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C0773

Collagénase from Clostridium histolyticum

Name: Collagénase from <I>Clostridium histolyticum</I>
Brand: SIGMA

high purity, purified by chromatography, Type VII, ≥4 FALGPA units/mg solid, lyophilized powder, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

Synonyme(s) :

Clostridiopeptidase A

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A propos de cet article

Numéro CAS:

9001-12-1

UNSPSC Code:

12352204

NACRES:

NA.54

EC Number:

232-582-9

MDL number:

MFCD00130830

Numéro CE :

3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)

Specific activity:

≥4 FALGPA units/mg solid, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

Service technique

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Propriétés

Quality Segment

200

type

Type VII

form

lyophilized powder

specific activity

≥4 FALGPA units/mg solid, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

mol wt

68-130 kDa

purified by

chromatography

composition

Protein, ≥85% biuret

solubility

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C

foreign activity

caseinase and clostripain ≤1 units/mg protein

storage temp.

−20°C

Description

Application

Collagenase has been used in the preparation of arterial tissue for the study of advanced glycosylation end products (AGE). The enzyme has also been used along with other proteases for the disaggregation of human tumor, mouse kidney, human brain, lung epithelium and many other tissues. It is also effective in liver and kidney perfusion studies, digestion of pancreas, and isolation of nonparenchymal hepatocytes.

Biochem/physiol Actions

La collagénase est activée à l′aide de quatre atome-grammes de calcium par mole d′enzyme. Elle est inhibée par l′acide éthylèneglycol-bis(bêta-aminoéthyléther)-N,N,N′,N′-tétraacétique, le bêta-mercaptoéthanol, le glutathion, l′acide thioglycolique et la 8-hydroxyquinoline.

Effective release of cells from tissue requires the action of both collagenase enzymes and the neutral protease. Collagenase is activated by four gram atom calcium (Ca²⁺) per mole enzyme. The culture filtrate is thought to contain at least 7 different proteases ranging in molecular weight from 68-130 kDa. Optimal pH ranges from 6.3-8.8. The enzyme recognizes the sequence -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-, where X is most often a neutral amino acid.

Physical form

Lyophilized powder containing calcium chloride

Preparation Note

A stock solution may be prepared by dissolving 0.05 - 0.1 mg of collagenase in one mL of 50 mM TES buffer containing 0.36 mM calcium chloride (TESCA), pH 7.4 at 37 °C. Use cold buffer.

Please note the material will not dissolve completely and few sediments may be seen. The sediments do not affect the activity of the solution.

Other Notes

Une unité de digestion de collagène (UDC) libère une quantité de peptides à partir du collagène d′un tendon d′Achille de bovin équivalant, en termes de couleur avec la méthode à la ninhydrine, à 1,0 μmole de leucine en 5 heures à pH 7,4 et à 37 °C en présence d′ions calcium. Une unité d′hydrolyse de FALGPA hydrolyse 1,0 μmole de furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala par minute à 25 °C. Une unité de protéase neutre hydrolyse la caséine et produit une couleur équivalente à 1,0 μmole de tyrosine en 5 heures à pH 7,5 et à 37 °C. Une unité de clostripaïne hydrolyse 1,0 μmole de BAEE par minute à pH 7,6 et à 25 °C en présence de DTT.