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MABT825

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-bêta-actine, clone 4C2

clone 4C2, from mouse

Synonyme(s) :

Actin, cytoplasmic 1, beta-Actin

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41

Source biologique

mouse

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

purified immunoglobulin

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

4C2, monoclonal

Espèces réactives

chicken, human, mouse, rat

Réactivité de l'espèce (prédite par homologie)

mammals (based on 100% sequence homology)

Technique(s)

immunocytochemistry: suitable
western blot: suitable

Isotype

IgG1κ

Numéro d'accès NCBI

Numéro d'accès UniProt

Conditions d'expédition

wet ice

Modification post-traductionnelle de la cible

unmodified

Informations sur le gène

human ... ACTB(60)

Description générale

L'actine cytoplasmique 1 (UniProt P60709 ; également nommée bêta-actine) est codée par le gène ACTB (identifiant du gène 60) chez l'être humain. Les actines sont des protéines globulaires multifonctionnelles qui sont les unités de base des microfilaments cytosquelettiques ; elles font partie des protéines les plus conservées chez les eucaryotes. Il existe six types d'actines. L'alpha-actine du muscle squelettique est codée par le gène ACTA1, l'alpha-actine du muscle lisse par le gène ACTA2, la bêta-actine cytoplasmique par le gène ACTB, l'alpha-actine du muscle cardiaque par le gène ACTC1, la gamma-actine cytoplasmique par le gène ACTG1, et la gamma-actine du muscle lisse par le gène ACTG2 (également appelé ACTA3). Bien que les actines présentent plus de 90 % d'homologie sur l'ensemble de la séquence, leurs isoformes ont un profil d'expression spatial, temporel et histospécifique, et seulement 50 % à 60 % d'homologie au niveau des 18 résidus N-terminaux. Les β et γ-actines cytoplasmiques seraient présentes dans toutes les cellules, alors que les quatre autres isoformes sont généralement présentes dans des types de tissus musculaires adultes spécifiques. Les actines se présentent sous différents états structuraux selon les conditions ioniques du milieu ou leurs interactions avec des ligands protéiques. Les formes oligomères et polymères que prennent les molécules d'actine dépendent de la conformation adoptée par chacune d'elles.

Spécificité

Le clone 4C2 a permis de détecter la sérum albumine bovine conjuguée avec le peptide N-terminal de bêta-actine, mais pas la sérum albumine bovine conjuguée avec des peptides N-terminaux dérivés des cinq autres types d'actine [Dugina, V., et al. (2009). J. Cell Sci. 122(Pt 16):2980-2988].

Immunogène

Peptide linéaire conjugué à de la KLH et correspondant à la séquence N-terminale de la bêta-actine humaine.

Application

Analyse par western blotting : une concentration de 0,5 µg/ml d'un lot représentatif a permis de détecter la bêta-actine dans 10 µg de lysat de cellules NIH/3T3.
Analyse par immunocytochimie : une concentration de 5,0 µg/ml d'un lot représentatif a permis de détecter la bêta-actine dans des cellules HUVEC, A431 et HeLa.
Analyse par western blotting : un lot représentatif a permis de détecter des niveaux régulés à la baisse de bêta-actine dans des cellules endothéliales microvasculaires D3 de cerveau humain (hCMEC/D3) stimulées (par A23187, TRAP-6, TNF, LPS ou IFN-γ) et leurs microparticules, par comparaison avec des cellules hCMEC/D3 non stimulées et leurs microparticules [Latham, S.L., et al. (2013). FASEB J. 27(2):672-683].
Analyse par western blotting : un lot représentatif a permis de détecter une régulation à la baisse de bêta-actine médiée par un pARNi dans des cellules de carcinome pulmonaire humain A549 [Miazza, V., et al. (2011). Virology. 410(1):7-16].
Analyse par western blotting : un lot représentatif a permis de détecter la bêta-actine, mais pas la gamma-actine cytoplasmique séparée par électrophorèse en gel 2D d'actine de gésier de poulet purifiée ou d'extraits de protéine totale des fibroblastes sous-cutanés humains (HSCF), des cellules MDCK de chien et de tissu aortique de rat [Dugina, V., et al. (2009). J. Cell Sci. 122(Pt 16):2980-2988].
Analyse par western blotting : un lot représentatif a permis de détecter la sérum albumine bovine conjuguée avec le peptide N-terminal de bêta-actine, mais pas la sérum albumine bovine conjuguée avec des peptides N-terminaux dérivés des cinq autres types d'actine [Dugina, V., et al. (2009). J. Cell Sci. 122(Pt 16):2980-2988].
Analyse par immunocytochimie : un lot représentatif a permis de détecter la localisation d'β-actine stimulée par TNF dans des fibres de stress épaisses à coloration intense saillant à la surface basale des cellules endothéliales microvasculaires D3 de cerveau humain (hCMEC/D3). Un traitement par l'inhibiteur de la rho kinase Y-27632 (réf. 688000) a supprimé la formation des fibres de stress de β-actine induite par le TNF [Latham, S.L., et al. (2013). FASEB J. 27(2):672-683].
Analyse par immunocytochimie : un lot représentatif a permis de détecter une redistribution subcellulaire drastique de bêta-actine après infection par le virus Sendai de cellules épithéliales de rein canines de Madin-Darby (MDCK) par coloration par immunocytochimie fluorescente de cellules fixées au paraformaldéhyde et traitées au méthanol [Miazza, V., et al. (2011). Virology. 410(1):7-16].
Analyse par immunocytochimie : un lot représentatif a permis de détecter une localisation subcellulaire de bêta-actine différente de celle de la gamma-actine cytoplasmique, dans des cellules en propagation et statiques, par immunocytochimie par fluorescence en utilisant des fibroblastes sous-cutanés humains, des kératinocytes HaCaT humains, des fibroblastes embryonnaires humains WI38 et des cellules de rein canines de Madin-Darby (MDCK) fixées au paraformaldéhyde et traitées au méthanol [Dugina, V., et al. (2009). J. Cell Sci. 122(Pt 16):2980-2988].
L'utilisation de cet anticorps anti-bêta-actine, clone 4C2, a été validée en western blotting et en immunocytochimie pour la détection de la bêta-actine.

Qualité

Produit évalué par western blotting sur des lysats de cellules HeLa.

Analyse par western blotting : une concentration de 0,5 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter la bêta-actine dans 10 µg de lysat de cellules HeLa.

Description de la cible

Poids réel (observé) : env. 39-45 kDa. Une ou plusieurs bandes non caractérisées peuvent apparaître avec certains lysats.

Forme physique

Format : Produit purifié

Autres remarques

Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Certificats d'analyse (COA)

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