T6884

Thrombin aus Humanplasma

lyophilized powder, ≥2,000 NIH units/mg protein (E1%/280, 18.3)

• Synonym(e): Faktor IIa
• CAS-Nummer: 9002-04-4
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• EC Number: 232-648-7
• MDL number: MFCD00082072
• EG-Nummer: 3.4.21.5 (BRENDA, IUBMB)
• Specific activity: ≥2,000 NIH units/mg protein (E1%/280, 18.3)
• Biological source: human plasma

Eigenschaften

• biological source: human plasma
• Quality Segment: 200
• form: lyophilized powder
• specific activity: ≥2,000 NIH units/mg protein (E1%/280, 18.3)
• mol wt: 37.4 kDa
• impurities: HIV and HBsAg, source material tested negative
• UniProt accession no.: P00734
• storage temp.: −20°C
• Gene Information: human ... F2(2147)

Beschreibung

General description

Thrombin ist die finale Koagulationsprotease bezüglich der Hämostase mit koagulationsfördernder und koagulationshemmender Wirkung.

Thrombin wird durch die proteolytische Spaltung von inaktivem Prothrombin in der Leber gewonnen. Es handelt sich um ein Glycoprotein mit vier strukturellen Domänen: die 10 γ-carboxylierte Glutaminsäure enthaltende Gal-Domäne, zwei Kringle-Domänen und die Trypsin-ähnliche Serinprotease-Domäne. Das Prothrombin-Gen ist auf dem humanen Chromosom 11p11.2 lokalisiert.

Application

Thrombin wird für die stellenspezifische Spaltung von rekombinanten Fusionsproteinen mit einer zugänglichen Thrombin-Erkennungsstelle zum Entfernen von Affinitäts-Tags verwendet.

Thrombin aus menschlichem Plasma wird verwendet:

• für die Präparation von Fibringelen zur Beurteilung der Morphologie von humanen Knochenmarkstromazellen (hBMSC),
• für die Thrombozytenaktivierung,
• zur Beurteilung der Integrität von Endothelzell (EZ)-Monoschichten

Biochem/physiol Actions

Serinprotease, die selektiv Arg-Gly-Bindungen in Fibrinogen spaltet, um Fibrin und Fibrinopeptide A und B zu bilden.

Thrombin wird für die stellenspezifische Spaltung von rekombinanten Fusionsproteinen mit einer zugänglichen Thrombin-Erkennungsstelle zum Entfernen von Affinitäts-Tags verwendet. Thrombin wurde in einer Studie zur Untersuchung des Protein C-Wegs bei der intestinalen Barrierefunktion eingesetzt. [1]

Die Hauptfunktion von Thrombin besteht in der Spaltung von Fibrinogen zu Fibrin, um einen stabilen Gerinnungsprozess zu fördern. Zahlreiche Mutationen im Prothrombin-Gen tragen zu einer Defizienz bei, die zu Koagulationsstörungen wie Dysprothrombinämie und Hypoprothrombinämie führt. Ein hoher Thrombinspiegel löst eine neurotoxische Wirkung in dopaminergen Neuronen aus und trägt zur Progression von Parkinson bei. Eine Veränderung des Thrombinspiegels führt bei vielen Sklerosen zu einer entsprechenden Anpassung des Koagulationswegs. Patienten mit koronarer Herzkrankheit (KHK) weisen einen erhöhten Thrombinspiegel auf. Thrombinablagerungen in den Neurofibrillenbündeln im Gehirn können zu einer Tau-Proteinansammlung und zu den pathophysiologischen Veränderungen von Alzheimer beitragen.

Physical form

Lyophilisiert aus einem Kochsalz-Natriumcictrat-Puffer, pH 6,5.

Analysis Note

Beim NIH-Assay werden 0,2 ml verdünntes Plasma (1:1 mit Kochsalzlösung) als Substrat und 0,1 ml der Thrombinprobe (stabilisiert in einer 1%igen gepufferten Albuminlösung) auf Basis einer modifizierten Biggs-Methode analysiert. Zur Bestimmung der Thrombinkonzentrationen werden nur Gerinnungszeiten im Bereit von 15 - 25 Sekunden verwendet.

Other Notes

Die Aktivität wird in NIH-Einheiten ausgedrückt, die aus einem direkten Vergleich mit einem NIH-Thrombin-Referenzstandard gewonnen werden

Für weitere Informationen siehe thrombin at www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.

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Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS08,GHS07
• signalword: Danger
• hcodes: H315,H319,H334,H335
• pcodes: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Lagerklasse: 13 - Non Combustible Solids
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable