L7220

Kolagen A

• Synonim(y): Collagen A
• NACRES: NA.75
• UNSPSC Code: 12352202
• Biological source: bovine (calf) skin
• Form: liquid
• Technique(s): cell culture | mammalian: suitable
• Concentration: 1 mg/mL

Właściwości

• biological source: bovine (calf) skin
• form: liquid
• packaging: pkg of 6 x 5 mL ×
• concentration: 1 mg/mL
• technique(s): cell culture | mammalian: suitable
• shipped in: ambient
• storage temp.: 2-8°C

Opis

General description

Ten produkt jest identyczny z numerem części L 7220 firmy Biochrom GmbH. Jest to 0,1% roztwór kolagenu w HCl, typ I, 1 mg/ml. Kolagen A jest stosowany do powlekania kolb hodowlanych. Na wzrost i różnicowanie komórek in vitro znaczący wpływ ma zastosowane podłoże (szklane lub plastikowe). Jeśli kolby hodowlane są pokryte czynnikami wiążącymi, takimi jak fibronektyna, kolagen, żelatyna lub polilizyna, często uzyskuje się lepszy wzrost komórek. W ten sposób, na przykład, czas przeżycia hepatocytów na kolagenie może wynosić do jednego miesiąca. Ponadto, dzięki czynnikom mocującym zapobiega się tendencji wielu komórek do de-różnicowania.

Preparation Note

1. Powlekanie kolb hodowlanych monomerycznym kolagenem A
Cząsteczki kolagenu pozostają monomeryczne w roztworze przy pH poniżej 3,8 i niższym stężeniu jonów, nie tworzą się fibryle.

Zalecamy dwa różne systemy powlekania, w zależności od tego, kiedy potrzebne są kolby hodowlane: do natychmiastowego użycia po produkcji lub po dłuższym okresie przechowywania.

Aby natychmiast użyć kolby hodowlanej:

• Wymieszać 1 ml kolagenu A (nr kat. L7220) z taką samą objętością ultraczystej wody lub z 1x PBS, dostosowanym do pH 3,0 - 3,5. Roztwór PBS (nr kat. L1815) dostosowuje się do pH 3,0 - 3,5 w następujący sposób: Dodać 1 ml 1 N HCl do 100 ml roztworu PBS.
• Dodać 2 ml rozcieńczonego roztworu kolagenu na 10 cm2 powierzchni kolby hodowlanej i inkubować przez 2-3 godziny lub przez noc w temperaturze pokojowej (≤+25°C) (alternatywnie przez 30 minut w temperaturze +35-37°C). Usunąć roztwór i przemyć ultraczystą wodą lub 1x PBS (pH ok. 7,3). Natychmiast użyć kolby hodowlanej.

(1 ml kolagenu A/10 cm = 100 μg kolagenu/cm)

Aby przechowywać kolby hodowlane przez dłuższy czas:

• Zmieszać 1 ml kolagenu A z taką samą objętością ultraczystej wody.
• Dodać 2 ml rozcieńczonego roztworu kolagenu na 10 cm2 powierzchni kolby hodowlanej lub 20+D1 μl na studzienkę płytki mikromiareczkowej.
• Inkubować przez noc w temperaturze pokojowej (≤ +25°C) w strumieniu powietrza systemu Laminar-Airflow i pozostawić roztwór powlekający do wyschnięcia w celu utworzenia filmu kolagenowego. Kolby hodowlane mogą być przechowywane sterylnie zapakowane do momentu użycia (chłodne, suche przechowywanie). Przed użyciem przepłukać krótko pożywką hodowlaną.

2. Powlekanie kolb hodowlanych kolagenem fibrylarnym A
Tworzenie fibryli kolagenu odbywa się przy pH powyżej 4,0, w szczególności przy fizjologicznym pH 7,0-8,0, przy fizjologicznym stężeniu jonów i ogrzaniu do maksymalnie +37°C.

Zalecamy dwa różne systemy powlekania fibrylarnego kolagenu A, w zależności od tego, kiedy potrzebne są kolby hodowlane: do natychmiastowego użycia po wyprodukowaniu lub po dłuższym okresie przechowywania.

Aby wyprodukować zneutralizowany roztwór kolagenu, należy schłodzić wszystkie roztwory w łaźni wodnej z lodem w temperaturze około +2 - +8°C i wymieszać.

Aby natychmiast użyć kolby hodowlanej:

• Zmieszać 2 ml kolagenu A z 0,2 ml roztworu PBS (10x).
• Dostosować pH do 7,3 ± 0,2 przez dodanie ok. 10 μl 1 N NaOH.
• Dodać 2 ml roztworu na 10 cm2 powierzchni kolby hodowlanej i inkubować przez co najmniej 3 godziny lub przez noc w temperaturze pokojowej (≤ +25°C) (alternatywnie przez co najmniej 60 minut w temperaturze +35 - +37°C).
• Usunąć roztwór i przemyć 1x PBS (pH ok. 7,3) lub roztworem odżywczym. Natychmiast użyć kolby hodowlanej.

Aby przechowywać kolby hodowlane przez dłuższy czas:

• Zmieszać 1 ml kolagenu A z taką samą objętością 0,3 M roztworu NaCl i 1 N roztworem NaOH, dostosować do pH 7,0-8,0.
• Dodać 2 ml rozcieńczonego roztworu kolagenu na 10 cm2 powierzchni kolby hodowlanej lub 20 μl na studzienkę płytki mikropłytkowej.
• Inkubować przez noc w temperaturze pokojowej (≤ +25°C) w strumieniu powietrza systemu Laminar-Airflow i pozostawić roztwór do wyschnięcia. Kolby hodowlane mogą być przechowywane sterylnie zapakowane do momentu użycia (chłodne, suche przechowywanie). Przed użyciem przepłukać krótko podłożem hodowlanym.

Other Notes

Specyfikacja:

Przyłączanie komórek: Pass
pH: 1.8-2.4
Osmolalność: 0.01-0.05 Osm/kg H20
Zawartość kolagenu: 0,09-0,15%
Hydroksyprolina: 0,012-0,019%
Kolor: Bezbarwny
Wygląd: Przezroczysty

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: nwg
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable