FPCRN-RO

ADN polymérase Taq FastStart^™, dNTPack

• Code UNSPSC : 41106300
• Nomenclature NACRES : NA.21

Propriétés

• Qualité: Molecular Biology
• Niveau de qualité: 100
• Forme: liquid
• Utilisation: sufficient for ≤1,250 reactions (04738403001); sufficient for ≤2,500 reactions (04738420001); sufficient for ≤250 reactions (04738357001); sufficient for ≤50 reactions (04738314001); sufficient for ≤500 reactions (04738381001)
• Activité spécifique: 5 U/μL
• Conditionnement: pkg of 1,000 U (04738381001 [4x250 U]); pkg of 2,500 U (04738403001 [10x250 U]); pkg of 5,000 U (04738420001 [20x250 U]); pkg of 100 U (04738314001); pkg of 500 U (04738357001 [2x250 U])
• Fabricant/nom de marque: Roche
• Concentration: 40 U/mL; 55 U/mL
• Paramètres: 72 °C optimum reaction temp.
• Technique(s): DNA amplification: suitable; PCR: suitable
• Couleur: colorless
• pH: 8.0-9.0
• Solubilité: water: miscible
• Adéquation: suitable for molecular biology
• Application(s): life science and biopharma
• Activité étrangère: nicking activity, none detected (up to 10U w.pBR 322-DNA); ribonuclease, none detected; unspecified endonuclease, none detected
• Température de stockage: −20°C

Description

Description générale

Le dNTPack enzymatique contient de l'ADN Taq polymérase FastStart et une solution prête à l'emploi de nucléotides de qualité PCR. L'ADN Taq polymérase FastStart est une enzyme polyvalente qui peut être utilisée dans un grand nombre d'applications et sur de nombreuses plateformes instrumentales. Cette ADN Taq polymérase recombinante thermostable modifiée est inactive aux températures inférieures à +75 °C, mais est activée par une étape d'activation thermique de 2 à 4 minutes à +95 °C. Du fait de son inactivité à faible température, l'ADN Taq polymérase FastStart ne peut pas allonger les hybrides de matrice-d'amorce non spécifiques susceptibles de se former à ces températures. Un système tampon optimisé pour la PCR et une solution riche en GC permettant à l'enzyme de fonctionner sur un large éventail de matrices sont également fournis.

Application

L'ADN Taq polymérase FastStart^™ est une forme d'ADN Taq polymérase recombinante chimiquement modifiée et thermostable. L'enzyme est inactive de +15 à +25 °C durant la mise en place de la PCR, puis est activée à +95 °C lors de la dénaturation initiale. Cette enzyme donne de très bons résultats du fait de sa conception unique et de son système tampon optimisé. L'ADN Taq polymérase FastStart est idéale pour la PCR à démarrage à chaud, car elle reste inactive durant la mise en place de la PCR et ce, jusqu'à l'étape de dénaturation initiale. Cette enzyme peut être utilisée dans les cas suivants :

• PCR à démarrage à chaud jusqu'à 3 kb
• RT-PCR à démarrage à chaud jusqu'à 3 kb
• PCR multiplex
• Matrices complexes, par exemple, structures secondaires ou séquences riches en GC
• PCR automatisée, par exemple avec manipulation à température ambiante
• PCR quantitative (qPCR)

Pour une simplicité maximale, optez pour le mélange maître FastStart pour PCR concentré 2x prêt à l'emploi.

Caractéristiques et avantages

Activité volumique : 5 U/μl
Chaque dNTPack contient un mélange 10 mM prêt à l'emploi de nucléotides (sous forme de sel de sodium) exempts d'additifs.

• Spécificité, sensibilité et rendement supérieurs :

Le démarrage à chaud facilite la mise en place de la PCR.

• Utilisation d'un système robotique.

Le mélange enzymatique est stable pendant 24 heures entre +15 et +25 °C.

• Absence de contamination en PCR.

Incorporez du dUTP et utilisez de l'uracile-ADN glycosylase pour prétraiter les mélanges maîtres de PCR.

• Économique.

Utilisez la solution prémélangée particulièrement pratique de nucléotides de qualité PCR.

Conditionnement

1 kit contenant 6 composants

Qualité

La fonction de chaque lot est testée à l'aide d'ADN génomique humain et d'amorces spécifiques du fragment de 365 pb du gène tPA humain et d'un fragment de 284 pb du gène Apo E comportant un taux de GC de 74 %. Chaque lot est également testé afin de confirmer l'absence d'exonucléases et d'endonucléases ainsi que l'absence d'activité de coupure.
Pour en savoir plus, se reporter au mode d'emploi correspondant.

Définition de l'unité

Une unité d'ADN polymérase FastStart est définie comme la quantité d'enzyme pouvant incorporer 10 nmol de désoxyribonucléosides triphosphates totaux dans de l'ADN précipitable en milieu acide en 30 minutes à +75 °C dans les conditions d'essai indiquées dans la section concernant l'analyse de l'unité.

Unité du test : 1 μg d'ADN M13mp9ss, 0,3 μg d'amorce de séquençage M13 et 0,1 μCi de [α--^32P] dCTP sont incubés avec différentes quantités d'unités d'ADN Taq polymérase FastStart dans 50 μl de tampon d'incubation à 65 °C pendant 60 min. La quantité des dNTP incorporés est déterminée.

Activité volumique : 5 U/μl

Stockage et stabilité

Conserver le récipient bien fermé dans un endroit sec et bien ventilé.

Autres remarques

Produit destiné uniquement à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Les protocoles à démarrage à chaud améliorent la spécificité, la sensibilité et le rendement de la PCR. Les groupes de blocage thermolabiles rendent l'enzyme inactive entre +15 et +25 °C. Aucune élongation n'a lieu lorsque les amorces se fixent de manière non spécifique. L'enzyme est activée par le retrait des groupes de blocage à +95 °C pendant 2 à 6 minutes. Il se forme des produits de PCR avec des extrémités 3′ sortantes A, idéales pour le clonage TA. Pour éviter les contaminations croisées en PCR, utilisez le mélange de nucléotides pour PCR Nucleotide Mix^PLUS et l'uracile-ADN glycosylase thermolabile.

Informations légales

AVIS À L'ACHETEUR : LICENCE LIMITÉE<br />L'utilisation de ce produit est protégée par le brevet américain n° 6 127 155 et les revendications des brevets correspondants en dehors des États-Unis.  L'achat de ce produit inclut une immunité limitée et non transférable contre les poursuites dans le cadre des revendications des brevets susmentionnés pour l'utilisation de cette seule quantité de produit pour les propres recherches internes de l'acheteur.  Aucun droit en vertu d'une autre revendication de brevet et aucun droit d'assurer des services commerciaux de quelque nature que ce soit, notamment, mais sans caractère limitatif, la communication des résultats des activités de l'acheteur contre rémunération ou une autre considération commerciale, n'est transmis expressément, implicitement ou par préclusion.  Ce produit est réservé à la recherche. Les utilisations diagnostiques humaines et vétérinaires protégées par des revendications de brevets appartenant à Roche nécessitent l'octroi d'une autre licence par Roche.  Toutes les utilisations autres que la recherche interne et les utilisations diagnostiques humaines et vétérinaires protégées par des revendications de brevets appartenant à Roche nécessitent l'octroi d'une autre licence par Thermo Fisher Scientific. Pour de plus amples informations sur l'achat de licences auprès de Roche, contactez le Licensing Department de Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, États-Unis ou de Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Allemagne.  Pour de plus amples informations sur l'achat de licences auprès de Thermo Fisher Scientific, contactez le Licensing Department de Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, États-Unis.</ br>AVIS À L'ACHETEUR : LICENCE LIMITÉE<br />L'utilisation de ce produit est protégée par les brevets américains n° 5 677 152 et 5 773 258 ainsi que les revendications des brevets correspondants en dehors des États-Unis.  L'achat de ce produit inclut une immunité limitée et non transférable contre les poursuites dans le cadre des revendications des brevets susmentionnés pour l'utilisation de cette seule quantité de produit pour les propres recherches internes de l'acheteur.  Aucun droit en vertu d'une autre revendication de brevet et aucun droit d'assurer des services commerciaux de quelque nature que ce soit, notamment, mais sans caractère limitatif, la communication des résultats des activités de l'acheteur contre rémunération ou une autre considération commerciale, n'est transmis expressément, implicitement ou par préclusion.  Ce produit est réservé à la recherche.  Les utilisations diagnostiques humaines et vétérinaires protégées par des revendications de brevets appartenant à Roche nécessitent l'octroi d'une autre licence par Roche.  Toutes les utilisations autres que la recherche interne et les utilisations diagnostiques humaines et vétérinaires protégées par des revendications de brevets appartenant à Roche nécessitent l'octroi d'une autre licence par Thermo Fisher Scientific. Pour de plus amples informations sur l'achat de licences auprès de Roche, contactez le Licensing Department de Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, États-Unis ou de Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Allemagne.  Pour de plus amples informations sur l'achat de licences auprès de Thermo Fisher Scientific, contactez le Licensing Department de Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, États-Unis.

FastStart is a trademark of Roche

Composants de kit seuls

• FastStart Taq DNA Polymerase, in storage and dilution buffer 5 U/μl
• PCR Reaction Buffer, with 20 mM MgCl₂ 10x concentrated
• PCR Reaction Buffer, without MgCl₂ 10x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution 25 mM
• GC-RICH Solution 5x concentrated
• PCR Nucleotide Mix

Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 1
• Point d'éclair (°F): does not flash
• Point d'éclair (°C): does not flash