HTS189M

Preparat błonowy ChemiSCREEN Rekombinowany ludzki receptor neuropeptydowy GPR103 / QRFP

• UNSPSC Code: 41123201
• NACRES: NA.45
• eCl@ss: 32161000

Właściwości

• Quality Segment: 100
• description: GPCR Class A, protein target GPR103 / QRFP
• technique(s): radioligand binding assay (RLBA): suitable
• UniProt accession no.: Q96P65
• Gene Information: human ... QRFPR(84109)

Opis

General description

GPR103 jest receptorem sprzężonym z Gq, który znajduje się w mózgu i nadnerczach i jest aktywowany przez 43-aminokwasowy peptyd RFamidowy, QRFP43, oraz 26-aminokwasowy fragment, QRFP26/26RFa/Peptyd 518 (Jiang i in., 2003; Fukusumi i in., 2003). QRFP43 jest aktywną formą w mózgu szczura, a domózgowe podawanie QRFP43 indukuje karmienie i tempo metabolizmu (Takayasu i in., 2006; Moriya i in., 2006). Preparaty błonowe GPR103 firmy Millipore są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych antagonistów GPR103. Preparaty błonowe wykazują Kd 0,63nM dla^[125I]-QRFP43. Przy użyciu 10 μg/basen preparatu błonowego GPR103 i 0,35 nM^[125I]-QRFP43 uzyskano ponad 6-krotny stosunek sygnału do tła.

Ludzki GPR103

Application

Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS

Physical form

Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów.
Metoda pakowania: Białko błonowe dostosowano do wskazanego stężenia w buforze do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C.

Preparation Note

Przechowywać zamrożone w temperaturze -70°C przez okres do 2 lat. Nie zamrażać i nie rozmrażać.

Analysis Note

Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym w niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka zbiorcza FC (Millipore nr kat. MAHF C1H) jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 minut, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i płukana 3 razy (1 ml na studzienkę na płukanie) buforem płuczącym. Płytka jest suszona i liczona.

Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM _MgCl2, 1 mM _CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.

Radioligand:^[125I]QRFP43 (Perkin Elmer # NEX408)

Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.

Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 6-krotny stosunek sygnału do tła ze ^{znakowanym 125I}QRFP43 przy 0,35 nM.

Disclaimer

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.