T8658

Trypsin Protease

Cleaves C-terminal of lysine and arginine residues, Suitable for Mass Spectrometry, from bovine pancreas

• Synonym(e): Porcine Trypsin, Trypsin for Mass Spectropetry
• CAS-Nummer: 9002-07-7
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.56
• EC Number: 232-650-8
• MDL number: MFCD00082094
• EG-Nummer: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)

Eigenschaften

• Produktname: Trypsin aus Rinderpankreas, suitable for protein sequencing, lyophilized powder
• grade: Proteomics Grade
• Quality Segment: 200
• form: lyophilized powder
• mol wt: 23.8 kDa
• packaging: vial of 100 μg
• solubility: hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear
• suitability: suitable for protein sequencing
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

Application

Für den Trypsinverdau von Peptiden ein Verhältnis von ca. 1:100 bis 1:20 (Trypsin:Peptid) verwenden. Die typische Verwendung für dieses Produkt besteht im Entfernen von adhärenten Zellen von einer Kulturoberfläche. Die zum Ablösen von Zellen von ihrem Substrat erforderliche Trypsinkonzentration hängt in erster Linie vom Zelltyp und dem Alter der Kultur ab. Trypsine werden auch für die Resuspendierung von Zellen während der Zellkultur, in der Proteomikforschung für den Verdau von Proteinen und in verschiedenen In-Gel-Verdaus verwendet. Weitere Anwendungsbereiche sind u. a. die Beurteilung der Kristallisierung mit membranbasierten Methoden und eine Studie zur Feststellung, ob Proteinfaltungsraten und Proteinausbeuten durch das Vorhandensein von sog. „kinetischen Fallen“ begrenzt werden können.

• Trypsin from bovine pancreas has been used for in-gel digestion for MS (mass spectrometry) analysis.[1]
• It has been used for the digestion of albumin for size-exclusion chromatography.[2]
• It has been used for the digestion of HDL (high density lipoprotein) for LC-MS (liquid chromatography-mass spectrometry) analysis.[3]
• It has been used for limited proteolysis of IST1 (putative MAPK-activating protein PM28).

Biochem/physiol Actions

Trypsin spaltet Peptide auf der C-terminalen Seite von Lysin- und Argininrückständen. Die Hydrolyse dieser Reaktion wird verlangsamt, wenn sich auf einer der Seiten der Spaltstelle ein Säurerest befindet, und die Hydrolyse wird beendet, wenn sich auf der Carboxylseite der Spaltstelle ein Prolinrest befindet. Der optimale pH-Wert für die Trypsinaktivität liegt zwischen 7 und 9. Trypsin kann auch zum Spalten von Ester und Amidbindungen von synthetischen Derivaten von Aminosäuren eingesetzt werden. EDTA wird Trypsinlösungen als Chelatbildner zugegeben, der Calcium- und Magnesiumionen neutralisiert, welche die Peptidbindungen verdecken, auf die sich das Trypsin auswirkt. Durch das Entfernen dieser Ionen wird die enzymatische Aktivität verstärkt.

Serinprotease-Inhibitoren, u. a. DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF und Aprotinin, hemmen Trypsin.

Preparation Note

This product is from pancreas sourced from New Zealand. It is soluble in 1 mM HCl at 1 mg/mL.

Other Notes

Eine BAEE-Einheit erzeugt unter Verwendung von BAEE als Substrat ein A₂₅₃ von 0,001 pro Minute bei einem pH-Wert von 7,6 und einer Temperatur von 25 °C.

Trypsin consists of a single chain polypeptide of 223 amino acid residues, produced by the removal of the N-terminal hexapeptide from trypsinogen which is cleaved at the Lys - lle peptide bond. The sequence of amino acids is cross-linked by 6 disulfide bridges. This is the native form of trypsin, beta-trypsin. BETA-trypsin can be autolyzed, cleaving at the Lys - Ser residue, to produce alpha-trypsin. Trypsin is a member of the serine protease family.

Disclaimer

Solutions in 1 mM HCl are stable for 1 year in aliquots and stored at -20°C. The presence of Ca²⁺ will also diminish the self-autolysis of trypsin and maintain its stability in solution. Trypsin will also retain most of its activity in 2.0 M urea, 2.0 M guanidine HCl, or 0.1% (w/v) SDS.

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS08,GHS07
• signalword: Danger
• hcodes: H315,H319,H334,H335
• pcodes: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 1
• ppe: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves