MABN1817

Anti-α-Synuclein (SNCA) Antibody

mouse monoclonal, 2F12

• Synonim(y): Alpha-synuclein, NACP, Non-A beta component of AD amyloid, Non-A4 component of amyloid precursor, Synuclein alpha-140
• UNSPSC Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41
• Clone: 2F12, monoclonal
• Species reactivity: rat, human, mouse
• Application: ELISA, ICC, IHC, IP, WB
• Citations: 13

Właściwości

• Nazwa produktu: Przeciwciało anty-α-synukleina, klon 2F12, clone 2F12, from mouse
• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 2F12, monoclonal
• species reactivity: rat, human, mouse
• technique(s): ELISA: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry: suitable (paraffin), immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG2bκ
• NCBI accession no.: NP_000336
• UniProt accession no.: P37840
• shipped in: ambient
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... SNCA(6622)

Opis

General description

Alfa-synukleina (UniProt P37840; znana również jako NACP, Non-A beta składnik amyloidu AD, Non-A4 składnik prekursora amyloidu, Synuclein alpha-140) jest kodowana przez gen SNCA (znany również jako NACP, PARK1, PARK4) (Gene ID 6622) u ludzi. Patologiczne agregaty są powszechnymi cechami wielu chorób neurodegeneracyjnych, takich jak splątki neurofibrylarne tau (NFT) w chorobie Alzheimera (AD) i zwyrodnieniu czołowo-skroniowym oraz α-synukleina (α-syn lub αS) Lewy bodies (LBs) w chorobie Parkinsona (PD) i demencji z LBs (DLB). Alfa-synukleina jest białkiem wiążącym fosfolipidy, skoncentrowanym w zakończeniach presynaptycznych, gdzie promuje tworzenie kompleksów SNARE i moduluje funkcje synaptyczne. Alfa-synukleina jest głównym składnikiem patologicznych inkluzji, które charakteryzują PD, DLB i zanik wieloukładowy (MSA). Badania pokazują, że αS istnieje nie tylko jako rozłożone monomery, ale w dużej mierze również jako multimery, głównie jako tetramery ~60 kDa złożone z czterech N-acetylowanych αS, które przyjmują konformację α-helikalną i są odporne na agregację. Stwierdzono, że mutacje missense αS powodujące PD przesuwają komórkowe αS z tetramerów/multimerów do monomerów, co wskazuje, że zmniejszone α-helikalne tetramery i zwiększone rozwinięte monomery inicjują patogenezę. Ponadto, zarówno kinaza kazeinowa-1 (CK-1), jak i CK-2 mogą katalizować fosforylację αS na Ser129, a fosforylowana αS na Ser129 znajduje się w inkluzjach αS.

Zaobserwowano ~14,5 kDa. Obliczono 14,46 kDa (ludzka izoforma 1; NACP140), 14,49/14,52 kDa (mysia/szczurza izoforma 1). W niektórych lizatach można zaobserwować niescharakteryzowane pasma.

Immunogen

Oczyszczona ludzka α-synukleina z erytrocytów.

Application

Analiza immunohistochemiczna: Rozcieńczenie 1:1000 z reprezentatywnej partii wykryło α-synukleinę w ludzkich skrawkach tkanek raka prostaty, kory mózgowej i nerek.

Analiza ELISA: Reprezentatywna partia (0,4 µL w 30 µL buforu/basenik do powlekania) wychwyciła rekombinowaną ludzką α-synukleinę (0,2-40 ng/ml) w kanapkowym teście ELISA wykorzystującym klon SOY1 (nr kat. MABN1818; wstępnie sprzężony ze znacznikiem Sulfo) jako przeciwciało wykrywające (dzięki uprzejmości dr Tima Bartelsa, Brigham and Women's Hospital, Boston, MA, USA).

Analiza immunocytochemiczna: Rozcieńczenie 1:1000 z reprezentatywnej partii immunobarwionych pierwotnych mysich neuronów korowych (dzięki uprzejmości Tima Bartelsa, Ph.D., Brigham and Women's Hospital, Boston, MA, U.S.A.).

Analiza immunohistochemiczna: Rozcieńczenie 1:11 110 z reprezentatywnej partii immunobarwionych ciał Lewy'ego (LB) w skrawkach tkanki prążkowia z ludzkiego mózgu z chorobą Parkinsona (PD) (dzięki uprzejmości dr Tima Bartelsa, Brigham and Women's Hospital, Boston, MA, USA).

Analiza immunoprecypitacji: 4 µl z reprezentatywnej partii immunoprecypitowało α-synukleinę z 50 µg lizatu ludzkich komórek erytroleukemii HEL (dzięki uprzejmości dr Tima Bartelsa, Brigham and Women′s Hospital, Boston, MA, USA).

Analiza ELISA: Reprezentatywna partia wychwyciła zarówno endogenną α-synukleinę (αS) z ludzkiego homogenatu korowego, jak i egzogennie wyrażony typ dziki i rodzinne mutanty αS PD (fPD) (A30P, E46K, H50Q, G51D, A53T) z ekstraktów sytozolowych transfekowanych ludzkich komórek neuroblastoma M17D w aplikacji kanapkowej ELISA wykorzystującej klon SOY1 (Cat. Nr kat. MABN1818; wstępnie sprzężony ze znacznikiem Sulfo) jako przeciwciało wykrywające (Dettmer, U., et al. (2015). Nat. Commun. 6:7314).

Analiza ELISA: Reprezentatywna partia wychwyciła zarówno wstępnie zagregowaną fibrylarną rekombinowaną α-synukleinę, jak i częściowo oczyszczone ciałka Lewy'ego (LB) od pacjenta z DLB (otępienie z LB) z lub bez uprzedniej denaturacji próbki przez gotowanie z 2% SDS w aplikacji kanapkowej ELISA wykorzystującej klon SOY1 (nr kat. MABN1818; wstępnie sprzężony z tagiem Sulfo) jako przeciwciało wykrywające (Dettmer, U. i in. (2015). Nat. Commun. 6:7314).

Analiza immunocytochemiczna: Reprezentatywna partia wykryła cytozolową lokalizację endogennej szczurzej α-synukleiny (αS) i egzogennie nadeksprymowanej ludzkiej αS poprzez fluorescencyjne barwienie immunocytochemiczne 4% utrwalonych paraformaldehydem, 0,25% Triton X-100-permeabilizowanych pierwotnych neuronów szczura i transfekowanych ludzkich komórek neuroblastoma M17D (Dettmer, U., et al. (2015). Nat. Commun. 6:7314).

Analiza Western Blotting: Reprezentatywna partia wykryła monomeryczną α-synukleinę (αS), jak również multimery αS (αS60, αS80 i αS100) w ekstrakcie z usieciowanych glutaranem disukcynimidylu (DSG) mysich kawałków mózgu, ludzkich iPSC (zarówno mutanta S A53T, jak i skorygowanej linii izogenicznej) i ESC (zarówno typu dzikiego, jak i genetycznie zmodyfikowanej linii izogenicznej αS E46K). Znacząco obniżony poziom αS60 zaobserwowano u mutantów A53T i E46K (Dettmer, U., et al. (2015). Nat. Commun. 6:7314).

Analiza Western Blotting: Reprezentatywna partia wykryła monomeryczną α-synukleinę (αS), a także multimery αS (αS60, αS80 i αS100) w ekstraktach cytozolowych z usieciowanych glutaranem disukcynimidylu (DSG) pierwotnych neuronów szczura, a także ludzkiej białaczki erytroidalnej HEL i komórek neuroblastoma M17D (Dettmer, U., et al. (2013). J. Biol. Chem. 288(9):6371-6385).

Anti-α-Synuclein, klon 2F12, nr kat. MABN1817, jest wysoce specyficznym mysim przeciwciałem monoklonalnym skierowanym przeciwko α-synukleinie i zostało przetestowane w testach ELISA, immunocytochemii, immunohistochemii (parafina), immunoprecypitacji i Western Blotting.

Research Category
Neuroscience

Biochem/physiol Actions

Klon 2F12 reagował zarówno z monomerycznymi, jak i zagregowanymi formami alfa-synukleiny ludzkiej, mysiej i szczurzej. Klon 2F12 wykrył zarówno alfa-synukleinę typu dzikiego, jak i mutanty FPD (Dettmer, U., et al. (2015). Nat. Commun. 6:7314; Dettmer, U., et al. (2013). J. Biol. Chem. 288(9):6371-6385).

Physical form

Format: Oczyszczony

Oczyszczone mysie IgG2b w buforze zawierającym 0,1 M Tris-Glicyny (pH 7,4), 150 mM NaCl z 0,05% azydkiem sodu.

Protein G purified.

Preparation Note

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze 2-8°C od daty otrzymania.

Analysis Note

Evalulated by Western Blotting in human fetal brain tissue lysate.

Western Blotting Analysis: A 1:1,000 dilution of this antibody detected α-synuclein in 10 µg of human fetal brain tissue lysate.

Other Notes

Stężenie: Należy zapoznać się z arkuszem danych dla konkretnej partii.

Disclaimer

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• Co się dzieje?: WGK 1