SFUKB

KAPA SYBR^® FAST

suitable for qPCR, 2 ×, Universal

• Synonyme(s) : SYBR, qPCR
• NACRES: NA.55
• UNSPSC Code: 41106300

Propriétés

• usage: sufficient for 100 reactions, sufficient for 1000 reactions, sufficient for 500 reactions, sufficient for 5000 reactions
• shelf life: ≤12 mo.
• feature: dNTPs included, hotstart
• packaging: kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4600), kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4602), kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4601), kit of 50 mL (5000 x 20 μL rxn; KK4618)
• manufacturer/tradename: Roche
• concentration: 2 ×
• technique(s): qPCR: suitable
• input: purified DNA
• compatibility: for use with Agilent Mx3000P, for use with Agilent Mx3005P, for use with Agilent Mx4000, for use with Applied Biosystems^® 5700, for use with Applied Biosystems^® 7000, for use with Applied Biosystems^® 7300, for use with Applied Biosystems^® 7500, for use with Applied Biosystems^® 7700, for use with Applied Biosystems^® 7900HT, for use with Applied Biosystems^® ViiA 7, for use with QuantStudio^™, for use with StepOne^™, for use with StepOnePlus^™
• detection method: SYBR^® Green
• storage temp.: −20°C

Description

General description

Les kits pour qPCR KAPA SYBR^® FAST contiennent la première ADN polymérase créée par évolution dirigée pour mieux tolérer l'inhibition du colorant SYBR Green I.

Grâce une plus grande robustesse, une meilleure processivité et une plus grande rapidité, les kits pour qPCR KAPA SYBR FAST permettent d'obtenir une efficacité d'amplification élevée et reproductible, pour une meilleure précision de la quantification relative lors de l'analyse de l'expression génique. Conçus pour réaliser des PCR en temps réel optimales en conditions stringentes, les kits pour qPCR KAPA SYBR FAST offrent des performances bien supérieures, qu'il s'agisse du rapport signal sur bruit (fluorescence), du cycle de quantification (Cq), de la linéarité ou de la sensibilité.

Application

Le produit KAPA SYBR^® FAST a été utilisé dans le cadre de :

• L'expression génique
• La validation de l'inactivation (knockdown) de gènes
• La validation de puces à ADN
• L'analyse ChIP
• La détection de cibles en faible nombre
• La quantification absolue de banques de NGS (séquençage de nouvelle génération)
• La PCR quantitative en temps réel

Features and Benefits

Quantification plus précise des variations de l′expression génique

• Grande efficacité de réaction (entre 95 et 105 %) qui améliore l′exactitude et la reproductibilité.
• Efficacité non biaisée sur une large gamme de taux de GC et de longueurs d′amplicon.

Détection plus répétable des cibles en faible nombre et difficiles à analyser

• Amélioration des résultats de la capacité de traitement dans les premiers scores Cq.
• Meilleure détection par fluorescence de divers composés cibles riches en AT et en GC.
• Nouvelle enzyme résistant à l′inhibition de SYBR.

Réalisation d′analyses PCR en temps réel complètes en seulement 40 minutes

• Réduction de 55 % du temps d'analyse avec le protocole à cycles rapides.
• Maintien de bonnes performances lors du basculement des protocoles standard aux protocoles rapides.

Remarques :

• Ce kit contient une enzyme modifiée, optimisée pour la qPCR associée à la chimie du colorant SYBR Green I.
• Le mélange maître 2X contient un tampon exclusif. Combiné à la nouvelle enzyme, il permet d′améliorer l′efficacité de l′amplification des cibles aussi bien riches en GC qu′en AT.
• Une dénaturation initiale de 20 secondes à 95 °C suffit pour activer l′enzyme. Il est recommandé d′appliquer une dénaturation initiale de 3 min pour les matrices complexes.
• Pour un cycle en 3 étapes, prévoyez 20 secondes pour l′hybridation des amorces et 1 seconde pour l′allongement et l′acquisition de données à 72 °C.
• Limitez le volume réactionnel à 25 μl maximum.

Preparation Note

Veillez toujours à ce que les composants soient complètement décongelés et bien mélangés avant utilisation. Le mélange maître pour qPCR KAPA SYBR^® FAST (concentré 2 ×) peut ne pas se solidifier à la congélation, même lors d'un stockage à -20 °C.

Le colorant SYBR Green I contenu dans le mélange maître pour qPCR KAPA SYBR FAST (concentré 2 ×) et les colorants ROX/fluorescéine (selon la configuration du kit) sont sensibles à la lumière. Une exposition prolongée à la lumière directe entraînera une perte de l'intensité du signal de fluorescence.

Le mélange maître pour qPCR KAPA SYBR FAST (concentré 2 ×) supporte jusqu'à 30 cycles de congélation/décongélation. Veillez à conserver tous les réactifs à l'abri de la lumière et à -20 °C lorsque vous ne les utilisez pas. Lorsqu'ils sont dans l'obscurité, les réactifs sont stables pendant au moins une semaine à 4 °C et ils peuvent être conservés à cette température pour une utilisation à court terme, sous réserve qu'ils soient protégés de toute contamination par des microbes et/ou des nucléases.

Analysis Note

Tous les composants de ce kit sont soumis à un contrôle qualité fonctionnel exigeant, ne présentent aucune activité endonucléase/exonucléase contaminante détectable et répondent à des critères stricts en matière de contamination par l'ADN.

Other Notes

Produit réservé aux activités de recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Legal Information

Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

QuantStudio is a trademark of IROA Technologies LLC

SYBR is a registered trademark of Thermo Fisher Scientific or its subsidiaries

StepOne is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

StepOnePlus is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

Composants de kit seuls

• KAPA SYBR^® FAST DNA Polymerase
• Reaction buffer
• dNTPs
• SYBR^® Green I dye
• MgCl₂ 2.5 mM
• ROX^™ High Reference Dye (50X)
• ROX^™ Low Reference Dye (50X)

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Informations sur la sécurité

• pictograms: GHS08
• signalword: Warning
• hcodes: H371
• pcodes: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• Hazard Classifications: STOT SE 2
• Classe de stockage: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
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