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分子信标

分子信标是一种寡核苷酸探针（30-50 个碱基的短单链核酸序列），用于分子生物学和遗传学研究。它们设计为侧接间接重复序列的独特序列，从而形成茎环结构，使 5' 和 3' 末端保持接近。分子信标探针与靶标杂交后会发出荧光。这些结构化探针具有高度敏感性和序列特异性，用于qPCR和体外研究中的序列检测。

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分子信标的结构和功能

分子信标是一种单链双标记荧光探针，通过探针两端的互补干细胞序列（约 4～6nt）保持发夹环构象（20～25nt最常见）。探针的 5’ 端和 3’ 端分别含有一个报告分子和一个淬灭分子。环是与靶序列互补的单链 DNA 序列。报告分子（荧光团或荧光染料）和淬灭分子的接近，导致报告分子的天然荧光发射因周围的能量转移而被淬灭。分子信标的结构和机制如下所示（图1）。

分子信标的设计和功能

  • 分子信标探针设计有四个基本部分：环、茎、淬灭分子和报告分子。
  • 分子信标的茎和环区域形成稳定的发夹结构，使荧光团和淬灭分子非常接近。这种紧密的接近导致淬灭分子吸收荧光团发射的荧光，从而有效地抑制信号。
  • 当分子信标遇到互补的靶序列时，导致发夹环结构打开并将5' 端报告分子与 3' 端淬灭分子分开。由于淬灭分子不再靠近报告分子，报道分子的荧光不再被淬灭，荧光发射发生。 
  • 荧光信号的强度与样品中的靶核酸量成正比。
  • 在实时 PCR 中，如果在扩增之前添加分子信标，会破坏茎中的碱基配对。这使得探针在变性时与互补靶标杂交，从而分离报告分子和淬灭分子，诱发报告分子染料发出荧光。
未结合信标和淬灭荧光的结合信标

图 1.分子信标工作原理

使用分子信标的优势

  • 提高特异性和灵敏度
  • 实时检测能力
  • 非常适合单核苷酸多态性 (SNP) 分析

将锁核酸加入信标探针

  • 增加热稳定性和杂交特异性
  • 在SNP检测、等位基因鉴别和体外定量或检测方面具有更高的准确性
  • 针对有问题的靶序列设计更简单灵敏的探针

产品特性

  • 规格：1、3、5和10 OD
  • 纯化方法：HPLC
  • 序列长度：15 – 40 bp
  • 质量控制：100%质谱分析
  • 形式：干粉，棕色管包装
  • 可选的自定义形式（标准化、专用板等）

我们可根据具体应用提供相应形式的探针，以简化您的实验计划。

分子信标应用

  • SNP检测
  • 等位基因鉴别
  • 病原体检测
  • 多重测定（Multiplexing）
  • 病毒含量定量
  • 基因表达分析
  • 基因拷贝测定
  • 终点基因分型
  • 体外定量或检测

保证产量

保证
OD 产量		近似 nmol近似 µg大约的
反应数
1332600
39961,800
5151603,000
10303206,000

*估计值基于1OD 3nmol或 32μg和25μl反应200nM（5.0 pmol/反应）。估计值基于30个碱基的平均序列长度。

下面列出了最常见的荧光团和淬灭分子组合：

光谱性质表

染料最大
EX（nm）		最大
EM（nm）		相容的
淬灭剂
6-FAM™495520BHQ™-1, DABCYL
JOE™529555BHQ™-1, DABCYL
TET™521536BHQ™-1, DABCYL
HEX™535556BHQ™-1, DABCYL
Cyanine 3549566BHQ™-2, DABCYL
ROX™586610BHQ™-2, DABCYL
TxRd (Sulforhodamine 101-X)597616BHQ™-2, DABCYL
Cyanine 5646669BHQ™-3, DABCYL
Cyanine 5.5675694BHQ™-3, DABCYL

发货计划

含量(OD)13510
标准染料分子信标5 天5 天5 天5 天
带标准染料的锁核酸分子信标7 天7 天7 天7 天
带后合成染料的分子信标，带有/不带锁核酸
7-10 天7-10 天7-10 天7-10 天

*由于国际过境、通关延误等原因，交货时间可能较长。大型项目将根据客户的项目需要安排在交货时间表中。

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