Saltar al contenido
Merck
Todas las fotos(1)

Key Documents

ABN249

Sigma-Aldrich

Anticuerpo anti-aductos HNE Michael reducidos

serum, from rabbit

Sinónimos:

Reduced 4-hydroxy-trans-2-nonenal Michael adducts, Reduced HNE Michael adducts

Iniciar sesiónpara Ver la Fijación de precios por contrato y de la organización


About This Item

UNSPSC Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

biological source

rabbit

Quality Level

antibody form

serum

antibody product type

primary antibodies

clone

polyclonal

species reactivity

bovine, human

technique(s)

western blot: suitable

shipped in

ambient

target post-translational modification

unmodified

General description

Los aldehídos reactivos generados durante la peroxidación lipídica contribuyen al daño celular y tisular asociado con el estrés oxidativo. Los compuestos carbonilo alfa, beta-insaturados como el 4-hidroxi-2-nonenal (HNE), el 4-oxo-2-nonenal (ONE) y la acroleína, generados por la oxidación de los ácidos grasos poliinsaturados (PUFA), interactúan fácilmente con los grupos nucleófilos de las proteínas, lo que induce la reticulación intramolecular o intermolecular de las proteínas. Existen dos tipos de modificaciones del HNE, el primer tipo se forma por la reacción de un aducto de Michael 1:1 con lisina amina, histina imidazol o sulfhidrilo de cisteína, mientras que el segundo tipo es producido por un HNE que reacciona simultáneamente con dos grupos amina libres de dos N-alfa-acetilisinas (NALS), el llamado aducto Michael-base de Schiff. En este último caso, el aducto inicial no fluorescente 2:1 lisina-HNE Michael base de Schiff se somete luego a una ciclación oxidativa para formar un derivado fluorescente 2-hidroxi-3-imino-1,2-dihidropirrol comúnmente conocido como fluoróforo HNE. El aducto de HNE-Lys Michael formado de manera reversible no es estable, y suele emplearse la reducción por borohidruro sódico (NaBH4) para preservar la modificación Lys HNE en las muestras proteicas. La estabilización reductiva por tratamiento con NaBH4 se utiliza también para prevenir la pérdida del 4-HNE del aducto de 4-HNE-Cys Michael por reacción retro-Michael de adición (RMA) durante la disociación inducida por colisión (CID) y la disociación por transferencia de electrones (ETD) MS/MS.

Specificity

Este antisuero policlonal detectó BSA modificado por HNE solo después, pero no antes, de la reducción por borohidruro de sodio.
La modificación de la diana no es específica de especie.

Immunogen

KLH modificado por HNE químicamente reducido por borohidruro de sodio.

Application

El anticuerpo anti-aductos HNE Michael reducidos, Nº de ref. ABN249, es un anticuerpo policlonal de conejo muy específico que se dirige a la forma reducida de los aductos 4-hidroxi-2-noneal Michael y se ha probado en Western Blotting.
Notas de aplicación:
1. ABN249 sustituye a Calbiochem 393207. Se espera que el ABN249 funcione en inmunocitoquímica e inmunohistoquímica. Consulte las siguientes citas 393207como ejemplos de preparaciones de muestras y detección en estos dos tipos de aplicaciones:

Usatyuk, P.V., et al. (2006). J. Biol. Chem. 281(46):35554-35566 (Inmunocitoquímica).
McCormack, A.L., et al. (2005). J. Neurochem. 93( 4): 1030- 1037 (inmunohistoquímica).

2. También se dispone de un anti-HNE fluoróforo, Nº de ref. 393206, para la detección del HNE fluoróforo por ELISA, inmunohistoquímica e inmunoelectrotransferencia.

3. Para generar un control positivo para inmunoelectrotransferencia (western blot) hay que tratar una disolución de 2 mg/ml de BSA en KH2PO4 10 mM, pH 7,4, con HNE 0,1 a 0,5 mM e incubar durante 1 h a 37°C. La reacción puede controlarse por la disminución de la absorbancia de HNE a 224 nm (coeficiente de extinción 13,750/M). El HNE libre puede eliminarse por filtración en gel y diálisis después de la reacción química.

Los aductos HNE Michael formados en las disoluciones proteicas deben reducirse químicamente con borohidruro de sodio (NaBH4) antes del análisis utilizando ABN1348. Se añade una disolución de NaBH4 100 mM recién preparada en NaOH 1 mM 1:9 (V:V) a la disolución de muestra proteica hasta una concentración final de NaBH4 10 mM. La disolución proteica se mantiene a temperatura ambiente durante 10 a 30 minutos antes del enfriamiento con la adición de 5 a 10 equivalentes molares de acetona.

Quality

Evaluada mediante inmunotransferencia Western en HNE-BSA reducido.

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (western blot): una dilución 1:10 000 de este anticuerpo detectó 10 ng de BSA modificado con HNE solo después, pero no antes, de la reducción por borohidruro de sodio.

Target description

Variable, dependiendo de los tamaños de las proteínas HNE-modificadas. En algunos lisados pueden observarse bandas no caracterizadas.

Linkage

Sustituye a: Calbiochem 393207

Analysis Note

Control
BSA modificado por HNE químicamente reducido por borohidruro de sodio.

Other Notes

Concentración: Consulte la ficha técnica específica del lote.

¿No encuentra el producto adecuado?  

Pruebe nuestro Herramienta de selección de productos.

Storage Class

12 - Non Combustible Liquids

wgk_germany

WGK 1

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable


Certificados de análisis (COA)

Busque Certificados de análisis (COA) introduciendo el número de lote del producto. Los números de lote se encuentran en la etiqueta del producto después de las palabras «Lot» o «Batch»

¿Ya tiene este producto?

Encuentre la documentación para los productos que ha comprado recientemente en la Biblioteca de documentos.

Visite la Librería de documentos

Bipradas Roy et al.
Toxics, 10(6) (2022-06-24)
Exposure to environmental pollutants, including dioxin-like polychlorinated biphenyls (PCBs), play an important role in vascular inflammation and cardiometabolic diseases (CMDs) by inducing oxidative stress. Earlier, we demonstrated that oxidative stress-mediated lipid peroxidation derived 4-hydroxy-2-nonenal (4HNE) contributes to CMDs by decreasing
Xinzhu Wang et al.
Scientific reports, 9(1), 16238-16238 (2019-11-09)
Protein interactions of Tau are of interest in efforts to decipher pathogenesis in Alzheimer's disease, a subset of frontotemporal dementias, and other tauopathies. We CRISPR-Cas9 edited two human cell lines to generate broadly adaptable models for neurodegeneration research. We applied
Yunxia O'Malley et al.
Advances in redox research : an official journal of the Society for Redox Biology and Medicine and the Society for Free Radical Research-Europe, 5 (2022-07-30)
Cystic fibrosis-related diabetes (CFRD) is one the most common comorbidities in cystic fibrosis (CF). Pancreatic oxidative stress has been postulated in the pathogenesis of CFRD, but no studies have been done to show an association. The main obstacle is the

Nuestro equipo de científicos tiene experiencia en todas las áreas de investigación: Ciencias de la vida, Ciencia de los materiales, Síntesis química, Cromatografía, Analítica y muchas otras.

Póngase en contacto con el Servicio técnico