MABS1298

Przeciwciało anty-PAR4, klon 5F10

clone 5F10, from mouse

• Synonim(y): Proteinase-activated receptor 4, PAR-4, Coagulation factor II receptor-like 3, Thrombin receptor-like 3
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: 5F10, monoclonal
• Application: FACS, ICC, WB, inhibition assay
• Citations: -

Właściwości

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 5F10, monoclonal
• species reactivity: human
• technique(s): flow cytometry: suitable, immunocytochemistry: suitable, inhibition assay: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG2bλ
• NCBI accession no.: NP_003941
• UniProt accession no.: Q96RI0
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... F2RL3(9002)

Opis

General description

Receptor aktywowany proteazą 4 (UniProt Q96RI0; znany również jako receptor czynnika krzepnięcia II podobny do 3, PAR-4, receptor trombiny podobny do 3) jest kodowany przez gen F2RL3 (znany również jako PAR4) (identyfikator genu 9002) u człowieka. Receptory aktywowane proteazą (PAR) stanowią unikalną rodzinę siedmioprzekaźnikowych receptorów sprzężonych z białkiem G (GPCR) aktywowanych przez proteolityczne rozszczepienie ich N-końcowej sekwencji propeptydowej. Po odcięciu, N-końcowy fragment propeptydu działa jako ligand i aktywuje receptor poprzez wiązanie drugiej pętli zewnątrzkomórkowej. Czterej członkowie rodziny PAR (PAR-1 do PAR-4) są szeroko wyrażani i aktywowani przez wiele proteaz i wykorzystują różne typy białek G (Gi, Gq i G12/13) do przekazywania sygnału w zależności od aktywującej proteazy i kontekstu komórkowego. PAR-4 ulega ekspresji na płytkach krwi i wykazuje niskie powinowactwo do trombiny. Jednak PAR-4 jest w stanie tworzyć hetero-oligomery zarówno z PAR-1, jak i receptorem ADP P2Y12, aby pośredniczyć w sygnalizacji inicjowanej trombiną i ADP. Rozszczepienie PAR-4 jest znacznie zwiększone poprzez hetero-oligomeryzację z PAR-1, a interakcja PAR-4 z P2Y12 jest bezpośrednio związana z rekrutacją arestyny-2 i sygnalizacją AKT. PAR-4 jest 7-przekaźnikowym (a.a. 83-103, 109-129, 152-172, 192-213, 248-268, 284-304, 320-343) GPCR aktywowanym przez rozszczepienie trombiny między R47 i G48, posiadającym 3 pętle zewnątrzkomórkowe i 3 pętle wewnątrzkomórkowe między zewnątrzkomórkowym N-końcowym końcem (a.a. 48-82) a cytoplazmatycznym C-końcowym ogonem (a.a. 344-385).

Zaobserwowano ~45 kDa. Obliczono 41,13/39,16 kDa (prepro-/pro-PAR4). Szeroki wzór pasmowania i większy pozorny rozmiar pasma jest zgodny z wykrywaniem glikozylowanego PAR4. W niektórych lizatach mogą pojawić się niescharakteryzowane pasma.

Immunogen

Epitop: W pobliżu (N-końcowego) miejsca rozszczepienia trombiny.

Skoniugowany z MBP rekombinowany ludzki PAR4 N-końcowy fragment zawierający sekwencję propeptydową.

Application

Analiza immunocytochemiczna: 20 µg/ml z reprezentatywnej partii wykryło endogenny PAR4 za pomocą fluorescencyjnego barwienia immunocytochemicznego świeżo wyizolowanych ludzkich płytek krwi (dzięki uprzejmości dr Marvina Niemana, Case Western Reserve University, Cleveland, OH, USA).
Analiza immunocytochemiczna: Reprezentatywna partia wykryła ekspresję egzogennie transfekowanego ludzkiego PAR4 poprzez fluorescencyjne barwienie immunocytochemiczne 4% utrwalonych formaldehydem komórek HEK293 Flp-In po leczeniu tetracykliną (Mumaw, M.M., et al. (2015). Thromb. Res. 135(6):1165-1171).
Analiza cytometrii przepływowej: Reprezentatywna partia wykryła indukowaną tetracykliną ekspresję egzogennie transfekowanego ludzkiego PAR4 na powierzchni komórek HEK293 Flp-In. Leczenie trombiną zmniejszało immunoreaktywność PAR4 na powierzchni komórek (Mumaw, M.M., et al. (2015). Thromb. Res. 135(6):1165-1171).
Analiza inhibicji: Reprezentatywna partia, dodana przed trombiną, chroniła PAR4 na powierzchni komórki przed rozszczepieniem trombiny (Mumaw, M.M., et al. (2015). Thromb. Res. 135(6):1165-1171).
Analiza Western Blotting: Reprezentatywna partia wykryła białka fuzyjne MBP zawierające ludzki fragment PAR4 a.a. 18-78 lub 41-66, ale nie 48-72. Degradacja fuzji MBP-PAR4 przez leczenie trombiną zlikwidowała wykrywanie pasma docelowego przez klon 5F10 (Mumaw, M.M., et al. (2015). Thromb. Res. 135(6):1165-1171).
Analiza Western Blotting: Reprezentatywna partia wykryła indukowaną tetracykliną ekspresję egzogennie wprowadzonego ludzkiego PAR4 w linii komórkowej HEK293 Flp-In, a także endogennego PAR4 w izolowanych ludzkich płytkach krwi (hPLT). Trombinowa aktywacja hPLT zmniejszyła wykrywalność docelowego pasma PAR4 (Mumaw, M.M., et al. (2015). Thromb. Res. 135(6):1165-1171).

Anti-PAR4 Antibody, klon 5F10 jest przeciwciałem przeciwko PAR4 do stosowania w Western Blotting, immunocytochemii, cytometrii przepływowej, inhibicji.

Research Category
Signaling

Research Sub Category
GPCR, cAMP/cGMP & Calcium Signaling

Biochem/physiol Actions

Klon 5F10 rozpoznaje epitop propeptydowy w pobliżu (N-końcowy do) miejsca rozszczepienia trombiny i chroni PAR4 na powierzchni komórki przed rozszczepieniem trombiny (Mumaw, M.M., et al. (2015). Thromb. Res. 135(6):1165-1171). Klon 5F10 rozpoznaje prepro- i pro-, ale nie proteolitycznie aktywowane formy ludzkiego PAR4.

Physical form

Format: Oczyszczony

Oczyszczone mysie przeciwciało monoklonalne IgG2bλ w PBS bez konserwantów.

Protein G purified.

Preparation Note

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania.

Analysis Note

Evaluated by Western Blotting in human platelet lysate.

Western Blotting Analysis: A 1:250 dilution of this antibody detected PAR4 in 50 µg of human platelet lysate.

Other Notes

Stężenie: Należy zapoznać się z arkuszem danych dla konkretnej partii.

Disclaimer

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• Co się dzieje?: WGK 2
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable