P6635

Phosphorylase b aus Kaninchenmuskel

lyophilized powder, ≥20 units/mg protein, 2× crystallization

• Synonym(e): α-Glucanphosphorylase, 1,4-α-D-Glucan:orthophosphat-α-D-glucosyltransferase, Glykogenphosphorylase
• CAS-Nummer: 9012-69-5
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.77
• EC Number: 232-737-0
• MDL number: MFCD00131905
• EG-Nummer: 2.4.1.1 (BRENDA, IUBMB)
• Specific activity: ≥20 units/mg protein
• Biological source: rabbit muscle

Eigenschaften

• biological source: rabbit muscle
• Quality Segment: 300
• form: lyophilized powder
• specific activity: ≥20 units/mg protein
• mol wt: 97,200 Da by calculation
• purified by: 2× crystallization
• storage condition: (Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place)
• technique(s): mass spectrometry (MS): suitable
• impurities: ~0.01 μmol/mg protein 5′-AMP (This low level will not interfere with phosphorylase and phosphorylase kinase assays.)
• UniProt accession no.: A0A5F9CLZ9, A0A5F9CRR0, A0A5F9D1C4, A0A5F9DLL9
• foreign activity: phosphoglucomutase ≤1.0%, phosphorylase a ≤10%, phosphorylase kinase ≤0.5%, phosphorylase phosphatase, debrancher enzyme, AMPase and ATPase ≤0.1%
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Forschungsbereich: Zellsignalisierung

Glykogenphosphorylase (PG), ein spezielles komplexes allosterisches Enzym[1], weist eine evolutionär konservierte Gensequenz auf.[2] GP umfasst eine Familie aus drei Isozymen wie Muskel-GP (mGP), Leber-GP (lGP) und Hirn-GP (bGP) beim Menschen.[1]

Application

Phosphorylase b aus Kaninchenmuskel wird wie folgt verwendet:

• beim Kalibrieren von Sepharose C1-6B-Säulen beim Untersuchen der Molekülmasse von Methylamindehydrogenase-Untereinheiten[3]
• in Ionenmobilitäts-Massenspektrometrie-Untersuchungen von Phosphorylase b-Ionen, die durch das Überladen von Reagenzien im ladungsreduzierenden Puffer erzeugt wurden[4]
• zum Herstellen von p³²-markierter Phosphorylase a mit Phosporylasekinase und [³²P]ATP[5]
• im Phosphorylase-Phosphatase-Assay[6]
• im Enzymassay als Positivkontrolle zum Sicherstellen, dass das Reaktionssystem für die Aktivitätsbestimmung angewandt wurde[7]

Biochem/physiol Actions

Phosphorylase b ist eine nicht aktive Form und kommt in der ruhenden Muskulatur vor. Die Phosphorylase-b-Kinase-Aktivität nimmt signifikant zu, wenn das Mg²⁺:ATP-Verhältnis 1 übersteigt. Es wird davon ausgegangen, dass der Abbau von ATP während der Muskelkontraktion in vivo die Umwandlung von Phosphorylase b auslöst.[8] Phosphorylase b wird von Inosinmonophosphat aktiviert.[9] Das Glykogenphosphorylase(PG)-Enzym spielt eine wesentliche Rolle im ersten Schritt der Glykogenolyse. Im Anfangsstadium der Glykogenolyse trennt Glykogenphosphorylase (GP) die α-1,4-Glykosidbindungen und setzt das Glucose-1-phosphat (G1P)-Molekül frei.[2] Beim Inkubieren mit einer geeigneten Konzentration von Glucose-1-phosphat ohne Zugabe von Primer kann Phosphorylase b aus Kaninchenmuskel proteingebundene Alpha-1,4-glucosyl-Ketten bilden.[10]

Packaging

Packungsgröße basiert auf dem Proteingehalt.

Physical form

Lyophilisiertes Pulver mit Lactose, 5′-AMP und Mg(OAc)₂ (10 μMol pro 100 mg Protein)

Other Notes

Eine Einheit bildet bei einem pH-Wert von 6,8 und einer Temperatur von 30 °C in Gegenwart von 5′-AMP aus Glykogen und Orthophosphat 1,0 μMol α-D-Glucose-1-phosphat; dies wird gemessen in einem System, das Phosphoglucomutase, NADP und Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase enthält. (Eine μmolare Einheit entspricht ca. 45 Cori-Einheiten.)

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 3
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)