MABS2005
Anticorps anti-peptide 2A, clone 3H4
clone 3H4, from mouse
Synonyme(s) :
Anti-2A Antibody
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About This Item
Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41
Produits recommandés
Source biologique
mouse
Niveau de qualité
Forme d'anticorps
purified antibody
Type de produit anticorps
primary antibodies
Clone
3H4, monoclonal
Espèces réactives
mouse
Conditionnement
antibody small pack of 25 μg
Technique(s)
immunofluorescence: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
Isotype
IgG1κ
Conditions d'expédition
ambient
Modification post-traductionnelle de la cible
unmodified
Description générale
Les peptides 2A et les séquences de peptides de type 2A (appelées éléments d'hydrolase à action cis ou CHYSEL) sont une alternative supérieure aux sites d'entrée ribosomique interne (IRES) pour coordonner l'expression de plusieurs produits géniques à partir d'une seule construction recombinante. Les séquences 2A sont des peptides relativement courts d'environ 20 acides aminés (selon le virus d'origine) contenant le motif consensus Asp-Val/Ile-Glu-X-Asn-Pro-Gly-Pro. Les peptides 2A permettent d'encoder plusieurs protéines en tant que polyprotéines, qui se dissocient ensuite en composantes protéiques lors de la traduction. La séquence 2A altère la formation normale de liaisons peptidiques par un mécanisme appelé saut ribosomal, qui a pour résultat la génération efficace et non enzymatique de produits peptidiques distincts à partir d'une construction polycistronique unique. Les peptides 2A sont utilisés par plusieurs familles de virus afin de produire plusieurs polypeptides ; le plus connu est le virus de la fièvre aphteuse, qui appartient à la famille des Picornaviridae. L'anticorps anti-peptide 2A, clone 3H4, reconnaît la séquence 2A dérivée du piconavirus à l'origine de la fièvre aphteuse (VKQTLNFDLLKLAGDVESNPG*P), comportant un site de clivage entre G et P. (Réf. : Trichas, G, et al. (2008). BMC Biol. 6 : 40).
Spécificité
Le clone 3H4 détecte le peptide 2A dans les cellules murines.
Immunogène
Peptide linéaire conjugué à la KLH et correspondant à la séquence CGDVEENPG (C-terminale libre) dérivée du virus Thosea asigna.
Application
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter le peptide 2A dans les lysats de cellules HEK293 SpCas9-P2A-Puro et NIH3T3 SpCas9-T2A-Puro (avec l'aimable autorisation de Stefan Schuchner, Ph.D., et Egon Ogris, M.D., Université de médecine de Vienne, Autriche).
Analyse par immunoprécipitation : Un lot représentatif a permis de détecter le peptide 2A dans les cellules HeLa exprimant SpCas9-P2A et les cellules HeLa sauvages, ainsi que dans les cellules HEK293 exprimant SpCas9-T2A ou les cellules HEK293 sauvages (avec l'aimable autorisation de Stefan Schuchner, Ph.D., et Egon Ogris, M.D., Université de médecine de Vienne, Autriche).
Analyse par immunofluorescence : Un lot représentatif a permis de détecter le peptide 2A dans les cellules HeLa transfectées de manière transitoire avec SaCas9-T2A-GFP (avec l'aimable autorisation de Stefan Schuchner, Ph.D., et Egon Ogris, M.D., Université de médecine de Vienne, Autriche).
Analyse par immunoprécipitation : Un lot représentatif a permis de détecter le peptide 2A dans les cellules HeLa exprimant SpCas9-P2A et les cellules HeLa sauvages, ainsi que dans les cellules HEK293 exprimant SpCas9-T2A ou les cellules HEK293 sauvages (avec l'aimable autorisation de Stefan Schuchner, Ph.D., et Egon Ogris, M.D., Université de médecine de Vienne, Autriche).
Analyse par immunofluorescence : Un lot représentatif a permis de détecter le peptide 2A dans les cellules HeLa transfectées de manière transitoire avec SaCas9-T2A-GFP (avec l'aimable autorisation de Stefan Schuchner, Ph.D., et Egon Ogris, M.D., Université de médecine de Vienne, Autriche).
Domaine de recherche
Anticorps secondaires et anticorps de contrôle
Anticorps secondaires et anticorps de contrôle
L'anticorps anti-peptide 2A, clone 3H4 (réf. MABS2005), est un anticorps monoclonal de souris qui permet de détecter le peptide 2A et dont l'utilisation a été testée en immunofluorescence, en immunoprécipitation et en western blotting.
Qualité
Produit évalué par western blotting sur du lysat de cellules NIH3T3 exprimant la SpCas9-T2A-Puro.
Analyse par western blotting : Une concentration de 0,5 µg/mL de cet anticorps a permis de détecter le peptide 2A dans 10 µg de lysat de cellules NIH3T3 exprimant la SpCas9-T2A-Puro.
Analyse par western blotting : Une concentration de 0,5 µg/mL de cet anticorps a permis de détecter le peptide 2A dans 10 µg de lysat de cellules NIH3T3 exprimant la SpCas9-T2A-Puro.
Description de la cible
~150 kDa (poids observé). Des bandes non caractérisées peuvent être observées avec certains lysats.
Forme physique
Format : purifié
IgG1 monoclonale de souris purifiée, dans un tampon contenant de la Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4), du NaCl 150 mM et 0,05 % d'azoture de sodium.
Purifié sur protéine G
Stockage et stabilité
Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.
Autres remarques
Concentration : voir la fiche technique du lot concerné.
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Code de la classe de stockage
12 - Non Combustible Liquids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 1
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