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生物源
mouse
抗體表格
purified immunoglobulin
抗體產品種類
primary antibodies
無性繁殖
SG2-D1a, monoclonal
物種活性
mouse, sheep, rat
應無反應活性
pig, rabbit, human, bovine, canine
製造商/商標名
Chemicon®
技術
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable
同型
IgG2b
NCBI登錄號
UniProt登錄號
運輸包裝
wet ice
目標翻譯後修改
unmodified
基因資訊
human ... DRD1(1812)
特異性
多巴胺受体D1A,与D1B(D5)受体无交叉反应。发现免疫反应性对小鼠和大鼠D1A受体具有特异性。 通过蛋白质印迹分析,人、猪、狗、兔、绵羊和牛样品是非反应性的。
免疫原
重组大鼠D1a受体,羧基端。
應用
抗多巴胺D1A受体抗体,克隆SG2-D1a可检测多巴胺D1A受体水平,&已发布&验证可用于IH & WB。
研究子类别
神经递质&受体
神经递质&受体
研究类别
神经科学
神经科学
蛋白质印迹:针对来自大鼠尾状组织的未煮沸膜组分为1:250-1:500。 在额叶和颞叶皮层中也可以看到反应性。观察到45-66kDa之间的识别条带(Luedtke,1999)。
免疫组织化学:4% PFA固定,玻璃纤维切片,用3% NGS、1% BSA和0.2% triton X-100封闭。一抗仅在PBS中用过量的封闭剂稀释。
最佳工作稀释度必须由最终用户进行确定。
建议的蛋白质印迹方案
溶液
10X转移缓冲液 1L
Tris 115.3 gm
甘氨酸 24.2 gm
[SDS 4 gm(可省略)]
用于1X工作溶液: 1L
混合700 mL水
200 mL MeOH
100 mL 10X转移TBST
储备液 1 L
1M Tris pH 7.5 10 mL
5 M NaC 30 mL
10%吐温-20 5 mL
1.根据需要运行SDS-PAGE凝胶。
2.将PVDF膜(Millipore的ImmobilonP)浸泡在100%甲醇中1-2分钟,以润湿膜。
3.将膜浸泡在转移缓冲液中(见下文),直至准备进行印迹转移(>15分钟)。
4.组装凝胶转移夹层,使印迹朝向正极。
5.对于小分子量蛋白质,在100伏下将蛋白质从凝胶转移到膜上1-2小时,对于高分子量蛋白质的完全转移,在65 mA下将蛋白质从凝胶转移到膜上16小时(过夜)。
6.用Chemicon BLOT-FastStain(目录号2076)染色转移的条带。
7.用去离子水脱色。
8.用5%脱脂牛奶(Marvel或Carnation)的TBS或PBS封闭,4°C下过夜。脱脂牛奶应新鲜溶解,10000rpm离心10min,经玻璃滤器(Gelman Acrodisc)过滤。
9.与第一抗体在4°C轻轻搅拌下孵育过夜。
需要由最终用户确定最佳工作稀释度和孵育时间。
10.用TBST清洗至少3 × 5分钟。从该阶段开始,应省略叠氮化物。
11.在室温下与二抗(HRP偶联的山羊抗小鼠抗体,例如Chemicon目录号AP124P,适当稀释)一起孵育1小时。
12.用TBST清洗至少3 × 5分钟。
13.使用市售试剂盒(femtoLUCENT,Chemicon目录号2078)进行ECL。
免疫组织化学:4% PFA固定,玻璃纤维切片,用3% NGS、1% BSA和0.2% triton X-100封闭。一抗仅在PBS中用过量的封闭剂稀释。
最佳工作稀释度必须由最终用户进行确定。
建议的蛋白质印迹方案
溶液
10X转移缓冲液 1L
Tris 115.3 gm
甘氨酸 24.2 gm
[SDS 4 gm(可省略)]
用于1X工作溶液: 1L
混合700 mL水
200 mL MeOH
100 mL 10X转移TBST
储备液 1 L
1M Tris pH 7.5 10 mL
5 M NaC 30 mL
10%吐温-20 5 mL
1.根据需要运行SDS-PAGE凝胶。
2.将PVDF膜(Millipore的ImmobilonP)浸泡在100%甲醇中1-2分钟,以润湿膜。
3.将膜浸泡在转移缓冲液中(见下文),直至准备进行印迹转移(>15分钟)。
4.组装凝胶转移夹层,使印迹朝向正极。
5.对于小分子量蛋白质,在100伏下将蛋白质从凝胶转移到膜上1-2小时,对于高分子量蛋白质的完全转移,在65 mA下将蛋白质从凝胶转移到膜上16小时(过夜)。
6.用Chemicon BLOT-FastStain(目录号2076)染色转移的条带。
7.用去离子水脱色。
8.用5%脱脂牛奶(Marvel或Carnation)的TBS或PBS封闭,4°C下过夜。脱脂牛奶应新鲜溶解,10000rpm离心10min,经玻璃滤器(Gelman Acrodisc)过滤。
9.与第一抗体在4°C轻轻搅拌下孵育过夜。
需要由最终用户确定最佳工作稀释度和孵育时间。
10.用TBST清洗至少3 × 5分钟。从该阶段开始,应省略叠氮化物。
11.在室温下与二抗(HRP偶联的山羊抗小鼠抗体,例如Chemicon目录号AP124P,适当稀释)一起孵育1小时。
12.用TBST清洗至少3 × 5分钟。
13.使用市售试剂盒(femtoLUCENT,Chemicon目录号2078)进行ECL。
外觀
形式:纯化
纯化的免疫球蛋白。 液体形式,溶于0.02 M磷酸盐缓冲液、0.25 M NaCl(pH 7.6)和0.1%叠氮化钠中。
儲存和穩定性
接收后,以未稀释的等分试样在2-8°C下保存长达6个月。
其他說明
浓度:关于批次特定浓度请参见检验报告。
法律資訊
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責聲明
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儲存類別代碼
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WGK 2
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
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