MABT403

Przeciwciało przeciwko proteinazie 3/PR3, klon MCPR3-7

clone MCPR3-7, from mouse

• Synonim(y): Myeloblastin, AGP7, C-ANCA antigen, Leukocyte proteinase 3, Neutrophil proteinase 4, NP-4, P29, PR-3, PR3, Wegener autoantigen
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: MCPR3-7, monoclonal
• Application: FACS, IP, WB, affinity binding assay
• Citations: -

Właściwości

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: MCPR3-7, monoclonal
• species reactivity: human
• should not react with: mouse
• technique(s): affinity binding assay: suitable, flow cytometry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• NCBI accession no.: NP_002768
• UniProt accession no.: P24158
• shipped in: dry ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... PRTN3(5657)

Opis

General description

Mieloblastyna (EC 3.4.21.76; UniProt P24158; znana również jako AGP7, antygen C-ANCA, proteinaza leukocytarna 3, proteinaza neutrofilowa 4, NP-4, P29, PR-3, PR3, autoantygen Wegenera) jest kodowana przez gen PRTN3 (znany również jako CANCA, MBN, NP4) (Gene ID 5657) u człowieka. Proteinaza 3 (PR3) jest jedną z czterech neutralnych proteaz serynowych (elastaza, katepsyna G, PR3 i neutrofilowa proteaza serynowa 4) przechowywanych jako w pełni przetworzone dojrzałe enzymy w granulkach azurofilowych ludzkich neutrofili. Zamiast trafiać do ziarnistości po ich syntezie, niektóre cząsteczki PR3 trafiają na powierzchnię błony plazmatycznej neutrofili w postaci pro- lub dojrzałej. Stopień takiej ekspresji powierzchniowej jest uwarunkowany genetycznie, ale ekspozycja powierzchniowa i aktywność okołokomórkowa PR3 wokół neutrofili może być dalej regulowana w górę po stymulacji i aktywacji neutrofili. Autoprzeciwciało PR3 (przeciwciała przeciwko cytoplazmie neutrofilów lub ANCA) jest główną cechą patogenetyczną u pacjentów cierpiących na ziarniniakowatość z zapaleniem naczyń (GPA; dawniej zwaną ziarniniakowatością Wegenera). Wykazano, że ANCA aktywują neutrofile stymulowane cytokinami in vitro poprzez sieciowanie powierzchniowo eksponowanych receptorów PR3 i Fcγ. Aktywność PR3 i/lub jego inaktywacja przez inhibitor alfa1-antytrypsyny/alfa-1 proteinazy (α1PI) różni się w populacji ludzkiej i przyczynia się do ryzyka wystąpienia objawów GPA na początku, podczas nawrotów lub podczas progresji ogólnoustrojowej. PR3 jest początkowo produkowany z sekwencją peptydu sygnałowego (a.a. 1-25), N-końcową i C-końcową sekwencją propeptydu (a.a. odpowiednio 26-27 i 249-256), których usunięcie daje dojrzały enzym (a.a. 28-248).

Zaobserwowano ~32 kDa. Obliczono 27,81 kDa (Pro-PR3; a.a. 1-256), 25,14 kDa (usunięto N-końcowy sygnał i propeptyd; a.a. 28-256), 24,25 kDa (dojrzały; a.a. 28-248).

Immunogen

Epitop: Hydrofobowy region domeny aktywacyjnej (Hinkofer, L.C., et al. (2013). J. Biol. Chem. 288(37):26635-26648; Silva, F., et al. (2010). J. Autoimmun. 35(4) 299-308).

Rekombinowany proP-PR3ctp (Hinkofer, L.C., et al. (2013). J. Biol. Chem. 288(37):26635-26648).

