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≥90% (SDS-PAGE)
form
lyophilized
specific activity
≥20000 units/mg protein
mol wt
27 kDa
packaging
pkg of 2 μg (11420488001), pkg of 3 × 2 μg (11054589001)
manufacturer/tradename
Roche
optimum pH
7.0-8.0
pH range
6.5-9.0
storage temp.
2-8°C
General description
El tipo natural de Pseudomonas fragi segrega una metaloproteasa que rompe los enlaces peptídicos N-terminales en los aminoácidos hidrófilos pequeños. Mutante de esta cepa produce la endoproteinasa Asp-N de calidad para la secuenciación, que se aísla como una proteasa muy purificada y específica.
Application
Biochem/physiol Actions
La endoproteinasa Asp-N calidad de secuenciación es una metaloproteasa. Disoluciones tampón de fosfato, acetato o Tris a pH 6,0–8,5, hidroliza de manera específica los enlaces peptídicos N-terminales de los ácidos aspártico y cisteico. Si la cisteína está reducida o alcalinizada, sólo se hidroliza -↓-Asp-X.
La especificidad de la endoproteinasa Asp-N calidad de secuenciación se verifica con el glucagón como sustrato. Se incuban concentraciones elevadas de endoproteinasa Asp-N de calidad de secuenciación (una parte en peso de encima con 10 partes en peso de glucagón) para detectar trazas de impurezas como proteasas contaminantes.
Inactivación por calor: La proteasa se detiene mediante ebullición durante 5 minutos.
La especificidad de la endoproteinasa Asp-N calidad de secuenciación se verifica con el glucagón como sustrato. Se incuban concentraciones elevadas de endoproteinasa Asp-N de calidad de secuenciación (una parte en peso de encima con 10 partes en peso de glucagón) para detectar trazas de impurezas como proteasas contaminantes.
Inactivación por calor: La proteasa se detiene mediante ebullición durante 5 minutos.
Preparation Note
Concentración de trabajo: 2 μg /50 μl de agua bidestilada
Un vial (= 2 μg de encima) se disuelve en 50 μl de agua bidestilada, produciendo una concentración amortiguadora de Tris-HCl 10 mM pH 7,5.
disolución de trabajo: El disolvente recomendado es el agua bidestilada.
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): de -15 a -25 °C
Una disolución en agua bidestilada es estable durante1 semana como máximo entre 2 y 8 °C, y en torno a 1 mes entre -15 y -25 °C; deben evitarse los descongelamientos repetidos.
Un vial (= 2 μg de encima) se disuelve en 50 μl de agua bidestilada, produciendo una concentración amortiguadora de Tris-HCl 10 mM pH 7,5.
disolución de trabajo: El disolvente recomendado es el agua bidestilada.
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): de -15 a -25 °C
Una disolución en agua bidestilada es estable durante1 semana como máximo entre 2 y 8 °C, y en torno a 1 mes entre -15 y -25 °C; deben evitarse los descongelamientos repetidos.
La endoproteinasa Asp-N grado secuenciación liofilizada se reconstituye en 50 μl de agua bidestilada. Esto produce una concentración amortiguadora de Tris-HCl 10 mM, pH 7,5. Para evitar la autólisis, la temperatura de incubación no debe superar los 37 °C.
Other Notes
Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.
Clase de almacenamiento
11 - Combustible Solids
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
wgk
WGK 3
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