SC gehört zur Familie der Sulfonylfluoride, die Serinproteasen irreversibel blockieren. Es wurde auch beschrieben, dass Pefabloc SC ein potenter Inhibitor von Serin-/Threonin-Phosphatase ist.

Features and Benefits

• Einfach anzuwendender Inhibitor. Das wasserlösliche Pefabloc SC kann direkt zu wässrigen Puffern dazugegeben werden.
• Keine gefährlichen Substanzen. Nicht toxische Proteasehemmung wird ohne Risiko für Sie oder andere (siehe Abbildung 1) erreicht.
• Schutz durch verbesserte Stabilität. Konstante Proteasehemmung gelingt auch bei pH-Werten über 7,0 und Temperaturen über +4°C (siehe Abbildung 2).
• Maximale Hemmung. Konzentration des aktiven Hemmstoffs ist zuverlässig hoch genug durch ein sicher lösliches und stabiles Produkt.

Preparation Note

Arbeitskonzentration: 0,1 bis 1 mg/ml (0,4 bis 4 mM)
Arbeitslösung: Empfohlen wird eine Lösung in wässrigen Puffern oder destilliertem Wasser in einer Konzentration bis 100 mg/ml.

Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C (Stammlösung)
Die Stabilität von Pefabloc SC in wässriger Lösung wird sowohl vom pH-Wert als auch von der Temperatur beeinflusst. In destilliertem Wasser angesetzte konzentrierte Stammlösungen (z. B. 100 mM) sind sauer und bei Lagerung in Aliquots bei -15 bis -25 °C 1 bis 2 Monate haltbar.
Hinweis: Pefabloc SC unter sauren Bedingungen lagern und kurz vor der Anwendung zu den biologischen Proben dazugeben, um die Hydrolyse möglichst gering zu halten.

In wässrigen Puffern oder Wasser in Konzentrationen bis 100 mg/ml löslich. In Lösung bei Lagerung in Aliquots bei -15 bis -25 °C 1 bis 2 Monate haltbar. Unter schwach basischem Bedingungen (pH-Wert 8,0 bis 9,0) tritt nur geringfügige Hydrolyse auf.

Analysis Note

Funktion getestet, homogen in DC

Other Notes

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Legal Information

Pefabloc is a registered trademark of Pentapharm

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS05
• signalword: Danger
• hcodes: H314
• pcodes: P260 - P280 - P301 + P330 + P331 - P303 + P361 + P353 - P304 + P340 + P310 - P305 + P351 + P338 + P310
• Hazard Classifications: Eye Dam. 1 - Skin Corr. 1B
• Lagerklasse: 8A - Combustible corrosive hazardous materials
• wgk: WGK 2
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable