Système de coulage de gels mPAGE® Lux pour gels SDS-PAGE
Découvrez le système de coulage de gels mPAGE® Lux pour des gels de SDS-PAGE prêts à l'emploi en 3 minutes. Des gels SDS-PAGE fraîchement préparés, prêts lorsque vous en avez besoin. Si vous avez des questions ou souhaitez en savoir plus sur la manière de couler plus rapidement les gels, cliquez ici pour remplir le formulaire de contact et être contacté(e) par notre équipe.
Système de coulage mPAGE® Lux pour gels SDS-PAGE
Comment couler un gel pour l'électrophorèse SDS-PAGE ? Le coulage de gels consiste généralement à couler des gels de séparation et de concentration dans un procédé par étapes et qui prend du temps. Les chercheurs disposent généralement de peu d'options pour répondre à leurs besoins en matière de coulage de gel et d'électrophorèse. Notre système novateur de coulage de gels SDS-PAGE mPAGE® Lux est conçu pour offrir la flexibilité des gels coulés à la main et la fiabilité des gels précoulés, sans perte de qualité ou de temps et sans les coûts significativement plus élevés qui accompagnent les autres options. Des gels obtenus en moins de trois minutes avec notre système de coulage mPAGE® Lux. Vous pouvez dire adieu aux méthodes traditionnelles et à leurs étapes manuelles et fastidieuses de création de gel. C'est tout nouveau.
Pour en savoir plus
- Caractéristiques et avantages du système de coulage de gels mPAGE® Lux
- Quelles sont les étapes du coulage de gel ?
- Système de coulage de gels mPAGE® Lux et kit de réactifs Bis-Tris
- Protocole de coulage de gels SDS-PAGE mPAGE® Lux
- Un coulage de gels éco-responsable avec le système de coulage de gels mPAGE® Lux.
- Commander le système de coulage de gels mPAGE® Lux et les réactifs associés
Caractéristiques et avantages du système de coulage de gels mPAGE® Lux
Le système de coulage mPAGE® Lux remplace votre procédé de coulage de gel habituel par des méthodes plus rapides, plus simples et plus sûres, avec des résultats plus reproductibles. Avec le système de coulage mPAGE® Lux, polymérisez un mini gel en 90 secondes contre plus de 90 minutes avec les méthodes classiques. Notre procédure de coulage rapide avec irradiation UV accélère la polymérisation des réactifs Bis-Tris mPAGE® Lux, tandis que la chimie de gel Bis-Tris permet des temps d'exécution plus courts par rapport aux méthodes classiques.
La photopolymérisation en une seule étape utilisant des contrôles précis du système ainsi qu'un nombre réduit d'étapes de préparation signifie qu'il y a moins de risques d'erreur. Notre système de coulage mPAGE® évite les fuites et l'utilisation de gels Bis-Tris offre une qualité de bande supérieure à celle des gels Tris-Glycine coulés à la main. En outre, le kit de réactifs mPAGE® Lux, le kit de réactifs mPAGE® TurboMix et les gels précoulés mPAGE® utilisent tous la chimie Bis-Tris et partagent les mêmes tampons de migration et les mêmes colorants pour gels. Notre système de coulage mPAGE® Lux n'utilise pas d'APS ni de TEMED et offre une option plus sûre en utilisant moins de produits chimiques toxiques.
Workflow du coulage manuel classique
Figure 1.Infographie du workflow classique de coulage à la main pour les gels SDS-PAGE montrant les longues étapes et le temps de polymérisation de 90 minutes ou plus.
Workflow mPAGE®Lux
Figure 2.Comparaison du coulage de gels classique et de la méthode mPAGE® Lux. Le système de coulage de gels mPAGE® Lux comporte globalement moins d'étapes, offre un temps de polymérisation réduit et produit moins de déchets toxiques que la technologie classique de coulage de gels. Les gels créés par le système de coulage mPAGE® Lux sont compatibles avec la cuve à mini-gels mPAGE® et les cellules Mini-PROTEAN de Bio-Rad. Pour une résolution exceptionnelle et des temps d'exécution réduits, utilisez nos tampons mPAGE®. Les gels Lux sont compatibles avec les tampons Bis-Tris et les réactifs de coloration.
Quelles sont les étapes du coulage de gel ?
Couler un gel SDS-PAGE comprend souvent la pesée, le pré-mélange des solutions de gel, le coulage et le temps d'attente pour la polymérisation. Bien qu'elles soient souvent considérées comme une solution plus économique, les méthodes traditionnelles de coulage de gel à la main prennent du temps et nécessitent de nombreuses étapes manuelles qui peuvent donner lieu à des formulations de gel non homogènes. La qualité des gels coulés à la main et les données qu'ils peuvent contribuer à générer dépendent de l'homogénéité de la formulation, pour éviter de gaspiller des réactifs et un temps précieux avec des gels défectueux.
Figure 3.Comparaison de la qualité des données entre le gel Bis-Tris mPAGE® Lux et un gel Tris-Glycine coulé à la main. Qualité de bandes du gel Bis-Tris mPAGE® Lux (à gauche) comparée à celle d'un gel Tris-Glycine coulé à la main (à droite). Les deux gels sont à 10 % d'acrylamide et chargés avec un lysat de cellules humaines A431. La durée de l'électrophorèse est de 42 minutes à 200 V (gel Lux) et de 119 minutes à 120 V (gel Tris-Glycine). Les gels ont été colorés avec le colorant pour gel ReadyBlue™ Coomassie.
Le système de coulage de gels mPAGE® Lux offre une solution innovante pour votre procédure de coulage de gels. Vous n'avez plus à choisir entre gagner du temps et économiser des ressources. Notre nouveau système de coulage de gels permet aux chercheurs de couler leurs gels facilement et rapidement lorsqu'ils en ont besoin, pour une fraction du coût des technologies de gels précoulés. Améliorez l'efficacité de votre laboratoire et modernisez votre procédure d'électrophorèse sur gel avec le système de coulage de gels mPAGE® Lux.
Figure 4.Western blotting pour la comparaison des méthodes de transfert humide, rapide et semi-sèche. Les comparaisons ont été effectuées à l'aide de gels Bis-Tris mPAGE® Lux à 12 %, avec un titre de lysat de cellules humaines A431 et diverses méthodes de transfert sur des membranes Immobilon®-P. Les membranes ont été exposées à des anticorps anti-EGFR et anti-ErK1/2, puis soumises à une détection à l'aide du substrat HRP Immobilon® ECL Ultra Western. Méthode Turbo = transfert à l'aide du système de transfert Trans-Blot® Turbo™ de Bio-Rad et des packs de transfert Trans-Blot® Turbo™.
Figure 5. Reproductibilité des gels Bis-Tris mPAGE® Lux. A. Quatre gels à 8 % ont été coulés et analysés avec un titre de lysat de cellules humaines A341, puis colorés avec le colorant pour gel ReadyBlue™ Coomassie. B. La distance de migration relative (Rf) pour le marqueur de poids moléculaire non coloré a été calculée pour chaque gel. L'écart-type est indiqué pour chaque bande de protéine.
Figure 6.Analyse de la durée de conservation des réactifs Bis-Tris mPAGE® Lux. Les gels Bis-Tris mPAGE® Lux ont été coulés à l'aide de réactifs datant de (A) 0 mois, (B) 6 mois ou (C) 12 mois. Aucune différence n'a été observée dans le schéma ou la durée de l'analyse.
Système de coulage de gels mPAGE® Lux et kits de réactifs Bis-Tris
Ajoutez le système de coulage mPAGE® Lux à votre laboratoire et vous obtiendrez des gels prêts à l'emploi en moins de 3 minutes. Soufflez un peu et habituez-vous à un procédé de coulage de gel rapide, avec moins de déchets et sans le souci de l'échec. C'est tout nouveau. Nos Kits de système de coulage de gels mPAGE® Lux se composent de la station de réticulation mPAGE® Lux, du tube de mélange mPAGE® Lux, du système de coulage de gels mPAGE®, du peigne mPAGE® à 10 ou 15 puits, de la mini-plaque séparatrice mPAGE®, des plaques courtes masquées mPAGE® Lux à 10 ou 15 puits. Pour le système de coulage de gels mPAGE® Lux d'une épaisseur de 0,75 mm, le peigne à 15 puits et les plaques courtes masquées ne sont pas inclus. Retrouvez les descriptions et les configurations des kits ci-dessous :
Figure 7.Station de réticulation mPAGE® Lux
Le kit de réactifs Bis-Tris mPAGE® Lux est un kit de réactifs destiné au système de coulage de gels mPAGE® Lux. Le kit de réactifs Bis-Tris mPAGE® Lux se compose de trois éléments : la solution de séparation, le diluant et la solution de concentration. Le kit prend en charge une variété de gels d'acrylamide entre 8,0 et 13,5 %. Retrouvez la description et la configuration du Kit de réactifs mPAGE® Lux ci-dessous :
Protocole de coulage de gels SDS-PAGE mPAGE® Lux
Toutes les solutions doivent être protégées de la lumière du soleil pour éviter la polymérisation. Avant de couler les gels, amener toutes les solutions à température ambiante.
Gel de séparation
- Préparer la solution de gel de séparation en mélangeant la solution de séparation et le diluant. Voir le tableau ci-dessous pour les volumes de mélange. La solution de gel de séparation peut être préparée en grande quantité pour réaliser plusieurs gels de manière successive.
- À l'aide d'une pipette propre, ajouter la solution de séparation dans un tube de mélange noir ou dans un autre contenant opaque.
- À l'aide d'une pipette propre, ajouter le diluant dans le même tube de mélange.
- Mélanger en tournant délicatement le contenant d'un côté à l'autre. Ne pas mélanger au vortex.
Volumes de solution de gel de séparation
Utiliser les volumes ci-dessous pour réaliser un seul gel de 1,0 mm. Pour connaître les volumes de solution pour les gels de 0,75 mm et 1,5 mm, voir le guide d'utilisation complet disponible sur la page du produit sur ce site.
Gel de concentration
La solution de concentration est prête à l'emploi directement à partir du flacon. Utiliser 1,5 ml de solution de concentration pour un gel de 1,0 mm. Important : ne pas diluer la solution de concentration.
Coulage du gel
- Nettoyer les plaques de verre avec un détergent doux et les rincer à l'eau désionisée. Les essuyer avec de l'éthanol à 70 % avant utilisation.
- Assembler le système de coulage mPAGE® à l'aide de la plaque de séparation mPAGE® et de la plaque courte masquée mPAGE® Lux pour former une cassette en verre. La plaque courte masquée doit être orientée de manière à ce que le texte se trouve sur le côté gauche de la cassette. S'assurer que les deux plaques de verre sont alignées au bas du cadre du système de coulage de gel avant d'utiliser les clamps pour fermer le système. Remarque : la plaque courte masquée mPAGE® Lux doit être utilisée avec la station de réticulation mPAGE®.
- Mettre la station de réticulation mPAGE® Lux sous tension en appuyant sur le bouton d'alimentation. La station de réticulation effectuera un auto-test. Une fois l'autotest terminé, l'écran "ready" (prêt) s'affiche.
- Ouvrir la porte et placer le système de coulage de gel dans la Station de réticulation, en l'alignant derrière les butoirs.
- À l'aide d'une pipette propre de 5 ml, ajouter la solution de gel de séparation préparée jusqu'à la ligne de remplissage indiquée sur le cadre du système coulage mPAGE®.
- À l'aide d'une pipette propre de 5 ml, ajouter lentement la solution de concentration en haut de la plaque courte.
- Insérer lentement le peigne mPAGE® en l'inclinant pour éviter la formation de bulles d'air sous les dents. Important : mélanger différents formats de puits peut entraîner une mauvaise formation des puits. Utilisation :
- Peignes à 10 puits avec plaques courtes masquées mPAGE® Lux à 10 puits
- Peignes à 15 puits avec plaques courtes masquées mPAGE® Lux à 15 puits
- Essuyer tout débordement de solution à l'avant de la plaque courte afin d'éviter une réticulation incomplète là où il y a débordement.
- Fermer la porte de la station de réticulation et sélectionner l'épaisseur du gel.
- Appuyer sur Start pour commencer la réticulation du gel. Conseil : en cas de coulage de plusieurs gels, commencez la procédure de coulage avec un second système de coulage de gel maintenant, pendant la réticulation du premier gel.
- Une fois la réticulation terminée, ouvrir la porte et retirer le système coulage de gel. Retirer la cassette du système de coulage de gel en abaissant le clip de tension pour libérer le cadre du système. Puis ouvrir les côtés du cadre et faire glisser la cassette par le haut.
- Utiliser le gel immédiatement ou envelopper la cassette dans du papier absorbant humide et la conserver à plat dans un sachet zip ou un autre contenant hermétique à une température comprise entre 2 et 8 °C pendant 2 semaines maximum. Ne pas laisser les cassettes sans les envelopper car le gel se desséchera.
Comment retirer le gel après l'électrophorèse
Retirer le gel de la cassette en verre à l'aide d'un racloir à gel. Découper le gel le long des bords (à droite) pour éviter de le déchirer. Les gels Bis-Tris mPAGE® Lux doivent UNIQUEMENT être utilisés avec du MOPS-SDS ou du MES-SDS comme tampon de migration. Les gels Bis-Tris ne sont PAS compatibles avec le tampon de migration Tris-Glycine.
Un coulage de gels éco-responsable avec le système de coulage de gels mPAGE® Lux
L'impact de notre système de coulage de gels mPAGE® Lux en termes d'éco-responsabilité a été calculé en le comparant à un kit de coulage rapide représentatif utilisé pour couler manuellement des gels de polyacrylamide destinés à l'électrophorèse de protéines. Les deux systèmes nécessitent des kits de coulage réutilisables et des kits de réactifs de coulage manuel. Le système de coulage de gels mPAGE® Lux implique aussi l'utilisation de la station de réticulation de gel mPAGE® Lux, tandis que le système de base implique l'utilisation d'APS et de TEMED, vendus séparément du kit de réactifs de coulage manuel.
Tous les composants nécessaires au coulage de l'ensemble des gels d'électrophorèse utilisés durant la durée de service minimale de la station de réticulation mPAGE® Lux, qui est de 5 ans, sont pris en compte dans cette évaluation. Cela inclut l'impact de la production, du conditionnement, de la distribution, de l'utilisation et de la fin de vie du kit de coulage manuel, les réactifs requis ainsi que tous les consommables de laboratoire nécessaires. Les calculs ont été réalisés avec, comme hypothèse, une production de 250, 500 ou 1000 gels par an et en retenant la différence minimale par rapport au système de base.
Éco-responsabilité des matériaux et des produits
Même s'il s'agit d'une solution innovante pour le coulage manuel des gels de polyacrylamide, le système de coulage de gels mPAGE® Lux impose tout de même d'utiliser des consommables en plastique et des réactifs dangereux. Il n'existe aucune alternative adaptée pour remplacer l'acrylamide dans cette application, mais tous les autres risques chimiques ont été éliminés du système et la quantité de consommables en plastique qu'il nécessite est bien inférieure à celle du système de base.
Le poids supplémentaire de la station de réticulation de gels requise par le système de coulage de gels mPAGE® Lux est compensé par la réduction des produits nécessaires au déroulement de la procédure de coulage des gels, comme le montre le graphique. Sur l'ensemble de la durée de vie de l'instrument, le poids total du système est réduit d'au moins 20 % par rapport aux systèmes de coulage rapide.
Poids du système (en kg) sur toute sa durée de vie pour 500 gels coulés par an :
Figure 5.Comparaison du poids du système (en kg) sur toute sa durée de vie pour 500 gels coulés par an, entre le système de coulage de gels mPAGE® Lux Casting et le système de référence. Bleu foncé = système de référence. Bleu ciel = système de coulage de gels mPAGE® Lux.
De plus, ce produit respecte les principes de notre stratégie SMASH Packaging, qui vise à améliorer l'éco-responsabilité de nos conditionnements en réduisant les emballages, en recourant à des matériaux plus éco-responsables et en facilitant le recyclage.
- Le conditionnement des produits et les autres éléments requis pour une unité fonctionnelle sont réduits de 30 % par rapport au système de base.
- 100 % des emballages à base de fibres du système sont certifiés "Exploitation forestière durable".
- Tous les éléments de protection en mousse sont constitués de polyéthylène recyclé à 100 %.
- Le conditionnement ne contient aucun matériau empêchant le recyclage d'après la définition figurant dans nos lignes directrices SMASH.
Distribution et utilisation du système de coulage de gels mPAGE® Lux
La réduction des consommables nécessaires et la suppression de certains réactifs a permis de faire chuter l'impact lié à l'expédition. La réduction du poids des composants régulièrement expédiés et des emballages associés est d'au moins 24 % sur la durée de service minimale de l'instrument.
Même si l'instrument ajouté exige de l'énergie pour fonctionner, la station de réticulation mPAGE® Lux a été conçue avec le rendement énergétique comme mot d'ordre. Grâce à un éclairage LED et une interface utilisateur simple mais intuitive, la consommation d'énergie globale reste remarquablement faible. La consommation d'énergie cumulée nécessaire pour réticuler 1000 gels n'est que de 1,65 kWh, ce qui équivaut à environ 33 heures d'utilisation d'un ordinateur portable. La quantité des déchets en plastique à usage unique générée durant la procédure de coulage de gels a été réduite d'au moins 25 %. En outre, les réactifs mPAGE® Lux s'auto-polymérisent sous un éclairage ambiant, ce qui élimine les résidus d'acrylamide non polymérisés dans les flux de déchets.
Fini les gels préparés pour rien lorsque l'on peut couler de frais et à la demande des gels prêts à l'emploi. Avec le système mPAGE® Lux, il n'est plus nécessaire de stocker des kits de réactifs et des gels précoulés à différents pourcentages, d'où une baisse des déchets dus à l'expiration des composants. La station de réticulation mPAGE® Lux est un équipement électronique qui, en tant que tel, doit être mis au rebut conformément aux réglementations en vigueur. Pour en savoir plus sur l'élimination des déchets électroniques, rendez-vous sur notre page consacrée à la conformité des DEEE (déchets d'équipements électriques et électroniques).
Ce produit présente des améliorations significatives sur toute sa durée de vie par rapport au système de base et a été conçu comme un Produit alternatif plus écologique. Pour de plus amples informations, rendez-vous sur notre page dédiée à notre programme intitulé Design for Sustainability et à nos Produits alternatifs plus écologiques.
Pour continuer à lire, veuillez vous connecter à votre compte ou en créer un.
Vous n'avez pas de compte ?