T7168

Tripsina from porcine pancreas

tablet, 1 mg tablet

• Número de CAS: 9002-07-7
• Comisión internacional de enzimas: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• MDL number: MFCD00082094
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Propiedades

• biological source: Porcine pancreas
• form: tablet
• specific activity: 90-110% (compared to standard)
• mol wt: 23.8 kDa
• storage temp.: −20°C

Descripción

General description

Trypsin consists of a single chain polypeptide of 223 amino acid residues, produced by the removal of the N-terminal hexapeptide from trypsinogen which is cleaved at the Lys - lle peptide bond. The sequence of amino acids is cross-linked by 6 disulfide bridges. This is the native form of trypsin, beta-trypsin. BETA-trypsin can be autolyzed, cleaving at the Lys - Ser residue, to produce alpha-trypsin. Trypsin is a member of the serine protease family.

Application

Para la digestión de los péptidos con tripsina, utilice una proporción de aproximadamente 1:100 a 1:20 de tripsina:péptido. La utilización habitual de este producto es la separación de las células adherentes de una superficie de cultivo. La concentración necesaria de tripsina para separar las células de su sustrato depende fundamentalmente del tipo de célula y de la edad del cultivo. También se han utilizado tripsinas para la re-suspensión de células durante el cultivo celular, en investigación en proteómica para la digestión de proteínas y en varias digestiones en gel†. Otras aplicaciones son la evaluación de la cristalización mediante técnicas de membrana y en un estudio para determinar que las tasas de plegado y los rendimientos de las proteínas pueden limitarse por la presencia de trampas cinéticas.

For use in immunohistochemical procedures to enhance staining and to unmask antigens after routine fixation and processing.

Biochem/physiol Actions

La tripsina rompe los péptidos por el lado C-terminal de los restos de lisina y de arginina. La velocidad de hidrólisis de esta reacción se reduce si a cada lado del punto de rotura hay un residuo ácido, y la hidrólisis se interrumpe si en el lado carboxilo del sitio de ruptura hay un resto de prolina. El pH óptimo de actividad de la tripsina es 7-9. La tripsina también puede actuar rompiendo las uniones éster y amida de los derivados sintéticos de aminoácidos. Se añade EDTA a las disoluciones de tripsina como agente quelante que neutraliza los iones de calcio y de magnesio, los cuales ocultan los enlaces peptídicos sobre los que actúa la tripsina. La eliminación de esos iones aumenta la actividad enzimática.

Los inhibidores de las proteasas de serina, como DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF y la aprotinina, entre otros, inhibirán la tripsina.

Caution

Solutions in 1 mM HCl are stable for 1 year in aliquots and stored at -20°C. The presence of Ca²⁺ will also diminish the self-autolysis of trypsin and maintain its stability in solution. Trypsin will also retain most of its activity in 2.0 M urea, 2.0 M guanidine HCl, or 0.1% (w/v) SDS.

Unit Definition

Una unidad BAEE producirá una ΔA₂₅₃ de 0,001 por min a pH 7,6 y 25°C utilizando BAEE como sustrato. Una unidad BTEE = 320 unidades ATEE. Volumen de reacción = 3,2 ml (trayectoria de la luz 1 cm).

Preparation Note

This product is a lyophilized powder soluble in Hank′s Balanced Salt Solution at 25 mg/mL.
For applications that require EDTA, solubilizing trypsin should be done with a buffered salt solution contaiing no Ca²⁺ or Mg²⁺.

Información de seguridad

• pictograms: GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H334
• pcodes: P261 - P284 - P304 + P340 + P312 - P501
• Hazard Classifications: Resp. Sens. 1
• Storage Class: 11 - Combustible Solids
• wgk_germany: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves