05-1050-M

4G10^® Platinum, Antikörper gegen Phosphotyrosin (monoklonaler Maus-Cocktail IgG2b)

clone 4G10®, Upstate^®, from mouse

• Synonym(e): Anti-Phosphotyrosin-Antikörper
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 4G10®, monoclonal
• Technique(s): ELISA: suitable, flow cytometry: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunofluorescence: suitable, immunohistochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• Application: ELISA, FACS, ICC, IF, IHC, IP, WB
• Citations: 34

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 4G10®, monoclonal
• species reactivity (predicted by homology): all
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): ELISA: suitable, flow cytometry: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunofluorescence: suitable, immunohistochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG2b
• target post-translational modification: phosphorylation (pTyr)

Beschreibung

General description

Abhängig von der Molekülmasse des nachzuweisenden tyrosinphosphorylierten Proteins.

Die Entwicklung des Klons 4G10 gegen Phosphotyrosin 1989 war eine wegweisende Entdeckung für die Forschung. 4G10 war der erste und ist der beste monoklonale Antikörper zum Nachweis der Tyrosinphosphorylierung. 4G10 ist für seine Empfindlichkeit bekannt und dafür, dass er mehrere Tyrosinphosphorylierungen auf vielen Substraten nachweisen kann. Er wurde über die vergangenen 2 Jahrzehnte tausendfach für fast jede Anwendung und jede Tyrosinzielstruktur in der Wissenschaft und Medizin validiert. Auch wenn bereits hundertfach vergeblich versucht wurde, diesen Antikörper zu verbessern, haben wir in einem weiteren Anlauf 4G10 Platin geschaffen, indem wir 4G10 mit dem als zweitbesten anerkannten Antikörper, Klon PY20, kombiniert haben. PY20 allein ist nur ein schwacher Ersatz für 4G10, wirkt aber additiv, sodass auf den meisten Substraten ein Nachweisniveau möglich wird, das sogar 4G10 allein nicht leisten kann.

Immunogen

4G10 nutzt an KLH gekoppeltes Phosphotyramin und PY20 nutzt an Trägerprotein konjugiertes Phosphotyrosin.

Application

4G10 Platin gegen Phosphotyrosin (Maus, monoklonaler Cocktail IgG2b) erkennt Phosphotyrosine-Proteinkonzentrationen & wurde für den Einsatz in folgenden Verfahren veröffentlicht & validiert: WB, ICC, ELISA, IHC, IF, Flow & IP.

Forschungskategorie
Signalisierung

Forschungsunterkategorie
Allgemeine posttranslationale Modifikation

Immunpräzipitation: Mit 2–4 μL einer früheren Charge können die phosphotyrosinhaltigen Proteine im Lysat einer konfluenten Kultur (10-cm-Petrischale) von Zellen, die eine aktivierte Tyrosinkinase exprimierten, quantitativ immunpräzipitiert werden. Fügen Sie 0,2 mM Natriumorthovanadat zu dem Lysepuffer hinzu, um das Phosphotyrosin zu erhalten.

Biochem/physiol Actions

Tyrosinphosphorylierte Proteine von allen Spezies.

Physical form

Format: Aufgereinigt

Proprietäres Gemisch von an Protein G aufgereinigtem monoklonalen Maus-Antikörper 4G10 (IgG2b) und PY20 (IgG2b) in 0,1 M Tris-Glycin, Ph 7,4, 0,15 M NaCl, 0,05 % Natriumazid.
Flüssig bei 2–8 °C.

Protein G-Sepharose Chromatographie

Preparation Note

Ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.

Analysis Note

Evaluiert mittels Western Blot an einem modifizierten RIPA-Lysat aus EGF-behandelten humanen A431-Karzinomzellen.

Western-Blot-Analyse: 1:1.000–1:2.000 dieses Antikörpers erkannten tyrosinphosphorylierte Proteine in einem modifizierten RIPA-Lysat aus EGF-behandelten humanen A431-Karzinomzellen.

Kontrolle
Empfohlene positive Antigenkontrolle: Bestellnr. 12-302, EGF-stimuliertes A431-Zelllysat wird als positive Antigenkontrolle für Western Blots kostenlos mitgeliefert. Wie gewünscht aliquotieren, sofort wieder einfrieren und bei -20 ºC aufbewahren. Das Lysat ist bei -20 ºC 6 Monate haltbar. Vor Gebrauch 2,5 μL 2-Mercaptoethanol pro 100 μL Lysat zugeben und 5 Minuten lang einkochen. Für die Immunoblot-Analyse 20 μg eingekochtes Lysat pro Spur auftragen.

Legal Information

4G10 is a registered trademark of Upstate Group, Inc.

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
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