P5931

Phosphatase, alkalisch aus E. coli

lyophilized powder, 30-60 units/mg protein (in glycine buffer)

• Synonym(e): Orthophosphor-Monoesterphosphohydrolase (alkalisches Optimum)
• CAS-Nummer: 9001-78-9
• UNSPSC Code: 12352204
• eCl@ss: 42010105
• EC Number: 232-631-4
• NACRES: NA.54
• MDL number: MFCD00131849
• EG-Nummer: 3.1.3.1 (BRENDA, IUBMB)
• Specific activity: 30-60 units/mg protein (in glycine buffer)

Eigenschaften

• form: lyophilized powder
• Quality Segment: 200
• specific activity: 30-60 units/mg protein (in glycine buffer)
• composition: Protein, ~50% biuret
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Alkalische Phosphatase (ALP) aus E. coli ist ein Mitglied einer Enzymgruppe, die eine intragene Komplementierung besitzt.

Application

Alkalische Phosphatase wird zur Konjugation von Antikörpern und anderen Proteinen für ELISA, Western Blot und histochemischen Nachweis verwendet. Es kann zur Proteinmarkierung eingesetzt werden, wenn eine hohe Sensitivität erforderlich ist. Produkt P5931 wird während Immunblots zur Behandlung von Zellmembranen vor der Tau1-Inkubation verwendet[1].

Das Enzym von Sigma wurde verwendet, um eine synthetische Nanoporenmembran zu entwickeln. Diese Membran imitiert Proteinkanäle, die durch Phosphorylierung/Dephosphorylierung reguliert werden, und nutzt eine Aneinanderreihung von Kohlenstoffnanoröhren (CNT), die mit einer Polystyrolmatrix imprägniert sind.[2]

Biochem/physiol Actions

Alkalische Phosphatase aus Escherichia coli ist ein dimeres, nicht glykolysiertes Protein, das hauptsächlich im Periplasma vorkommt. Es existieren drei bekannte Isoformen. Das Enzym erfordert Zink und wird durch Magnesium aktiviert[3][4]. E. coli alkalische Phosphatase weist eine breite Spezifizität für Phosphatester auf.

Das Enzym ist eine Phosphohydrolase mit einem optimalen pH-Wert von 10 in vitro. Der tatsächliche optimale pH-Wert ist von der Art und Konzentration des Substrats, der Art des Puffers, dem Phosphatakzeptor und zu einem gewissen Maß von der Art der Isoenzyme abhängig. Es katalysiert die Hydrolyse von Phosphatmonoestern wie p-Nitrophenylphosphat, Phenylphosphat, Phenolphthaleinphosphat, α-Glycerinphosphat, β-Glycerinphosphat, 2-Phosphorylglycerat, Triosephosphat, Glucose-6-phosphat, Glucose-1-phosphat, Fructose-1-phosphat, Fructose-6-phosphat, Adenosin-5-phosphat, Adenosin-3-phosphat, Phosphoenolpyruvat und β-Nicotinamidadenindinucleotidphosphat.[5][6][7] Die Aktivität wird durch 1,10-Phenylanthrolinmonohydrat, Diethylentriaminpentaessigsäure, Ethylenglycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N′,N′-tetraessigsäure und Ethylendiamintetraessigsäure-dinatriumsalzdihydrat gehemmt.

Physical form

Lyophilisiertes Pulver mit Tris-Puffersalzen, MgSO₄ und ZnSO₄

Preparation Note

Chromatographisch aufgereinigt

Other Notes

Eine Einheit hydrolysiert 1,0 μmol p-Nitrophenylphosphat je Min. bei einem pH-Wert von 10,4 und 37 °C.

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H334
• pcodes: P261 - P284 - P501
• Hazard Classifications: Resp. Sens. 1
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)