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Millipore

Benzonase® Nuclease HC

Purity > 99%, Effective Viscosity Reduction and Removal of Nucleic Acids from protein solutions

Sinónimos:

Endonucleasas from Serratia marcescens

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About This Item

Número de CAS:
9025-65-4
Comisión internacional de enzimas:
3.1.30.2 (BRENDA, IUBMB)
MDL number:
MFCD00131010
UNSPSC Code:
12352202
NACRES:
NA.54

product name

Benzonase® Nucleasa HC, Pureza > 99%, Effective Viscosity Reduction and Removal of Nucleic Acids from protein solutions

biological source

Serratia marcescens

Quality Level

100

recombinant

expressed in E. coli

assay

>99% (SDS-PAGE)

form

buffered aqueous glycerol solution

manufacturer/tradename

Novagen®

storage condition

OK to freeze

concentration

≥250 units/μL

impurities

<0.25 EU/kU Total endotoxin

application(s)

research use

shipped in

wet ice

storage temp.

−20°C

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General description

La nucleasa Benzonase® es una endonucleasa biotecnológica producida a partir de Serratia marcescens. Degrada todas las formas de ADN y ARN (monocatenarias, bicatenarias, lineales y circulares) pero no tiene actividad proteolítica. Es eficaz en muchas condiciones diversas y posee una actividad específica excepcionalmente elevada. La enzima digiere por completo los ácidos nucleicos a oligonucleótidos de 2 a 5 bases de longitud (por debajo del límite de hibridación) terminados en 5′-monofosfato, lo que es ideal para separar los ácidos nucleicos de las proteínas recombinantes y permite el cumplimiento de las directrices de la FDA sobre contaminación de ácidos nucleicos. La capacidad de Benzonase para hidrolizar rápidamente los ácidos nucleicos hace de la enzima una opción excelente para reducir la viscosidad y el tiempo de procesamiento, y para aumentar el rendimiento proteico. Por ejemplo, la enzima es compatible con los reactivos de extracción de proteínas BugBuster y PopCulture y puede por tanto añadirse junto con esos reactivos para eliminar la viscosidad y quitar los ácidos nucleicos de extractos de E. coli.

La enzima consta de dos subunidades de 30 kDa cada una. Es funcional a un pH comprendido entre 6 y 10, y entre 0 y 42°C; además requiere Mg2+ 1-2mM para activación. La enzima es también activa en presencia de detergentes iónicos y no iónicos, agentes reductores, PMSF (1mM), EDTA (1 mM) y urea (su actividad relativa depende de condiciones específicas). Su actividad es inhibida por cationes monovalentes >150 mM, fosfato >100 mM, sulfato de amonio >100 mM o HCl de guanidina >100 mM.

La nucleasa Benzonase está disponible en calidades ultrapura (>99 % mediante SDS-PAGE) y pura (>90 %) a una concentración estándar de 25 - 29 U/µl y a una concentración elevada (HC) de 250 U/µl. Ambas preparaciones están exentas de proteasas detectables y tienen una actividad específica > 1 × 106 U/mg de proteínas. El grado de pureza >99 % se ha probado para endotoxinas y contiene<0.25 EU/1000 units. The product is suppliedas a 0.2 µm filtered solution in 50% glycerol.Store at -20°C.

Total endotoxin:<0.25 EU/1,000 units.Purity: >99% mediante SDS-PAGE.

Application

Utilizado para eliminación de los ácidos nucleicos de las muestras proteicas.

Biochem/physiol Actions

Digiere el ADN y el ARN nativos o desnaturalizados por calor.

Warning

Toxicidad: Manipulación estándar (A)

Unit Definition

Una unidad se define como la cantidad de enzima que causa un ΔA₂₆₀ de 1,0 en 30 minutos, lo que corresponde a la digestión completa de 37 µg de ADN.

Legal Information

Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Storage Class

10 - Combustible liquids

wgk_germany

WGK 2

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