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F2426

Millipore

Gel d'affinité ANTI-FLAG® M2 EZview™ Rouge

clone M2

Synonyme(s) :

Anticorps monoclonal ANTI-FLAG® M2 antibody produced in mouse, Anti-ddddk, Anti-dykddddk

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
Nomenclature NACRES :
NA.32
Clone:
M2, monoclonal
application:
IP
affinity chromatography
Technique(s):
affinity chromatography: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
citations:
204

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Clone

M2, monoclonal

Niveau de qualité

200

Classe(s) chimique(s) de l'analyte

proteins

Technique(s)

affinity chromatography: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable

Matrice

4% agarose bead; 45-165μm bead size

Isotype

IgG1

Capacité

≥0.6 mg/mL, gel binding capacity

Conditions d'expédition

wet ice

Température de stockage

−20°C

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Catégories apparentées

Description générale

Le gel d'affinité anti-FLAG M2 EZview Rouge est une résine comprenant des anticorps anti-FLAG M2 immobilisés par liaison covalente sur des billes d'agarose à 4 %. Ce gel d'affinité permet de lier des protéines de fusion portant une étiquette FLAG à des échantillons tels que des tissus ou des lysats cellulaires dans le but de purifier les protéines à étiquette FLAG lors de la préparation d'analyses par immunoprécipitation. Le colorant rouge améliore la visibilité, et donc, la performance des résultats. Les billes d'agarose lient les protéines de fusion portant des étiquettes FLAG N-terminale, Met-N-terminale et C-terminale ainsi que les protéines de fusion portant une étiquette 3×FLAG.

Spécificité

Ce produit peut être utilisé pour la purification de protéines de fusion portant des étiquettes FLAG N-terminale, Met-N-terminale et C-terminale ainsi que de protéines de fusion portant une étiquette 3×FLAG.

Application

Immunoprécipitation (IP) des protéines de fusion portant une étiquette FLAG ou 3×FLAG.

Élution - peptide FLAG, glycine, pH 3,5, peptide 3xFLAG.

Pour en savoir plus sur nos produits, rendez-vous sur notre portail des applications des produits FLAG®.

Forme physique

Suspension à 1:1 (v/v) dans du PBS contenant 50 % de glycérol et 15 ppm de Kathon.

Informations légales

ANTI-FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
EZview is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Clause de non-responsabilité

FLAG® Affinity Gels, FLAG® tag, 3xFLAG®tag, DYKDDDDK tag

Produit(s) apparenté(s)

Réf. du produit
Description
Tarif

06693

Timestrip Plus™ -20 °C

Code de la classe de stockage

10 - Combustible liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 3

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

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Certificats d'analyse (COA)

Lot/Batch Number
0000269913
0000272448
0000278660
0000257092
0000256358

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Kara R Jones et al.
Molecular cancer therapeutics, 4(10), 1541-1547 (2005-10-18)
Incomplete DNA repair or misrepair can contribute to the cytotoxicity of DNA double-strand breaks. Consequently, interference with double-strand break repair, by pharmacologic or genetic means, is likely to sensitize tumor cells to ionizing radiation. The current studies were designed to
Matthew S Walters et al.
Journal of virology, 84(13), 6861-6865 (2010-04-16)
Varicella zoster virus encodes an immediate-early (IE) protein termed ORF61p that is orthologous to the herpes simplex virus IE protein ICP0. Although these proteins share several functional properties, ORF61p does not fully substitute for ICP0. The greatest region of similarity
Jiahai Zhou et al.
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 103(39), 14343-14348 (2006-09-16)
The unfolded protein response (UPR) is an evolutionarily conserved mechanism by which all eukaryotic cells adapt to the accumulation of unfolded proteins in the endoplasmic reticulum (ER). Inositol-requiring kinase 1 (IRE1) and PKR-related ER kinase (PERK) are two type I
Matthew Frieman et al.
Journal of virology, 83(13), 6689-6705 (2009-04-17)
The outcome of a viral infection is regulated in part by the complex coordination of viral and host interactions that compete for the control and optimization of virus replication. Severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) intimately engages and regulates the
Annie M Sriramachandran et al.
Nature communications, 10(1), 3678-3678 (2019-08-17)
Modification with SUMO regulates many eukaryotic proteins. Down-regulation of sumoylated forms of proteins involves either their desumoylation, and hence recycling of the unmodified form, or their proteolytic targeting by ubiquitin ligases that recognize their SUMO modification (termed STUbL or ULS).
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Protocoles

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Protocol for immunoprecipitation (IP) of FLAG fusion proteins using M2 monoclonal antibody 4% agarose affinity gels

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Questions

1–6 of 6 Questions  

  1. What is the binding capacity of the Product F2426, EZview™ Red ANTI-FLAG® M2 Affinity Gel clone M2, resin?

    1 answer

    1. The binding capacity of the resin must be   ? 0.6 mg/mL to meet specifications.  This capacity will vary from lot to lot.

      Helpful?

  2. When using Product F2426, EZview™ Red ANTI-FLAG® M2 Affinity Gel clone M2, should I use a 3X FLAG peptide or a 1X FLAG peptide to elute my protein?

    1 answer

    1. If you have a 3X FLAG-tagged protein, then you will need to use the 3X FLAG peptide.  If you have a 1X FLAG-tagged protein, you can use the 1X FLAG peptide or the 3X FLAG peptide.  We have not noticed a significant  difference in elution efficiency by using a 3X FLAG peptide on a 1X FLAG-tagged protein.

      Helpful?

  3. When using Product F2426, EZview™ Red ANTI-FLAG® M2 Affinity Gel clone M2, I see bands at 20-25 kDa and 50-60 kDa appearing in my Westerns that are not my FLAG-tagged protein. How can I prevent this?

    1 answer

    1. As a result of the conjugation, there may be some M2 antibody that is not conjugated to the resin, but is associated with the resin and may appear in acid elutions as heavy and light chain when using the anti-mouse IgG conjugated secondary antibody.  We recommend a acid wash (0.1 M glycine-HCL pH 3.5) and neutralization of the resin (do not allow the acid wash to sit on the resin longer than 20 minutes) prior to applying the lysate.  Another way to avoid this is to use a directly conjugated FLAG antibody for detection such as product A8592 ant-FLAG M2 HRP, or the rabbit anti-FLAG polyclonal antibody, F7425.

      Helpful?

  4. When using Product F2426, EZview™ Red ANTI-FLAG® M2 Affinity Gel clone M2, I have a lot of non-specific proteins that are eluting with my FLAG-tagged protein. How can I get rid of these?

    1 answer

    1. One way to remove non-specific proteins is to pre-bind the protein lysate with unconjugated resin.  We recommend product 4B200 for this purpose. Other methods would be to increase the stringency of the washes by increasing salt concentration (the resin can tolerate up to 1M NaCl) or including detergents that are compatible with the resin.

      Helpful?

  5. When using Product F2426, EZview™ Red ANTI-FLAG® M2 Affinity Gel clone M2, how can I elute my protein?

    1 answer

    1. Elution with the peptide is the most gentle method.  Acid elution (0.1 M glycine-HCL pH 3.5) is a more stringent method of elution, and should be evaluated for its effect on your protein if it is to be used in downstream applications.  Boiling the resin in sample buffer is the most denaturing condition.  If this condition is used, the resin cannot be re-used, due to the presence of SDS and/or reducing agents.

      Helpful?

  6. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer

    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

      Helpful?

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