Description générale
La protéine ubiquitine ligase E3 RNF43 (UniProt Q68DV7 ; également appelée protéine à doigt RING 43) est codée par le gène RNF43 (identifiant du gène : 54894) chez l'être humain. RNF43 et son homologue ZNRF3 sont des ubiquitines ligases E3 transmembranaires à la surface des cellules qui sont régulées à la hausse par signalisation Wnt/-caténine et agissent comme de puissants régulateurs de rétroaction négative de la voie de signalisation Wnt conduisant à l'ubiquitination des protéines Frizzled (FZD) et LRP6 pour dégradation lysosomale. L'activité de RNF43/ZNRF3 est contrecarrée par le facteur de croissance de cellules souches R-spondine qui induit l'élimination de ZNRF3/RNF43 de la membrane en liant ZNRF3/RNF43 et LGR4/LGR5. L'interaction physique avec les cellules Dishevelled (DVL) est essentielle pour l'activité inhibitrice Wnt ZNRF3/RNF43 et l'inactivation des cellules DVL augmente considérablement les niveaux de FZD et LRP6 à la surface des cellules. De plus, la protéine RNF43 réprime la signalisation Wnt canonique et non canonique par le biais de mécanismes distincts. Tandis que l'interaction entre le domaine extracellulaire associé à la protéase (PA) et le domaine riche en cystéine (CRD) des protéines FZD et le domaine intracellulaire en doigt RING de la protéine RNF43 est nécessaire à l'inhibition de la signalisation Wnt/-caténine canonique, l'interaction entre le domaine PDZ des protéines FZD et la région cytoplasmique C-terminale de la protéine RNF43 est essentielle pour réprimer la signalisation Wnt non canonique. La surexpression de la R-spondine par la translocation et la mutation des gènes RNF43/ZNRF3 avec perte de fonction se révèlent dans les cancers humains comme moyens d'échapper à la rétro-régulation négative de la signalisation Wnt. La protéine RNF43 humaine est produite avec une séquence peptidique de signal (a.a. 1-23), qui est supprimée au stade post-traductionnel pour produire l'enzyme mature avec un domaine extracellulaire N-terminal (a.a. 24-197), un domaine transmembranaire (a.a. 198-218) et une grande région cytoplasmique (a.a. 219-783) contenant un doigt de zinc RING atypique (a.a. 272-313) et une région riche en proline (a.a. 569-760).
Spécificité
L'épitope du clone 11C3.1 se trouve dans la région cytoplasmique riche en proline présente dans les quatre isoformes épissées de la protéine RNF43 humaine répertoriées par UniProt (Q68DV7).
Immunogène
Fragment de protéine RNF43 recombinante humaine avec étiquette GST issue de la région cytoplasmique riche en proline.
Application
Domaine de recherche
Apoptose et cancer
Détecter la protéine RNF43 à l'aide de cet anticorps polyclonal de souris anti-RNF43, clone 11C3.1 (réf. MABC606), dont l'utilisation a été validée en western blotting.
Qualité
Produit évalué par western blotting sur des lysats de cellules HCT116.
Analyse par western blotting : une concentration de 1 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter la protéine RNF43 dans 10 µg de lysat de cellules HCT116 de carcinome colorectal humain.
Description de la cible
Poids réel (observé) : env. 95 kDa. La taille de la bande cible apparaît plus large que les poids moléculaires calculés de 83,20/85,72 kDa (isoforme 1 mature/proforme), 78,71/81,23 kDa (isoforme 2 mature/proforme), 72,11 kDa (isoforme 3) 92,52/95,04 kDa (isoforme 4 mature/proforme) en raison de la glycosylation. Des bandes non caractérisées peuvent être observées avec certains lysats.
Forme physique
Format : Produit purifié
IgG2b de souris purifiée, dans un tampon à base de Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4) et de NaCl 150 mM contenant 0,05 % d'azoture de sodium.
Produit purifié sur protéine G.
Stockage et stabilité
Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.
Autres remarques
Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.
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