CSTVRS
shRNA MISSION®
Custom Lentiviral Particles
About This Item
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form
liquid
technique(s)
capture ELISA: 106 VP/mL using p24
shipped in
dry ice
storage temp.
−70°C
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General description
Clonación personalizada - Ahora con TurboGFP™
Puede haber ocasiones en las que seleccionar fármacos clásicos para líneas celulares estables o semiestables no es ni posible ni deseable. Además, pueden requerirse métodos ortogonales de selección de la puromicina para la expresión de shRNA múltiples o la expresión de shRNA concomitante con expresión transgénica
Ahora ofrecemos vectores que contienen tGFP como una solución a estos problemas. Este vector conserva todos los demás elementos del vector pLKO.1, pero el gen de resistencia a la puromicina ha sido sustituido por TurboGFP. Nuestro equipo de bioproducción MISSION personalizará el vector con una secuencia shRNA del TRC o con la secuencia de shRNA que usted prefiera. Con TurboGFP en el vector, las técnicas de análisis mediante citometría de flujo (FACS) y de microscopia de fluorescencia permiten una estimación rápida de la eficiencia de la transducción y una selección automática y rápida de las poblaciones celulares que expresen de forma estable el shRNA. La selección por GFP proporciona un método ortogonal cuando las células expresan ya de manera estable resistencia a la puromicina. Además, ofrecemos también pLKO.1-puro-CMV-tGFP. Con este vector, podrá elegir entre selección de GFP y de puromicina, todo con el vector de expresión de shRNA.
Para la selección por una segunda clase de antibióticos, ofrecemos vectores que contienen el gen de resistencia a la neomicina. Estos dos vectores son pLKO.1-hPGK-Neo y pLKO.1-CMV-Neo. Pueden encontrarse integrantes shRNA estables mediante selección en G418 (referencia A1720). Como ocurre con la puromicina, habrá que generar un perfil citotóxico para su línea celular concreta. Como ejemplo, vea el protocolo de la puromicina pero utilice G418 en vez de puromicina. Como punto de partida, se ha utilizado 1 mg/ml de G418 para la selección de constructos de shRNA en células A549.
El servicio consta de clonación, secuenciación, preparación del ADN (500 ng) y preparación de lentivirus (200 μl a 1 × 106 VP/ml, valor mínimo a través del ensayo p24). Las preparaciones vírica y de ADN estarán disponibles en 4-6 semanas desde el momento en el que se realice el pedido. Para hacer el pedido, visite nuestra página de servicios personalizados de shRNA o póngase en contacto con su representante de ventas.
Partículas lentivirales a gran escala y elevada concentración
Disponemos de una plataforma de fabricación versátil para la producción vírica de gran rendimiento o a gran escala de la mayoría de los vectores lentivirales basados en el VIH-1. El formato estándar de la colección de shRNA del TRC MISSION es de 200 μl de un valor mínimo de 1 × 106 VP/ml (a través del ensayo p24). Pueden producirse mayores volúmenes de cualquier clon, conjunto específico o control con la misma especificación de cantidad mínima o en cantidades superiores. Nuestra opción de mayor valor es 109 VP/ml. También nos adaptamos a la preparación vírica a gran escala y de valor elevado utilizando los clones que nos envíen ustedes (deben ser compatibles con nuestro sistema). Nuestros procesos robustos y optimizados le ahorrarán tiempo y reducirán la variabilidad en sus experimentos de transducción. Para conocer los precios o enviar una solicitud de presupuesto para su proyecto específico, utilice nuestro formulario de envío de solicitud MISSION personalizado.
Other Notes
Legal Information
Storage Class
12 - Non Combustible Liquids
wgk_germany
WGK 3
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Certificados de análisis (COA)
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MISSION shRNA reduce the expression of specific target genes by targeting the specific mRNA therefore reducing the corresponding protein expression.
RNAi Consortium (TRC): Collaborative effort among academic labs and biotech/pharma institutes advancing RNA interference research.
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