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MAK320

D-2-Hydroxyglutarat (D2HG) Assay-Kit

sufficient for 200 fluorometric reactions

Synonym(e):

D2HG-Testkit

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NACRES:
NA.84
UNSPSC Code:
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sufficient for 200 reactions (Fluorometric)

detection method

fluorometric

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cancer; neurological disorders

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General description

Der D-2-Hydroxyglutarat(D2HG)-Spiegel ist in normalen Zellen und Geweben niedrig, in Stoffwechselerkrankungen wie der seltenen autosomalen Störung D2HG-Azidurie jedoch deutlich erhöht. D2HG ist in anderen Stoffwechselerkrankungen, darunter dem multiplen Acyl-CoA-Dehydrogenase-Mangel, dem Dihydrolipoyl-Dehydrogenase-Mangel, dem Pyruvat-Decarboxylase-Mangel, dem Pyruvat-Carboxylase-Mangel, verschiedenen Krebserkrankungen sowie in Neoplasmen mit Mutationen in den Isocitrat-Dehydrogenase-1(IDH1)- und Isocitrat-Dehydrogenase-2(IDH2)-Genen leicht erhöht. Die Bestimmung eines erhöhten D2HG-Spiegels ist ein wichtiger Biomarker für die frühzeitige Diagnose, Prognose, Überwachung und Entwicklung von therapeutischen Strategien zur Bekämpfung dieser Krankheiten.

Application

Zur Bestimmung des D2HG-Spiegels in Zell- und Gewebelysaten, Serum, Urin, kultivierten Zellen und Kulturüberständen geeignet.

Biochem/physiol Actions

Das in Partnerschaft mit dem Deutschen Krebsforschungszentrum (DKFZ) entwickelte D2HG-Assay-Kit ist ein schneller und empfindlicher Enzym-Assay für die Bestimmung des D2HG-Spiegels in verschiedenen biologischen Flüssigkeiten: Serum, Urin, Zellkulturüberständen und Zell- oder Gewebelysaten. Der ursprünglich von Balss et al. entwickelte Assay basiert auf der Oxidation von D2HG zu α-Ketoglutarat (αKG) durch das Enzym (D)-2-Hydroxyglutarat-Dehydrogenase (HGDH), gekoppelt an die Reduktion von NAD+ zu NADH (siehe Abbildung 1). Die Menge des erzeugten NADH wird anschließend durch die diaphorasevermittelte Reduktion von Resazurin zum fluoreszierenden Farbstoff Resorufin quantifiziert (λex = 540 nm/λem = 590 nm).

Features and Benefits

  • Hochempfindlicher und schneller Enzym-Assay für den Nachweis des D2HG-Spiegels in verschiedenen biologischen Flüssigkeiten
  • Rechner zur Berechnungshilfe (zum Herunterladen einer Excel-Rechnerdatei hier klicken) Analysieren Sie die Ergebnisse auf der Basis Ihrer experimentellen Daten.
  • Kurzanleitung für Ihren Arbeitstisch – zur Sicherstellung des Erfolgs Ihrer Experimente
  • Mehr Experimente in einem einzigen Kit – enthält genügend Reagenzien für 200 Tests
  • Detektionszeit: nur 30–60 Minuten

Legal Information

Dieses Produkt wird unter einer Lizenz des Deutschen Krebsforschungszentrums (DKFZ) und des Universitätsklinikums Heidelberg verkauft. Die Verwendung dieses Produkts unterliegt bestimmen Patenten der USA und anderer Länder, u. a. der US-Patentnummer 9.487.815, der EP-Patentnummer 2 820 145 und gleichwertigen ausländischen Patenten. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen.

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sufficient for 100 colorimetric or fluorometric tests

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cancer; neurological disorders

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cancer

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gastrointestinal diseases; cancer


Lagerklasse

11 - Combustible Solids



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  3. What is the recommended approach for measuring 2-HG levels in cell culture samples using the MAK320 detection kit if the sample volume is very small (i.e. 100 ul) and there is no access to equipment for accurately measuring pH in small volumes? Additionally, is the pH range critical for the experiment to work? Would a higher or lower pH result in decreased enzyme activity or render the experiment ineffective?

    1 answer
    1. The recommended solution is to use litmus paper to measure the pH of the sample. Another option is to use a special electrode designed for very small volumes, although this can be complicated and expensive. While the pH of the sample is crucial for test performance, the pH range is wide, making pH paper suitable and requiring only a few microliters of the sample.

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