HPLC Analysis of Hydrocortisone in Topical Cream on Discovery® HS C18 after SPE using Discovery® DSC-Si
CONDITIONS
sample preparation
SPE (Solid Phase Extraction)
sample addition
hydrocortisone topical hand cream in hexane:ethylacetate
SPE tube/cartridge
Discovery DSC-Si, 500 mg/3 mL (52695-U)
condition
1 mL hexane:ethyl acetate (2:1, v/v)
sample addition
1 mL
washing
1 mL hexane:ethyl acetate (2:1, v/v)
elution
1 mL methanol:DI water (1:1, v/v)
eluate post-treatment
dilute eluate to 2 mL with methanol:DI water (1:1, v/v)
column
Discovery HS C18, 15 cm x 4.6 mm I.D., 5 μm particles (568520-U)
mobile phase
[A] methanol; [B] DI water (1:1, A:B)
flow rate
1 mL/min
column temp.
35 °C
detector
UV, 220 nm
injection
10 μL
Description
Application
Pré-traitement de l′échantillon :
Dissoudre 1g de crème pour les mains à 1% d′hydrocortisone dans 10mL d′acétate d′éthyle. Diluer 2mL de l′échantillon de crème-acétate d′éthyle dans 8mL d′un mélange hexane:acétate d′éthyle (2:1, v/v).
Conditionner le tube SPE avec 1mL du mélange hexane:acétate d′éthyle (2:1, v/v)
Charger 1mL de l′échantillon pré-traité
Eliminer les interférants lipophiles avec 1mL d′hexane:acétate d′éthyle (2:1, v/v)
Eluer avec 1mL de méthanol:H20 (1:1, v/v)
Diluer l′éluat avec 2mL de méthanol:H2O DI (1:1, v/v)
Informations légales
Discovery is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany