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ADN polymérase à démarrage à chaud KOD Xtreme

Ultra high fidelity dnapolymerase designed for the most challenging PCR applications including: crude sample PCR, amplification of long strand and highly GC-rich DNA templates.

• Synonyme(s) : High fidelity master mix, Hot start PCR, Hot start master mix
• Code UNSPSC : 41105500
• Nomenclature NACRES : NA.85

Propriétés

• Niveau de qualité: 100
• Forme: liquid
• Utilisation: sufficient for 200 reactions
• Caractéristiques: Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR; High Fidelity PCR; dNTPs included; hotstart
• Fabricant/nom de marque: Novagen^®
• Conditions de stockage: OK to freeze
• Technique(s): PCR: suitable
• Entrée: crude DNA
• Adéquation: suitable for PCR
• Température de stockage: −20°C

Description

Description générale

* Produit fabriqué par Toyobo et distribué par EMD Millipore. Non disponible auprès de Merck KGaA Darmstadt (Allemagne) au Japon.

Remarque : L'achat de ce produit inclut une immunité contre les poursuites dans le cadre des brevets mentionnés dans la notice du produit, pour l'utilisation de la seule quantité achetée pour les propres recherches de l'acheteur. Aucun autre droit de brevet (tel que les droits de brevet concernant la nucléase 5′) n'est transféré expressément, implicitement ou par préclusion. Pour de plus amples informations sur l'achat de licences, contacter le directeur des licences : Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, États-Unis.

La PCR consiste en la réplication d'une matrice d'ADN par une ADN polymérase thermostable. La processivité, la spécificité et la fidélité de la polymérase employée peuvent conditionner l'efficacité, la reproductibilité et le rendement de la réaction de PCR. La PCR haute fidélité utilise une ADN polymérase à faible taux d'erreurs et permet d'obtenir une très grande précision lors de la réplication de l'ADN d'intérêt. La fidélité est essentielle lorsque l'on recherche une amplification précise de la séquence du gène cible, par exemple lors d'un clonage ou d'un séquençage direct en vue d'une expression de la protéine en aval. Une mutation inopportune pourrait gravement affecter vos travaux. Notre analyse a montré que les enzymes KOD constituent une solution de choix pour une PCR à haut rendement, précise et rapide. Nos biologistes moléculaires travaillent au développement et à la formulation de polymérases offrant une spécificité, une fidélité et un rendement optimaux lors des PCR. Des tampons à la composition optimisée, des mélanges maîtres prêts à l'emploi et des paramètres de cyclage simples contribuent en outre à améliorer la facilité d'utilisation et la reproductibilité des données.
Ce kit d'ADN polymérase à démarrage à chaud KOD Xtreme<TMSYMBOL></TMSYMBOL>* est une enzyme de PCR optimisée pour l'amplification des matrices d'ADN longues ou riches en GC, y compris les pointes de queue de souris, les tissus végétaux et les applications de biologie de synthèse. Sa formulation unique vous permet de réaliser directement vos PCR sur des échantillons très peu travaillés ; vous bénéficiez ainsi d'une amplification de cibles extrêmement efficace à partir d'échantillons bruts. Le système comprend une ADN polymérase KOD de très haute fidélité complexée à deux anticorps monoclonaux, pour un thermocyclage avec démarrage à chaud, ainsi qu'un tampon concentré 2 × spécialement formulé. L'ADN polymérase à démarrage à chaud KOD Xtreme amplifie avec rapidité et précision les ADN génomiques et phagiques/plasmidiques cibles mesurant respectivement jusqu'à 24 kpb et 40 kpb. L'ADN polymérase à démarrage à chaud KOD Xtreme amplifie efficacement les matrices d'ADN "difficiles" qui contiennent jusqu'à 90 % de GC. Chaque kit contient 200 U d'ADN polymérase à démarrage à chaud KOD Xtreme, un tampon optimisé et suffisamment de dNTP pour 200 réactions d'amplification. Cette polymérase produit des ADN à bouts francs qui peuvent être utilisés lors de clonages avec les kits Perfectly Blunt<TMSYMBOL></TMSYMBOL> et LIC Vector de Novagen.

Caractéristiques et avantages

• Produit optimisé pour obtenir les taux de succès en PCR les plus élevés, même avec les cibles les plus difficiles
• Fidélité 10X supérieure à celle des mélanges Taq
• Amplifie efficacement les matrices d'ADN avec un taux de GC allant jusqu'à 90 %
• Amplifie les cibles génomiques allant jusqu'à 24 kpb
• Amplifie les cibles de phage/lambda jusqu'à 40 kpb
• Élimine les erreurs d'amorçage et la formation de dimères d'amorces
• Mise en place pratique à température ambiante compatible avec l'automatisation

Composants

• 1 × 200 U d'ADN polymérase à démarrage à chaud KOD Xtreme<TMSYMBOL></TMSYMBOL>
• 3 × 1,7 ml de tampon Xtreme concentré 2 ×
• 2 × 1 ml de dNTP (2 mM chacun)

Avertissement

Toxicité : irritant (B)

Définition de l'unité

Une unité est définie comme la quantité d'enzyme qui catalyse l'incorporation de 10 nmol de dNTP sous une forme non soluble aux acides en 30 min à 75 °C, dans une réaction contenant du Tris-HCl 20 mM (pH 7,5 à 25 °C), du MgCl₂ 8 mM, du DTT 7,5 mM, 50 µg/ml de BSA, du dATP, du dCTP, du dGTP et du dTTP (mélange de dTTP non marqué et de [³H]dTTP), 150 µM chacun, et 150 µg/ml d'ADN de thymus de veau activé.

Informations légales

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 10 - Combustible liquids