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SCT152

Sigma-Aldrich

Test double luciférase de luciole/Renilla

Flash-type dual luciferase assay that allows measurement of both Firefly and Renilla luciferase activity in the same sample with high sensitivity and linearity.

Synonyme(s) :

Firefly Luciferase Assay, Dual Luciferase Assay, Bioluminescent Assay

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About This Item

Code UNSPSC :
12352207
Nomenclature NACRES :
NA.54

Technique(s)

cell based assay: suitable

Méthode de détection

chemiluminescent

Conditions d'expédition

ambient

Description générale

La luciférase de luciole est largement utilisée comme rapporteur pour l'étude de la régulation et de la fonction des gènes, ainsi que pour le criblage pharmaceutique. Il s'agit d'un rapporteur génétique très sensible en raison de l'absence d'activité endogène de la luciférase dans les cellules ou les tissus de mammifères. La luciférase de Renilla a été utilisée comme gène rapporteur pour étudier la régulation et la fonction des gènes in vitro et in vivo. Elle est communément utilisée dans les tests multiplex de rapporteurs transcriptionnels ou comme contrôle de transfection normalisant pour les tests à la luciférase de luciole.

Le test double à la luciférase de luciole et de Renilla permet de mesurer l'activité des luciférases de luciole et de Renilla dans le même échantillon avec une sensibilité et une linéarité élevées. L'activité de la luciférase de luciole est d'abord mesurée, puis le tampon pour test à la luciférase de Renilla 2.0 est ajouté pour simultanément inhiber l'activité de la luciférase de luciole et mesurer l'activité de la luciférase de Renilla. Le tampon pour test à la luciférase de Renilla 2.0 inhibe l'activité de la luciférase de luciole au niveau des cellules non transfectées, ce qui permet la mesure séquentielle de l'activité de la luciférase de luciole et de la luciférase de Renilla dans le même échantillon. Il s'agit d'un test de type flash qui exige que la luminescence soit mesurée immédiatement après l'ajout des réactifs de détection à l'échantillon de luciférase. Le signal de luciole disparaît au bout d'environ 12 minutes, tandis que le signal de Renilla disparaît au bout d'environ 2 minutes, bien que cela puisse varier en fonction des taux d'enzymes.

Application

Domaine de recherche
Signalisation cellulaire
Sous-domaine de recherche
Colorant pour cellules vivantes
Test double à la luciférase de type flash qui permet de mesurer l'activité des luciférases de luciole et de Renilla dans le même échantillon avec une sensibilité et une linéarité élevées.
Test à la luciférase de luciole

Composants

1) tampon de lyse pour luciférase passive 2.0 1× (réf. CS224514) : 15 ml

2) Tampon pour test à la luciférase de luciole 2.0 (réf. CS224591) : 15 ml

3) D-Luciférine (CS224551) : 3 × 1 mg

4) Tampon pour test à la luciférase de Renilla 2.0 (réf. CS224580) : 15 ml

5) Coelentérazine aquaphile (réf. CS224581) : 3 × 200 µg

Forme physique

Liquide

Stockage et stabilité

Conserver le test double à la luciférase de luciole et de Renilla à -80 °C. Les tampons pour test à la luciférase de luciole et de Renilla sont stables à -80 °C pendant au moins six mois à compter de la date de réception. Les autres composants sont stables à une température inférieure ou égale à -20 °C pendant au moins six mois à compter de la date de réception. Les composants du kit et les solutions mères de D-luciférine et de coelentérazine aquaphile dans de l'eau sont stables pendant au moins 5 cycles de congélation-décongélation.

Clause de non-responsabilité

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Code de la classe de stockage

10 - Combustible liquids


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