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Kit ReBlot Plus

• eCl@ss: 32161000
• UNSPSC Code: 12161503
• NACRES: NA.56

Propriétés

• Quality Level: 100
• manufacturer/tradename: Chemicon^®, Re-Blot^™
• technique(s): western blot: suitable
• detection method: chemiluminescent
• shipped in: wet ice

Description

General description

Le western blotting est une technique couramment utilisée pour étudier la fonction et la localisation des protéines. En général, des échantillons de protéines sont séparés par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de dodécylsulfate de sodium (SDS-PAGE) et transférés sur une membrane telle qu'une membrane de nitrocellulose ou de nylon, où ils sont incubés avec des anticorps spécifiques. À la différence des technologies d'identification des acides nucléiques (southern blotting et northern blotting) qui permettent de réutiliser les membranes de transfert, les membranes de western blotting sont difficilement réutilisables.

La déshybridation et la réhybridation des membranes de western blotting présentent plusieurs avantages :

1) Préservation des échantillons onéreux ou uniquement disponibles en quantités limitées ;

2) Analyse d'une membrane de transfert avec plusieurs anticorps différents, par exemple des anticorps spécifiques d'un sous-type ou d'une isoforme ;

3) Réanalyse des résultats aberrants et confirmation avec le même anticorps ou un anticorps différent ;

4) Correction des erreurs d'incubation avec le mauvais anticorps ;

5) Économies de réactifs et gain de temps grâce à la réutilisation de la même membrane de transfert.

Si des matrices d'immunoaffinité anticorps/antigène comme des conjugués immobilisés sur Sepharose^™ ont été réutilisées plusieurs fois sans compromettre la réactivité entre l'antigène et l'anticorps, la nécessité de travailler à des pH extrêmes et d'utiliser des agents chaotropiques empêche d'appliquer ce principe à la technique de western blotting.

Le kit de recyclage de western blots MILLIPORE Re-Blot Plus contient des solutions spécialement formulées pour retirer rapidement et efficacement les anticorps des membranes de western blotting sans affecter significativement les protéines immobilisées.

Voici quelques-uns des avantages du kit de recyclage de western blots Re-Blot Plus :

• La solution de déconjugaison des anticorps ne contient pas de β-mercaptoéthanol, liquide à l'odeur nauséabonde.
• La déconjugaison des anticorps s'effectue à température ambiante. Il n'est pas nécessaire de chauffer les membranes de transfert.
• Les anticorps peuvent être déshybridés des membranes en environ 15 minutes à température ambiante.
• Les membranes de transfert peuvent être réutilisées au bout de 25 minutes.

Application

Le kit de recyclage de western blots MILLIPORE Re-Blot Plus est efficace pour retirer les anticorps des membranes de western blotting préalablement révélées par chimioluminescence ou à l'iode radioactif (ou d'autres isotopes). Il n'est pas recommandé pour la déshybridation des substrats colorimétriques (tétraméthylbenzidine, diaminobenzidine, 4-chloronaphtol, etc.). En effet, il n'est pas possible de retirer efficacement les substrats qui précipitent au niveau du siège de la réaction.

Le kit de recyclage de western blots MILLIPORE Re-Blot Plus ne doit être utilisé qu'à des fins qualitatives tant qu'il n'a pas été confirmé, par western blotting comparatif, que la déconjugaison n'affecte pas quantitativement un antigène donné.

Ce produit est uniquement destiné à la recherche et ne saurait être utilisé à des fins de diagnostic ou in vivo.

Preparation Note

Les composants du kit doivent être maintenus à 4 °C dès réception. Le produit reste stable pendant 3 à 6 mois à compter de la date de réception. Si la solution de déconjugaison des anticorps cristallise au stockage, il est possible de la redissoudre en la chauffant légèrement à 37 °C avant utilisation.

Remarque : Pour éviter la dégradation du réactif pendant le stockage, veiller à ce que le bouchon soit hermétiquement fermé. Éviter toute exposition prolongée à l'air.

Other Notes

Solution de déconjugaison des anticorps Mild (douce) concentrée 10 × (1 flacon de 50 ml)

Solution de déconjugaison des anticorps Strong (forte) concentrée 10 × (1 flacon de 50 ml)

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Re-Blot is a trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sepharose is a trademark of Cytiva

Informations sur la sécurité

• pictograms: GHS06,GHS05,GHS09
• signalword: Danger
• hcodes: H290,H302,H311 + H331,H314,H411
• pcodes: P273 - P280 - P301 + P312 - P303 + P361 + P353 - P304 + P340 + P310 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Acute Tox. 3 Dermal - Acute Tox. 3 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Met. Corr. 1 - Skin Corr. 1A
• Classe de stockage: 6.1C - Combustible acute toxic Cat.3 / toxic compounds or compounds which causing chronic effects