LIBDH-RO

Liberase^™ TM Calidad investigación

lyophilized, optimum pH 7.4, optimum reaction temp. 35-37 °C

• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.21

Propiedades

• biological source: enzyme from Bacillus polymyxa (Protease); enzyme from Clostridium histolyticum (collagenase)
• Quality Level: 100
• description: high Dispase concentration
• form: lyophilized
• packaging: pkg of 10 mg (05401054001 [2 x 5 mg]); pkg of 100 mg (05401089001 [2 x 50 mg])
• manufacturer/tradename: Roche
• parameter: 35-37 °C optimum reaction temp.
• technique(s): activity assay: suitable
• color: white
• optimum pH: 7.4
• solubility: water: soluble
• application(s): life science and biopharma
• foreign activity: Endotoxin 3 EU/mg
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −20°C

Descripción

General description

El método más utilizado para los procedimientos de descelularización, como la disociación tisular y la recolección celular, se basa en el uso de enzimas proteolíticas. Las proteasas alteran la matriz extracelular del tejido para permitir la liberación de células individuales o la recolección de células cultivadas para transferencia. El objetivo del aislamiento celular es maximizar el rendimiento de las células disociadas que son viables y funcionalmente activas.
La tecnología de enzima Liberase comprende métodos para purificar las isoformas de colagenasa clostridial a una alta actividad específica y para mezclarlas junto con proteasas neutras de gran actividad específica en proporciones óptimas para la disociación efectiva de tejidos primarios y células cultivadas. Liberase DH calidad experimental contiene colagenasa I y colagenasa II muy purificadas. Estas dos isoformas de la colagenasa están mezcladas en un proporción precisa entre ellas y con una concentración elevada de Dispase^®, una proteasa neutra no clostridial.
Las enzimas Liberase están diseñadas para aumentar la calidad y reproducibilidad de la disociación tisular y para mejorar la viabilidad y la funcionalidad de las células aisladas. Las mezclas enzimáticas purificadas de Liberase sustituyen a la colagenasa tradicional, que es un subproducto de la fermentación cruda y variable de Clostridium histolyticum.

Application

Liberase^™ DH (alta dispasa) calidad experimental se utiliza para la disociación de una amplia variedad de tipos de tejido, donde se requiere una gran pureza de la mezcla enzimática para un rendimiento y viabilidad celulares elevados. Los productos secundarios bacterianos, como las endotoxinas, también pueden reducirse hasta varios miles de veces.
Se ha utilizado para la digestión de fragmentos de tumor metastásico. Se ha utilizado para el desprendimiento enzimático de colonias de células madre embrionarias humanas.

Features and Benefits

• Maximice la viabilidad y el rendimiento de las células aisladas

con una mezcla enzimática que tiene menos actividad clostripaína y tripsina, así como un contenido reducido de endotoxinas.

• Cuente con una actividad específica superior de la mezcla enzimática

como consecuencia de una pureza colagenasa I + II superior (determinada por análisis HPLC).

• Obtenga una mayor reproducibilidad experimental

debido a una mayor uniformidad entre lotes.

Preparation Note

Estabilizadores: Calcio
Concentración de trabajo: Concentración de trabajo de la enzima de calidad para investigación Liberase

Las enzimas Liberase tienen actividades específicas significativamente superiores a las colagenasas tradicionales. Esto significa que la concentración de trabajo de las enzimas purificadas de calidad para investigación Liberase, expresada en mg/ml, será inferior a la de la colagenasa tradicional.

Cuando la aplicación se encuentre en la lista de aplicaciones de Roche en www.collagenase.com, utilice la concentración de Liberase calidad experimental recomendada para esa aplicación.

Cuando la aplicación no aparezca en esa lista, utilice primero Liberase TM calidad experimental a una concentración de 0,08-0,28 unidades Wünsch/ml.

El objetivo es determinar la mejor concentración de partida de las mezclas enzimáticas Liberase calidad experimental. Éste es un punto de partida, y la concentración final puede variar debido a diferencias en el procedimiento y a diferencias entre lotes de la colagenasa tradicional.

Concentración de trabajo de la colagenasa

Multiplique su concentración de trabajo de colagenasa anterior (mg/ml) por su actividad específica (unidades Wünsch/mg, [como se ha determinado antes]), para obtener las unidades Wünsch/ml. Para determinar cuánta mezcla enzimática Liberase de calidad experimental utilizar, multiplique primero su concentración de trabajo de la colagenasa (en unidades Wünsch/ml) por el volumen total de su disolución enzimática de trabajo para obtener la actividad colagenasa total necesaria (unidades Wünsch). Divida la actividad colagenasa total requerida por la concentración de reserva de Liberase calidad experimental («Reconstitución y almacenamiento»). Esto indica cuántos mililitros de la disolución madre de la mezcla enzimática Liberase calidad experimental utilizar en su disolución enzimática de trabajo.


Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): Conserve la disolución de reserva no utilizada en alícuotas de un solo uso entre -15 y -25 °C. Si desea más información sobre la estabilidad del producto, visite la página Web de Roche Liberase Enzyme en www.collagenase.com.

Nota: Evite la congelación y descongelación repetidas.

Reconstitution

Reconstituya la enzima liofilizada con agua estéril para inyectables o tampón de disociación tisular. No añada suero ni otros componentes, como albúmina o inhibidores de proteasas, al tampón de disociación. La estabilidad de la enzima se reduce a concentraciones superiores y temperaturas más cálidas (4 °C). Evite esas dos condiciones.

Reconstituya el vial entero. No pese alícuotas individuales del liofilizado. La introducción de humedad en el vial provoca una caída de la actividad enzimática.

Coloque el vial en hielo para rehidratar la enzima liofilizada.

Agite suavemente el vial a una temperatura entre 2 y 8 °C hasta que la enzima esté completamente disuelta (máx. 30 minutos).

Dependiendo del tipo de tampón de disociación tisular utilizado para disolver las mezclas de enzimas purificadas Liberase de calidad experimental, es posible observar ligeras precipitaciones que se disuelven fácilmente en la disolución de trabajo diluida, y no influyen en la actividad enzimática.

Retire una alícuota de la disolución de reserva para preparar la disolución de trabajo.


Volumen de reconstitución
2 ml (1 vial con tamaño de envase 5 mg - 10 mg)
10 ml (1 vial con tamaño de envase 50 mg - 100 mg)


Wünsch colagenasa (unidades/ml)
13 (1 vial con tamaño de envase 5 mg - 10 mg), 26 (1 vial con tamaño de envase 50 mg - 100 mg)


Concentración total de colagenasa [mg/ml]
2,5 (1 vial con tamaño de envase 5 mg - 10 mg), 5,0 (1 vial con tamaño de envase 50 mg - 100 mg)

Storage and Stability

Conservar en seco

Other Notes

• Este producto está indicado solo para investigación en ciencias de la vida y uso in vitro. Estos productos no deben utilizarse para aplicaciones diagnósticas ni clínicas, como el trasplante de islotes humanos.
• Todos los productos Liberase y Liberase Blendzyme de primera generación (Liberase HI, CI, RI, PI, Liberase Blendzyme 1, 2, 3, 4) han sido reemplazados por las mezclas enzimáticas de segunda generación Liberase grado experimental y Liberase grado GMP. Para instrucciones relativas a la transición desde las enzimas Liberase antes utilizadas

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos de diagnóstico.

Legal Information

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.

Liberase is a trademark of Roche

Información de seguridad

• pictograms: GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H315 - H319 - H334
• pcodes: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2
• Storage Class: 11 - Combustible Solids
• wgk_germany: WGK 1
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