05-201

Anti-Fas Antibody

UPSTATE^®, mouse monoclonal, CH11

• Synonym(e): APO-1 cell surface antigen, CD95 antigen, Fas (TNF receptor superfamily, member 6), Fas AMA, Fas antigen, apoptosis antigen 1, tumor necrosis factor receptor superfamily, member 6
• UNSPSC Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41
• Clone: CH11, monoclonal
• Species reactivity: human
• Application: FACS, ICC, WB
• Citations: 368

Eigenschaften

• Produktname: Anti-Fas-Antikörper, (human, aktivierend), Klon CH11, clone CH11, Upstate^®, from mouse
• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: affinity purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: CH11, monoclonal
• purified by: affinity chromatography
• species reactivity: human
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): flow cytometry: suitable, immunocytochemistry: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgM
• NCBI accession no.: NM_152877
• UniProt accession no.: P25445
• shipped in: dry ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... FAS(355)

Beschreibung

General description

43 kDa

Fas/APO-1/CD95 (36 kDa) gehört zur Superfamilie der Tumornekrosefaktor(TNF)-Rezeptoren; bei dieser Familie handelt es sich um Transmembranrezeptoren. Es wurde nachgewiesen, dass Fas ein wichtiger Vermittler des Zelltods durch Apoptose und auch an Entzündungen beteiligt ist. Die Bindung des Fas-Liganden (Fas-L) induziert die Trimerisierung von Fas in der Membran der Zielzelle. Die Aktivierung von Fas rekrutiert das Fas-assoziierte Protein mit Todesdomäne (Fas-associated protein with death domain, FADD) durch Wechselwirkungen zwischen den Todesdomänen von Fas und FADD. Procaspase 8 bindet an Fas-gebundenes FADD über die Wechselwirkungen zwischen der Todeseffektordomäne (DED) von FADD und Procaspase 8; dies führt zur Aktivierung der Caspase 8. Die aktivierte Caspase 8 spaltet (aktiviert) andere Procaspasen, dadurch wird eine Caspasen-Kaskade gestartet, die schließlich zur Apoptose führt. Caspasen spalten Lamine im Zellkern, was zum Zusammenbruch des Zellkerns und Verlust seiner normalen Struktur führt. Fas-induzierte Apoptose kann in verschiedenen Stadien effektiv blockiert werden, entweder durch das FLICE-inhibierende Protein (FLIP), durch Bcl-2 oder durch CrmA (Cytokine response modifier A).

Biologische Aktivität
Der Antikörper weist zytolytische Aktivität an menschlichen, Fas exprimierenden Zellen auf. Murine WR19L-Zellen und L929-Zellen, die mit für humanes Fas codierender cDNA transfiziert wurden, durchlaufen als Reaktion auf diesen Antikörper Apoptose.

Immunogen

FS-7 (humane diploide Fibroblasten-Zelllinie). Clone CH-11.

Application

Anti-Fas-Antikörper (human, aktivierend) für den Nachweis von Fas; Klon CH11 wurde publiziert und validiert zur Verwendung in Durchflusszytometrie (FC), Immunzytochemie (IC) und Western Blot (WB).

Forschungsunterkategorie
Apoptose und Krebs

Forschungsunterkategorie
Apoptose – Weiteres

Western Blot:
Mit 0,5–2 μg/ml einer früheren Charge wurde Fas in einem Raji-Zelllysat nachgewiesen.
Immunzytochemie:
Mit 5–10 μg/ml einer früheren Charge wurde Fas in mit 4%igem Formalin/2%iger Essigsäure fixierten HeLa-Zellen nachgewiesen.
Durchflusszytometrie:
Eine frühere Charge wurde von einem unabhängigen Labor mit 20 μg/ml Anti-Fas, Klon CH11, getestet (Yonehara, S., 1989; Kobayashi, N., 1990).

Biochem/physiol Actions

Dieser Antikörper erkennt TNF nicht und weist keine Kreuzreaktion mit Maus-Fas auf. Der Fas-Ligand induziert in humanen, Maus- und Ratten-Systemen Apoptose.

Dieser Antikörper erkennt das humane Zelloberflächenantigen Fas mit Mr = 43 kDa, das in verschiedenen menschlichen Zellen wie myeloischen Zellen, T-lymphoblastoiden Zellen und diploiden Fibroblasten exprimiert wird.

Physical form

Gereinigter monoklonaler IgM-Antikörper der Maus in Puffer mit PBS, pH 7,2, mit 50 % Glycerin. Flüssig bei -20 ºC.

Immunaffinitätschromatographie

Preparation Note

Bei -20 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar. Für maximale Produktrückgewinnung das Originalfläschchen vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren.

Analysis Note

Kontrolle
Ganzzelllysate von humanem Lebertumor, humanem Brusttumor oder Jurkat-Zellen, Raji-Zelllysat.

Regelmäßig durch Nachweis der zytolytischen Aktivität an menschlichen, Fas exprimierenden Zellen beurteilt. Murine WR19L-Zellen und L929-Zellen, die mit für humanes Fas codierender cDNA transfiziert wurden, durchlaufen als Reaktion auf diesen Antikörper Apoptose.

Analyse des Apoptose-Assays:
15–20 µg/ml dieser Charge induzierten Apoptose in humanen Jurkat-Zellen maximal mit 83 % Mortalität nach 24 Stunden Behandlung.

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

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Sicherheitshinweise

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