COLLD-RO
Roche
Collagénase D
from Clostridium histolyticum
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About This Item
Produits recommandés
Source biologique
Clostridium histolyticum
Niveau de qualité
Stérilité
non-sterile
Forme
lyophilized
collagenase activity
>0.15 U/mg lyophilizate
Conditionnement
pkg of 100 mg (11088858001)
pkg of 2.5 g (11088882001)
pkg of 500 mg (11088866001)
Fabricant/nom de marque
Roche
Concentration
(working concentration: 0.5 - 2.5 mg/ml)
Technique(s)
tissue processing: suitable
Couleur
light brown
pH optimal
6.0-8.0
Solubilité
water: soluble
Numéro d'accès NCBI
Application(s)
cell analysis
Activité étrangère
Clostripain 0.060 U/mg
Proteases 8 U/mg ( Azocoll)
Trypsin <0.2 U/mg (with BAEE)
Température de stockage
2-8°C
Catégories apparentées
Description générale
La collagénase D est préparée à partir de cultures de Clostridium histolyticum par filtration, précipitation au sulfate d'ammonium, dialyse et lyophilisation.
Spécificité
La collagénase dégrade le collagène natif. La clostripaïne, les enzymes du type trypsine et les protéases neutres dégradent également d'autres protéines.
Application
La collagénase de C. histolyticum est largement utilisée pour désagréger de nombreux types de tissus (poumon, cœur, muscle, os, tissu adipeux, foie, rein, cartilage, glande mammaire, placenta, vaisseaux sanguins, cerveau, tumeurs, cordon ombilical par exemple) et pour préparer des suspensions unicellulaires destinées à la mise en place de systèmes de culture de cellules primaires. Il est recommandé d'utiliser la collagénase D lorsque la fonctionnalité et l'intégrité des protéines de la surface cellulaire sont importantes.
La collagénase Roche issue de Clostridium a servi à la préparation de cellules de nombreux type de tissus différents, notamment des hépatocytes, des adipocytes, des îlots de Langerhans, des cellules épithéliales, des cellules musculaires, des cellules endothéliales, etc. Il convient néanmoins de déterminer empiriquement la capacité de chaque lot de l'enzyme à s'attaquer à un tissu particulier.
La collagénase Roche issue de Clostridium a servi à la préparation de cellules de nombreux type de tissus différents, notamment des hépatocytes, des adipocytes, des îlots de Langerhans, des cellules épithéliales, des cellules musculaires, des cellules endothéliales, etc. Il convient néanmoins de déterminer empiriquement la capacité de chaque lot de l'enzyme à s'attaquer à un tissu particulier.
Caractéristiques et avantages
Sommaire
Lyophilisat non stérile
Lyophilisat non stérile
Définition de l'unité
La collagénase de Roche est dosée en unités Wünsch (1 μmol de produit formé par minute à +25 °C avec du substrat Wünsch).
L′activité de la collagénase est fréquemment indiquée en unités Mandl (1 μmol de leucine libérée par du collagène en 5 heures à +37 °C).
Malheureusement il n'existe aucun facteur de conversion cohérent entre les deux unités d'activité, car l'unité Mandl dépend en partie de la concentration en protéases contaminantes dans la préparation de collagénase, une variable impossible à définir. Comparativement à une préparation brute, une préparation de collagénase pure donnerait une activité spécifique en unités Mandl plus faible. Les préparations de Clostridium donnent habituellement des facteurs de conversion d′environ 1/1800 (par exemple, un lot particulier de collagénase de Clostridium contenait environ 0,15 U Wünsch/mg et 250 U Mandl/mg).
L′activité de la collagénase est fréquemment indiquée en unités Mandl (1 μmol de leucine libérée par du collagène en 5 heures à +37 °C).
Malheureusement il n'existe aucun facteur de conversion cohérent entre les deux unités d'activité, car l'unité Mandl dépend en partie de la concentration en protéases contaminantes dans la préparation de collagénase, une variable impossible à définir. Comparativement à une préparation brute, une préparation de collagénase pure donnerait une activité spécifique en unités Mandl plus faible. Les préparations de Clostridium donnent habituellement des facteurs de conversion d′environ 1/1800 (par exemple, un lot particulier de collagénase de Clostridium contenait environ 0,15 U Wünsch/mg et 250 U Mandl/mg).
Forme physique
Lyophilisat non stérile
Notes préparatoires
Activateur : Ca2+
Concentration de travail : 0,5 - 2,5 mg/ml
Conditions de stockage (solution de travail) : -15 à -25°C
Roche recommande de ne reconstituer que la quantité de lyophilisat nécessaire pour une utilisation immédiate. La solution reconstituée peut être conservée jusqu'à une semaine entre -15 et -25 °C. Éviter les congélations et décongélations répétées, car l'activité diminue après reconstitution.
Inhibiteurs:
Inhibiteurs de collagénases : EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-mercaptoéthanol
La collagénase n'est pas inhibée par le sérum.
Inhibiteurs de la clostripaïne : TLCK
Inhibiteurs de la trypsine : aprotinine, inhibiteur de trypsine (blanc d'œuf, soja)
Activité enzymatique :
Activité collagénase : >0,15 U/mg (selon Wünsch) (à +25 °C, substrat : 4-phényl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg)
Activités d'enzymes contaminantes : activité trypsine, clostripaïne et activité protéolytique totale
La collagénase D présente une activité collagénase normale à élevée et une très faible activité trypsique (généralement < 0,2 unités/mg, substrat : BAEE).
Concentration de travail : 0,5 - 2,5 mg/ml
Conditions de stockage (solution de travail) : -15 à -25°C
Roche recommande de ne reconstituer que la quantité de lyophilisat nécessaire pour une utilisation immédiate. La solution reconstituée peut être conservée jusqu'à une semaine entre -15 et -25 °C. Éviter les congélations et décongélations répétées, car l'activité diminue après reconstitution.
Inhibiteurs:
Inhibiteurs de collagénases : EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-mercaptoéthanol
La collagénase n'est pas inhibée par le sérum.
Inhibiteurs de la clostripaïne : TLCK
Inhibiteurs de la trypsine : aprotinine, inhibiteur de trypsine (blanc d'œuf, soja)
Activité enzymatique :
Activité collagénase : >0,15 U/mg (selon Wünsch) (à +25 °C, substrat : 4-phényl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg)
Activités d'enzymes contaminantes : activité trypsine, clostripaïne et activité protéolytique totale
La collagénase D présente une activité collagénase normale à élevée et une très faible activité trypsique (généralement < 0,2 unités/mg, substrat : BAEE).
Reconstitution
Reconstitution dans n'importe quelle solution saline équilibrée (HBSS par exemple).
Stockage et stabilité
Conserver à l'abri de la lumière.
Autres remarques
Pour la recherche en sciences de la vie uniquement. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.
Mention d'avertissement
Danger
Mentions de danger
Conseils de prudence
Classification des risques
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organes cibles
Respiratory system
Code de la classe de stockage
11 - Combustible Solids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 1
Point d'éclair (°F)
does not flash
Point d'éclair (°C)
does not flash
Certificats d'analyse (COA)
Recherchez un Certificats d'analyse (COA) en saisissant le numéro de lot du produit. Les numéros de lot figurent sur l'étiquette du produit après les mots "Lot" ou "Batch".
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