OGS569

PSF-CMV-MUIGG1 - MYSI PLAZMID PRZECIWCIAŁA ŁAŃCUCHA CIĘŻKIEGO IGG1

plasmid vector for molecular cloning

• Synonim(y): szybki wektor
• NACRES: NA.85
• UNSPSC Code: 12352200
• Promoter: Promoter name: CMV; Promoter activity: constitutive; Promoter type: mammalian
• Origin of replication: pUC (500 copies)
• Bacteria selection: kanamycin
• Reporter gene: none
• Peptide cleavage: no cleavage

Właściwości

• form: buffered aqueous solution
• mol wt: size 5223 bp
• bacteria selection: kanamycin
• origin of replication: pUC (500 copies)
• peptide cleavage: no cleavage
• promoter: Promoter name: CMV; Promoter activity: constitutive; Promoter type: mammalian
• reporter gene: none
• shipped in: ambient
• storage temp.: −20°C

Opis

General description

Wektor ten zawiera stały region kodujący przeciwciała łańcucha ciężkiego IgG myszy (Mus musculus). Został on zaprojektowany w celu umożliwienia płynnej fuzji zmiennych regionów przeciwciał z regionem stałym w celu utworzenia kaset ekspresyjnych przeciwciał o pełnej długości łańcucha ciężkiego. Jest to możliwe dzięki włączeniu miejsca restrykcyjnego BseRI przed sekwencją kodującą regionu stałego, które po odcięciu tworzy nawis z pierwszych dwóch nukleotydów pierwszego kodonu sekwencji kodującej. Pozwala to na wstawianie zmiennych regionów poprzez umieszczenie miejsca BseRI za zmiennym regionem w prawidłowej orientacji i pozycji, aby wygenerować ten sam zwis.

Poziom ekspresji promotora: Ten plazmid zawiera promotor CMV ssaków do napędzania ekspresji genów. Przetestowaliśmy wszystkie nasze promotory ssaków w różnych typach komórek i CMV jest konsekwentnie najsilniejszy w tych, które badaliśmy. Istnieje jednak wiele doniesień o promotorze CMV wykazującym wyciszenie przez metylację w hodowli długoterminowej.

Application

Plazmid koduje stały region przeciwciała w głównym miejscu wielokrotnego klonowania, umieszczonym tak, aby można go było odciąć w celu wytworzenia nawisu, który umożliwia płynną fuzję z regionem zmiennym z dowolnego przeciwciała. Pozwala to na tworzenie pełnej długości genów przeciwciał bez blizn po klonowaniu.

Aby to umożliwić, bezpośrednio przed sekwencją kodującą region stały znajduje się miejsce restrykcyjne BseRI. Jest to enzym restrykcyjny typu IIS, który wiąże się w jednej pozycji (CAGCAG), a następnie rozszczepia określoną liczbę nukleotydów z dala od miejsca wiązania, niezależnie od sekwencji w punkcie rozszczepienia. Używamy tego miejsca we wszystkich naszych kasetach ekspresji przeciwciał w tej samej pozycji. W tym plazmidzie cięcie za pomocą BseRI spowoduje powstanie nawisu składającego się z pierwszych dwóch nukleotydów pierwszego kodonu regionu stałego. Oznacza to, że każdy zmienny region z takim samym nawisem na jego 3 głównym końcu może być ligowany do tego plazmidu, gdy jest używany w połączeniu z dowolnym 5 głównym miejscem (NotI-NcoI). Aby dodać ten zwis, region zmienny musi być amplifikowany PCR, aby zawierał dowolne z następujących miejsc na jego 3 głównym końcu: BseRI BsgI BtsI lub BsrDI. Zastosowanie tego systemu pozwala na amplifikację PCR zmiennych regionów przeciwciała i połączenie ich z dowolnym z naszych plazmidów o stałym regionie bez konieczności ponownej syntezy całej kasety ekspresyjnej przeciwciała za każdym razem.

Analysis Note

To view the Certificate of Analysis for this product, please visit www.oxfordgenetics.com.

Other Notes

Aby wyświetlić informacje o sekwencji dla tego produktu, odwiedź stronę produktu .

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable