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SCM133

Sigma-Aldrich

Solución PluriSTEM® Dispasa-II

Dispase-II has proven to be a rapid and effective, yet gentle, agent for separating many tissues and cells grown in vitro.

Sinónimos:

Dispase, Dispase 2

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About This Item

Código UNSPSC:
12352204
eCl@ss:
32160801
NACRES:
NA.75
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Nivel de calidad

Formulario

liquid

fabricante / nombre comercial

PluriSTEM®

concentración

1 mg/mL in sterile DMEM/F-12

técnicas

cell culture | mammalian: suitable
cell culture | stem cell: suitable

Condiciones de envío

dry ice

Descripción general

Suelen utilizarse enzimas proteolíticas como la tripsina, la colagenasa y la pronasa para dispersar tejidos y células. Estas enzimas, sin embargo, a menudo dañan las células, son inestables durante la incubación, pueden ser heterogéneas y también una fuente de contaminación por micoplasmas. La dispasa-II se utiliza para la preparación de células procedentes de una amplia variedad de tejidos y órganos diferentes. Se ha demostrado que la dispasa-II es un agente rápido y eficaz, aunque suave, para separar muchos tejidos y células cultivadas in vitro. La dispasa es especialmente adecuada para procedimientos de desagregación y subcultivo de tejidos, ya que no daña las membranas celulares.

La Dispasa-II PluriSTEM ha sido validada para trabajar junto con el medio PluriSTEM Human ES/iPS (SCM130) para el cultivo y el pase de células madre embrionarias y pluripotentes inducidas humanas.

La enzima Dispasa-II se produce en Bacillus polymyxa.

Aplicación

Categoría de investigación
Investigación en células madre
El usuario final debe determinar la técnica de paso óptima, que varía según el tipo de célula y las condiciones de cultivo.

1. Cubra las placas de 6 pocillos con 1:20 de revestimiento Matrigel (1,5 ml por pocillo). Incube a 2-8ºC durante la noche o recubra a RT durante al menos 30 minutos a 1 hora antes de usarlo.
2. Retire el revestimiento matrigel. Añada 2 ml de medio completo por pocillo.
3. Elimine las áreas de diferenciación dentro del cultivo.
4. Aspire los medios.
5. Lave una vez con 2 ml de PBS.
6. Añada 1,5 ml de dispasa II por pocillo. Incube a 37ºC durante 7 minutos.
7. Lave dos veces con 2 ml de PBS, sin Mg ni Ca.
8. Añada 2 ml de medio completo a cada pocillo y utilice un raspador celular para separar las colonias.
9. Recoja las células raspadas en un tubo cónico de 15 ml.
10. Centrifugue a 800 rpm durante 5 minutos
11. Vuelva a suspender en el volumen adecuado de medio completo. La relación de separación típica es de 1:5 – 1:6 dependiendo de la densidad celular. Las células deben estar listas para el pase en 5-6 días utilizando el medio PluriSTEM Human ES/iPS.
Subcategoría de investigación
Enzimas y bioquímica

Calidad

La disolución es roja y no hay partículas presentes. La disolución es estéril y adecuada para aplicaciones de cultivo celular.

Forma física

El producto se presenta en DMEMF12 estéril a 1 mg/ml. El producto se filtra a través de un filtro de 0,2 micras antes de congelar.
El producto se presenta en DMEMF12 estéril a 1 mg/ml. El producto se filtra a través de un filtro de 0,2 micras antes de congelarlo.
La enzima Dispasa-II se produce en Bacillus polymyxa.

Almacenamiento y estabilidad

Conservar a -20°C durante un máximo de 4 meses desde de la fecha de recepción. Una vez descongelada, distribuya en alícuotas de volumen de trabajo más pequeño y almacene a -20ºC. Evite varios ciclos de congelación y descongelación para mantener una actividad enzimática adecuada.

Información legal

PLURISTEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Cláusula de descargo de responsabilidad

Salvo que se indique lo contrario en nuestro catálogo o en otra documentación de la empresa que acompañe al producto, nuestros productos están indicados sólo para investigación y no deben utilizarse para ningún otro propósito, como, entre otros, usos comerciales no autorizados, diagnóstico in vitro, usos terapéuticos ex vivo o in vivo o cualquier tipo de consumo o aplicación en humanos o animales.

Código de clase de almacenamiento

10 - Combustible liquids

Clase de riesgo para el agua (WGK)

WGK 1

Punto de inflamabilidad (°F)

Not applicable

Punto de inflamabilidad (°C)

Not applicable


Certificados de análisis (COA)

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Protocolos

Stem cell reprogramming protocols to generate human induced pluripotent stem cells (iPSCs) including viral and non-viral RNA based methods.

Questions

1–3 of 3 Questions  
  1. What is the activity of this enzime?

    1 answer
    1. This product is a 1 mg/mL solution. The enzymatic activity of each component is as follows:
      Dispase Activity: 1.0 units per milligram
      Collagenase Activity: ≥12,500 units per vial
      Caseinase Activity: ≥2000 caseinase units/mg
      Clostripain Activity: ≤5.0 clostripain units/mg
      Tryptic Activity: ≤0.5 tryptic units/mg

      Helpful?

  2. What is the activity of the dispase product SCM133, and is there a specific range it should fall within in units/mL?

    1 answer
    1. The activity of the material is 1.0 unit per milligram (u/mg).

      Helpful?

  3. Please let me know U/ml of this (https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/product/mm/scm133) solution. Thank you

    1 answer
    1. This product is a 1 mg/mL solution of Dispase II. The enzyme activity is lot specific, however the activity will be ?0.8 U/mg. This activity is established using casein as a substrate at 37°C and pH 7.5. Please see the link below to review the product data sheet:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/727/543/scm133.pdf

      Helpful?

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