RTN70

Kit minipreparación ARN total de mamíferos GenElute^™

sufficient for 70 purifications

• Sinónimos: Kit para RNA de mamíferos GenElute^™, Gen Elute
• UNSPSC Code: 41105501
• NACRES: NA.52

Propiedades

• usage: sufficient for 70 purifications
• greener alternative product characteristics: Designing Safer Chemicals; Learn more about the Principles of Green Chemistry.
• sustainability: Greener Alternative Product
• technique(s): RNA purification: suitable
• greener alternative category: Aligned,
• storage temp.: 15-25°C

Descripción

General description

El kit de minipreparación de ARN total de mamíferos GenElute de Sigma proporciona una forma sencilla y cómoda de aislar el ARN total de las células y los tejidos de mamífero. Se proporcionan protocolos para células, tejidos y tejidos fibrosos, que difieren en sus condiciones de homogeneización y de lisis celulares. Una vez unido el ARN a la columna de unión GenElute, el procedimiento de purificación es el mismo para todos los materiales de partida. Para los tejidos fibrosos, el kit debe utilizarse con proteinasa K (ref. P4850) para garantizar la desorganización eficaz de las células. El kit combina las ventajas de un sistema a base de sílice con un formato de microespín y elimina la necesidad de gradientes de cloruro de cesio, precipitación en alcohol y compuestos orgánicos peligrosos como el fenol y el cloroformo. Las células y los tejidos se lisan y homogeneizan en un tampón que contiene tiocianato de guanidina para asegurar
la desnaturalización completa de las macromoléculas y la inactivación de las RNasas. La adición de etanol hace que el ARN se una cuando el lisado se centrífuga a través de una membrana de sílice en un tubo de microcentrífuga. Después de lavar para eliminar los contaminantes, se eluye el ARN en 50-100 μl de disolución de elución. Pueden aislarse hasta 150 μg de ARN total en menos de 30 minutos.

Si debe eliminar cualquier traza de contaminación por ADN, se recomienda el tratamiento ulterior con DNAsa I. La digestión con DNasa I puede realizarse mientras el ARN está unido a la columna de unión GenElute utilizando el conjunto de digestión en columna con (On-Column DNase I Digestion Set) (DNASE10 y DNASE70). Si lo que se desea es una eliminación más estricta del ADN contaminante, la preparación de ARN final puede tratarse con DNasa I de calidad de amplificación (AMPD1).

Nos hemos comprometido a proporcionarle los productos alternativos más sostenibles que se adhieran a uno o más de los 12 principios de la química sostenible. Este producto tiene una química inherentemente más segura, en comparación con la utilización convencional del fenol y el cloroformo para realizar extracciones de ADN.

Application

El kit de minipreparación de ARN total de mamíferos GenElute^™ se ha utilizado para aislar el ARN total:

• del área preóptica congelada al instante de cerebro de rata
• de la parte central del tejido del manto que contiene las gónadas del mejillón Mytilus trossulus
• del hígado murino

El ARN purificado está listo para transcripción inversa y PCR, marcaje y análisis de micromatrices y otras aplicaciones comunes. Tenga en cuenta que moléculas de ARN de una longitud inferior a 200 nucleótidos, como el ARNt, el ARNr 5S y el ARNr 5,8S, no se recuperan eficazmente en las condiciones utilizadas con este kit.

Features and Benefits

• Purifica el ARN total de hasta 10⁷ células o 40 mg de tejido por preparación
• Produce hasta 150 μg de ARN total concentrado puro por preparación
• Recupera el ARN de tan sólo 100 células
• Sencillo y eficiente: de 12 a 18 preparaciones en 30 minutos
• Más rápido que los métodos de intercambio aniónico de flujo por gravedad
• Sin etapas engorrosas asociadas con resinas y fangos magnéticos
• Un 40 % más de purificaciones por kit en comparación con el proveedor principal

Other Notes

El kit de purificación de ARN total de mamíferos GenElute^™ combina la tecnología de membrana de sílice con un cómodo formato de columna giratoria para un método de unión, lavado y eluido rápidos que permitan preparar un ARN total de gran calidad.

Si desea más información, puede ver www.sigma-aldrich.com/totalrna.

Principle

Las muestras son lisadas y homogeneizadas en tiocianato de guanidina y 2-mercaptoetanol para liberar el ARN e inactivar las RNAsas. Los lisados se centrifugan en una columna de filtración para eliminar los restos celulares y cortar el ADN. A continuación se aplica el filtrado a una columna de sílice de alta capacidad para que se una el ARN total, seguido de lavado y elución. Pueden recuperarse hasta 150 μg de ARN total por preparación en 100 μl de agua. El ARN purificado está listo para inmunotransferencias Northern (Fig. 1), RT-PCR (Fig. 2) y otras aplicaciones habituales.

Legal Information

GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Información de seguridad

• pictograms: GHS06,GHS08,GHS05,GHS09
• signalword: Danger
• hcodes: H301 + H331,H310,H314,H317,H361d,H373,H410
• pcodes: P202 - P273 - P280 - P303 + P361 + P353 - P304 + P340 + P310 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Acute Tox. 2 Dermal - Acute Tox. 3 Inhalation - Acute Tox. 3 Oral - Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Repr. 2 - Skin Corr. 1C - Skin Sens. 1 - STOT RE 2 Oral
• target_organs: Liver,Heart
• supp_hazards: EUH032
• Storage Class: 6.1A - Combustible acute toxic Cat. 1 and 2 / very toxic hazardous materials