Application

Analiza Western Blotting: 1-2 µg/ml z reprezentatywnej partii wykryło 1 µg rekombinowanego ludzkiego pro-PR3 w warunkach nieredukujących, ale nie w warunkach redukujących (dzięki uprzejmości Amber Hummel, Mayo Clinic, Rochester, MN).
Analiza cytometrii przepływowej: Reprezentatywna partia immunobarwiła powierzchnię tylko niewielkiej subpopulacji ludzkich neutrofili krwi obwodowej, które są zabarwione dodatnio klonem MCPR3-2 (nr kat. MABT340), co jest zgodne z tym, że PR3 na powierzchni jest w aktywnej konformacji skompleksowanej z CD177 i/lub dwuwarstwami lipidowymi. (Hinkofer, L.C., et al. (2013). J. Biol. Chem. 288(37):26635-26648).
Analiza cytometrii przepływowej: Reprezentatywna partia wiązała rekombinowany ludzki PR3-, ale nie mysi PR3-, powlekane kulki Talon, jak określono w analizie FACS. (Silva, F., et al. (2010). J. Autoimmun. 35(4) 299-308).
Analiza cytometrii przepływowej: Reprezentatywna partia wiązała immobilizowany rekombinowany ludzki PR3 poprzez inny epitop niż te rozpoznawane przez klony MCPR3-2 i MCPR3-3 (nr kat. odpowiednio MABT340 i MABF973), jak określono w analizie FACS testu wiązania kompetycyjnego opartego na kulkach (Silva, F., et al. (2010). J. Autoimmun. 35(4) 299-308).
Analiza immunoprecypitacji: Reprezentatywna partia immunoprecypitowała rekombinowany ludzki konstrukt PR3 proP-PR3ctp, który przyjmuje konformację pro-PR3, wykazując jednocześnie ponad 75% zmniejszone powinowactwo do rekombinowanego konstruktu ΔPR3ctp-S195A, który przyjmuje dojrzałą konformację PR3 (Hinkofer, L.C., et al. (2013). J. Biol. Chem. 288(37):26635-26648).
Analiza inhibicji: Reprezentatywna partia powodowała zależne od substratu hamowanie aktywności enzymatycznej ludzkiego PR3 poprzez zmianę konformacji kieszeni PR3 S1′, ale nie konformacji kieszeni PR3 S1 (Hinkofer, L.C., et al. (2013). J. Biol. Chem. 288(37):26635-26648).
Test wiązania powinowactwa: Reprezentatywna partia wychwyciła rekombinowany ludzki konstrukt PR3 proP-PR3ctp, który przyjmuje konformację pro-PR3, wykazując jednocześnie ponad 75% zmniejszone powinowactwo do rekombinowanego konstruktu ΔPR3ctp-S195A, który przyjmuje dojrzałą konformację PR3 (Hinkofer, L.C., et al. (2013). J. Biol. Chem. 288(37):26635-26648).

Anti-Proteinase 3/PR3 Antibody, clone MCPR3-7 to przeciwciało przeciwko PR3 do stosowania w testach wiązania powinowactwa, cytometrii przepływowej, immunoprecypitacji, testach inhibicji i Western Blotting.

Research Category
Cell Structure

Research Sub Category
Inflammation & Autoimmune Mechanisms

Biochem/physiol Actions

Klon MCPR3-7 celuje w hydrofobowy region domeny aktywacyjnej zaangażowany w wiązanie ludzkiego PR3 z receptorem błonowym neutrofili NB1/CD177. Klon MCPR3-7 preferencyjnie rozpoznaje PR3 w konformacji pro i powoduje zależne od substratu hamowanie aktywności enzymatycznej ludzkiego PR3 poprzez zmianę konformacji kieszeni PR3 S1′, ale nie konformacji kieszeni PR3 S1 (Hinkofer, L.C., et al. (2013). J. Biol. Chem. 288(37):26635-26648).

Physical form

Format: Oczyszczony

Oczyszczone mysie przeciwciało monoklonalne IgG1κ w PBS bez konserwantów.

Protein G Purified

Preparation Note

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania.
Zalecenia dotyczące postępowania: Po otrzymaniu i przed zdjęciem nasadki odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek do mikrowirówki i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.

Analysis Note

Identity Confirmation by Isotyping Test.

Isotyping Analysis: The identity of this monoclonal antibody is confirmed by isotyping test to be IgG1κ.

Other Notes

Stężenie: Należy zapoznać się z arkuszem danych dla konkretnej partii.

Disclaimer

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 2
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable