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ChIPAb+ FOXA2 - durch ChIP validiertes Antikörper- und Primer-Set

from mouse

• Synonym(e): Hepatocyte nuclear factor 3-beta, HNF-3-beta, HNF-3B, Forkhead box protein A2, Transcription factor 3B, TCF-3B
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.32
• eCl@ss: 32160702
• Clone: monoclonal
• Species reactivity: human
• Application: ChIP, ICC, WB
• Citations: 3

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Level: 100
• clone: monoclonal
• species reactivity: human
• species reactivity (predicted by homology): mouse (based on 100% sequence homology)
• manufacturer/tradename: ChIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, immunocytochemistry: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• NCBI accession no.: NP_068556
• UniProt accession no.: Q9Y261
• shipped in: dry ice

Beschreibung

General description

Alle ChIPAb+-Antikörper werden einzeln (jede Charge, jedes Mal) für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert. Jedes ChIPAb+-Antikörper-Set enthält Kontrollprimer (jede Charge wurde durch qPCR geprüft), um Ihre IP-Ergebnisse im stellenspezifischen Kontext biologisch zu validieren. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, ChIP-Protokolle zu validieren, wenn sie unseren Antikörper in Ihrem Chromatin-Kontext nutzen. Jedes Set enthält außerdem einen Negativkontrolle-Antikörper, um die Spezifizität der ChIP-Reaktion zu gewährleisten.
Das ChIPAb+-FOXA2-Set enthält den FOXA2-Antikörper, ein normales Maus-IgG und Kontrollprimer, die eine 138-bp-Region des ChIP-Primers, Maus-Hnf4α-Verstärker amplifizieren. FOXA2 und die Negativkontrollen werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von FOXA2-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.

Das auch als Hepatozyten-nukleärer Faktor 3-beta (HNF3b) bekannte Forkhead-Box-Protein A2 (Foxa2) gehört zur Forkhead-Klasse der DNA-Bindungsproteine. Diese Familie von Transkriptionsfaktoren beeinflusst die Genexpression in endodermal gewonnenem Gewebe wie Lunge, Leber, Magen, Pankreas und Darm. Foxa2 wurde auch in ektodermal gewonnenem Gewebe wie Niere, Gebärmutter und Vagina sowie in Bläschendrüsen und Koagulationsdrüsen während der Entwicklung nachgewiesen. Mehrere Studien zeigen, dass FOXA-Proteine die Bindung mehrerer Zellkernrezeptoren an ihre entsprechenden Ziele auf kontextabhängige Weise erleichtern und dadurch an verschiedenen Funktionen beteiligt sind, einschließlich Zellerhaltung, Differenzierung, Metabolismus und Organogenese. Abnormale Funktionen von FOXA-Proteinen sind auf Krankheitszustände wie Diabetes und Morbus Parkinson zurückzuführen.

~50 kDa gemessen

Immunogen

Rekombinantes Protein, das humanem FOXA2 entspricht.

Application

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus Mäuselebergewebe (5 mg Gewebeäquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 4 µl normalem Maus-IgG oder 4 µl Anti-FOXA2 und dem Magna ChIP G Kit (Katalognr. 17-611) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit FOXA2 assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, Maus-Hnf4α-Verstärker als positive Stelle und Maus-Hnf4α-Promotor als negative Stelle verifiziert. (Abbildung 2) Die Daten werden als prozentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Chromatin-Eingabe für jedes Amplikon und jede ChIP-Probe wie angegeben dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-409) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).
Western-Blot-Analyse:
Daten einer repräsentativen Charge.
HepG2-Zelllysat wurde mit Anti-FOXA2 (1:500-Verdünnung) untersucht. Die Proteine wurden mit an HRP konjugiertem Anti-Maus-IgG-Sekundärantikörper der Ziege und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem veranschaulicht.
Der Pfeil zeigt FOXA2 (~50 kDa). (Abbildung 3)

Dieses Set aus ChIP-validiertem ChIPAb+-FOXA2-Antikörper und Primer enthält praktischerweise den Antikörper und die spezifischen Kontroll-PCR-Primer.

Forschungs-Unterkategorie
Transkriptionsfaktoren

Forschungskategorie
Epigenetik und Zellkernfunktion

Packaging

25 Assays je Set. Empfohlene Verwendung: 4 μl Antikörper je Chromatin-Immunpräzipitation (abhängig vom biologischen Kontext).

Physical form

Anti-FOXA2 (Maus, monoklonal). Ein Fläschchen mit 100 µl aufgereinigtem monoklonalem Maus-IgG1κ in Puffer mit 0,1 mol/l Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mmol/l NaCl und 0,05 % Natriumazid vor der Zugabe von Glycerin zu 30 %. Bei -20 °C aufbewahren.
Konzentration: 0,175 mg/ml
Normales Maus-IgG. Ein Fläschchen mit 125 µg aufgereinigtem Maus-IgG in 125 µl Lagerpuffer mit 0,1 % Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.
ChIP-Primer, Maus-Hnf4α-Verstärker. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μmol/l jedes Primers, spezifisch für den Maus-Hnf4α-Verstärker. Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: TTC CAG CTG CCT TTA TCT CCC TGT
REV: TCT CCA CAC ATG TCC AGC AGC CT

Format: Aufgereinigt

Protein G

Preparation Note

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar. Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach dem ersten Auftauen und vor dem Entfernen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.
Hinweis: Ein Abfall der Gefrierschranktemperatur unter -20 °C kann dazu führen, dass glycerinhaltige Lösungen während der Lagerung einfrieren.

Analysis Note

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus Mäuselebergewebe (5 mg Gewebeäquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 4 µl normalem Maus-IgG oder 4 µl Anti-FOXA2 und dem Magna ChIP^® G Kit (Katalognr. 17-611) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von FOXA2-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, Maus-Hnf4α-Verstärker verifiziert (Abbildung 1).
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP G (Katalognr. 17-409) oder EZ-ChIP (Katalognr- 17-371).

Kontrolle
Einschließlich normales Maus-IgG und für Maus Hnf4α-Verstärker spezifische Primer.

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

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