G003762

HPLC Analysis of Piroxicam and 2-Aminopyridine in Urine on Discovery^® HS F5 after SPE using Discovery^® DSC-MCAX

application for SPE, application for HPLC

Propriétés

• Technique(s): HPLC: suitable; solid phase extraction (SPE): suitable
• Paramètres du test: sample preparation: SPE (Solid Phase Extraction); sample/matrix: human urine spiked with piroxicam (4 μg/mL) and 2-aminopyridine (10 μg/mL); SPE tube/cartridge: Discovery DSC-MCAX, 100 mg/3 mL (52783-U); condition: 1 mL methanol; 1 mL 10 mM potassium phosphate, pH 3; sample addition: 1 mL; washing: 1 mL 10 mM potassium phosphate, pH 3; 1 mL methanol; elution: 1 mL 5% ammonium hydroxide in methanol; eluate post-treatment: evaporate to dryness with nitrogen at room temperature, reconstitute in 1 mL mobile phase; column: Discovery HS F5, 15 cm x 4.6 mm I.D., 5 μm particles (567516-U); mobile phase: [A] 10 mM potassium phosphate, pH 6: [B] acetonitrile (85:15, A:B); flow rate: 2 mL/min; column temp.: 25 °C; detector: UV, 220 nm; injection: 10 μL
• Adéquation: application for HPLC; application for SPE
• Application(s): clinical

Description

Application

Pré-traitement de l′échantillon:
Le piroxicam et la 2-aminopyridine (métabolite polaire du piroxicam) ont été ajoutés à de l′urine humaine à des concentrations de 4 et 10μg/mL, respectivement. L′échantillon d′urine a été dilué à 1:1 avec du phosphate de potassium 10mM, pH 3.

Conditionner le tube de SPE avec 1mL de méthanol et 1mL de phosphate de potassium 10mM, pH 3
Charger1mL d′urine dopée diluée
Laver avec 1mL de phosphate de potassium 10mM, pH 3, et 1mL méthanol
Eluer avec 1mL d′hydroxyde d′ammonium 5% dans le méthanol
Evaporerà sec avec N₂à température ambiante
Reconstituer dans 1mL de phase mobile

Répéter la méthode ci-dessus en utilisant deux phases concurrentes en mode mixte échange de cations de poids de phase/dimensions équivalentes

Informations légales

Discovery is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany