07-579

Anti-REST-Antikörper

Upstate^®, from rabbit

• Synonym(e): Neural-restrictive silencer factor, RE1-silencing transcription factor, X2 box repressor, neuron restrictive silencer factor, repressor binding to the X2 box
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: polyclonal
• Application: WB
• Citations: 123

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Segment: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• species reactivity: human
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NM_005612
• UniProt accession no.: Q13127
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... REST(5978) ; mouse ... Rest(19712) ; rat ... Rest(83618)

Beschreibung

General description

RE1-Silencing-Transkriptionsfaktor (UniProt: Q13127, auch bekannt als REST, Neural-restriktiver Silencer-Faktor, Keratin, X2-Boxrepressor) wird durch das REST-Gen (auch bekannt als NRSF, XBR) (Gen-ID: 5978) in Menschen kodiert. REST ist ein Transkriptionsrepressor, der durch Bindung eines DNA-Sequenzelements, des so genannten NRSE (Neuron-restrictive Silencer Element), wirkt. Es wird ubiquitär exprimiert, wobei eine höhere Expression in den Geweben des lymphozytären Kompartiments, einschließlich Milz, Thymus, Lymphozyten des peripheren Blutes und der Eierstöcke, zu verzeichnen ist. Er kommt auch in undifferenzierten neuronalen Vorläuferzellen vor, und es wird vermutet, dass es als negativer Hauptregulator der Neurogenese fungiert. Die Expression von REST wird als zellzyklusabhängig mit verringerten Werten in der G2-Phase angegeben. Es ist an der Aufrechterhaltung des Ruhestatus von neuronalen Stammzellen erwachsener Patienten beteiligt und verhindert deren vorzeitige Differenzierung in reife Neuronen. REST schränkt die Expression neuronaler Gene ein, indem es mit zwei verschiedenen Corepressoren, SIN3A und RCOR1, assoziiert, die ihrerseits Histondeacetylase an die Promotoren von REST-regulierten Genen rekrutieren. REST vermittelt auch die Repression, indem es den BHC-Komplex an RE1/NRSE-Stellen rekrutiert, der durch Deacetylierung und Demethylierung spezifischer Stellen auf Histonen wirkt und als Chromatinmodifikator fungiert. Mutationen im REST-Gen können zu WILMS-Tumoren führen, einer pädiatrischen Malignität der Niere, die durch eine unkontrollierte Vermehrung von Nierenstamm-, Stroma- und Epithelzellen entsteht. (Literatur: Mahamdallie, SS., et al. (2015). Nat. Genet. 47(12); 1471-1474; Huang, Z., et al. (2011). Nat. Cell Biol. 13(2); 142-152).

~160 kDa gemessen; 121,87 kDa berechnet. In manchen Lysaten können nichtcharakterisierte Banden auftreten.

Immunogen

GST-/His-markiertes rekombinantes Fragment, das 297 Aminosäuren aus der C-terminalen Region des humanen RE1-Silencing-Transkriptionsfaktors (REST) entspricht.

Application

Aktualisierte Informationen: REST ist glykosyliert. Von http://amsdottorato.cib.unibo.it/687/
Aus der Zusammenfassung:
„Schließlich wurde das Glykosylierungsmuster des REST-Proteins analysiert und ausgehend von der Feststellung, dass die berechnete Molekülmasse der REST-Sequenz etwa 116 kDa beträgt, scheint dieser Transkriptionsfaktor in Western Blot eine andere Molekülmasse aufzuweisen (siehe Tabelle 1.1): Dieser Unterschied kann durch posttranslationale Modifikationen der Proteine erklärt werden, z. B. Glykosylierung. Mehrere neue Studien unterstreichen den Stellenwert der O-Glykosylierung beim Modulieren von Transkriptions-Silencing, Protein-Phosphorylierung und Proteinabbau durch Proteasom und Protein–Protein-Wechselwirkungen [Julenius et al., 2005; Zachara und Hart, 2006]. Eine Deglykosylierungsanalyse zeigte, dass das REST-Protein in SH-SY5Y- und HEK293-Zellen oligoglykosyliert und nicht N-glykosyliert ist. Darüber hinaus ist es durch die Verwendung mehrerer Kombinationen von Deglykosylierungsenzymen möglich die Hypothese aufzustellen, dass Gal-β(1-3)-GalNAc-Reste am endogenen REST vorhanden sind, während β an rekombinantem REST-Protein, das in HEK293-Zellen exprimiert wird, (1-4)-verknüpfte Galactosereste vorhanden sein können. Der O-Glykosylierungsprozess erzeugt jedoch eine große Vielfalt von chemischen Strukturen und die Monosaccharide müssen nacheinander durch eine Reihe von Exoglykosidasen hydrolysiert werden. Weitere Experimente sind erforderlich, um alle posttranslationalen Modifikationen des Transkriptionsfaktors REST zu charakterisieren.“ Insbesondere zeigen die Autoren auf, dass REST in SH-SY5Y-Zellen bei 200 kDa migriert.

Anti-REST, Art.-Nr. 07-579, ist ein polyklonaler Antikörper aus Kaninchen, der REST nachweist und zur Verwendung in Immunpräzipitation und Western Blot geprüft wurde.

Forschungs-Unterkategorie
Transkriptionsfaktoren

Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion

Biochem/physiol Actions

Dieser polyklonale Kaninchen-Antikörper weist den RE1-Silencing-Transkriptionsfaktor (REST) nach. Er zielt auf ein Epitop innerhalb der C-terminalen Region ab.

Physical form

Aufgereinigter polyklonaler Kaninchen-Antikörper in Puffer mit 0,014 M Phosphatpuffer, pH-Wert 7,6, 0,175 M NaCl mit 0,07 % Natriumazid mit 30 % Glycerin.

Format: Aufgereinigt

Mit Protein A aufgereinigt

Preparation Note

Lagerung bei -10 °C bis -25 °C. Empfehlungen zur Handhabung: Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Analysis Note

Beurteilt mittels Western Blotting in HEK293-Zelllysat.Western-Blot-Analyse: Eine 1:1000-Verdünnung dieses Antikörpers wies REST in HEK293-Zelllysat nach.

Kontrolle
Positive Antigenkontrolle: Best.-Nr. 12-309, HeLa-Zellkern-Extrakt. Geben Sie das gleiche Volumen reduzierenden Laemmli-Probenpuffers zu 10 μl Extrakt und kochen Sie das Gemisch 5 Minuten lang ein. Beladen Sie 20 μg reduziertes Extrakt je Bahn für Minigele.

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

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