G003764

HPLC Analysis of Furosemide (Lasix) in Horse Serum on Discovery^® C18 after SPE using Discovery^® DSC-18

application for SPE, application for HPLC

Eigenschaften

• Methode(n): HPLC: suitable; solid phase extraction (SPE): suitable
• Testparameter: sample preparation: SPE (Solid Phase Extraction); sample/matrix: acidified horse serum spiked with indapamide at 10 mg/mL; SPE tube/cartridge: Discovery DSC-18, 50 mg/1 mL (52601-U); condition: 1 mL methanol; 1 mL 10 mM potassium phosphate, pH 3; sample addition: 1 mL; washing: 10 mM potassium phosphate, pH 3; elution: 1 mL 60% methanol in DI water.; column: Discovery C18, 15 cm x 4.6 mm I.D., 5 μm particles (504955); mobile phase: [A] 10 mM KH₂PO₄, pH 3 (adjusted with H₃PO₄): [B] acetonitrile; (60:40, A:B); flow rate: 1 mL/min; column temp.: 35 °C; detector: UV, 234 nm; injection: 10 μL
• Eignung: application for HPLC; application for SPE
• Anwendung(en): forensics and toxicology

Beschreibung

Anwendung

Vorbehandlung der Probe:
Reines Serum (Pferd) wurde mit 10μL 6M HCl/mL Serum angesäuert. Die IS-Blindlösung wurde aus angesäuertem Serum (Pferd) hergestellt, das mit Indapamid auf 10 μg/mL versetzt wurde.
Probe A = 10 μg/mL Furosemid in IS-Blindlösung
Probe B = 5 μg/mL Furosemid in IS-Blindlösung
Probe C = 0,5 μg/mL Furosemid in IS-Blindlösung
Probe D = 0,1 μg/mL Furosemid in IS-Blindlösung
Probe E = 0,05 μg/mL Furosemid in IS-Blindlösung

Konditionieren der SPE-Kartusche mit 1 mL Methanol und 1 mL 10 mM KH₂PO₄, pH 3 (eingestellt mit H₃PO₄)
Aufgabe von 1 mL der Probe
Waschen mit 10 mM KH₂PO₄, pH 3 (eingestellt mit H₃PO₄)
Elution mit 1 mL 60% Methanol

Rechtliche Hinweise

Discovery is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany