HTS149M
Preparat błonowy ChemiSCREEN Rekombinowany ludzki metabotropowy receptor glutaminianu mGlu 6
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.45
pochodzenie biologiczne
human
Poziom jakości
rekombinowane
expressed in Chem-1 cells
Formularz
liquid
producent / nazwa handlowa
ChemiScreen
Chemicon®
metody
ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Opis ogólny
Glutaminian jest głównym neuroprzekaźnikiem pobudzającym w ośrodkowym układzie nerwowym i odgrywa rolę w uczeniu się, pamięci i neurotoksyczności. W biologicznym działaniu glutaminianu pośredniczą jonotropowe i metabotropowe receptory glutaminianu, które są odpowiednio kanałami jonowymi i GPCR. Metabotropowe receptory glutaminianu (mGluR) są członkami rodziny receptorów sprzężonych z białkiem G klasy 3, które charakteryzują się dużą domeną zewnątrzkomórkową. Są one dalej klasyfikowane do grupy I, II i III mGluR na podstawie ich identyczności sekwencji, farmakologii i mechanizmu transdukcji sygnału. Grupa I (mGlu1 i mGlu5) łączy się ze szlakiem fosfolipazy C poprzez Gαq, podczas gdy grupa II (mGlu2 i mGlu3) i grupa III (mGlu4, mGlu6, mGlu7 i mGlu8) łączą się negatywnie ze szlakiem cyklazy adenylowej poprzez Gαi (Conn i Pin, 1997). mGlu6 ma ograniczoną lokalizację do dendrytów komórek dwubiegunowych ON, które synapsują z pręcikami i czopkami siatkówki. Ukierunkowana delecja mGlu6 powoduje deficyty w odpowiedziach ON, ale niezmienione odpowiedzi OFF na światło (Masu i in., 1995). Ponadto mutacje w GRM6 u ludzi są odpowiedzialne za niektóre formy autosomalnej recesywnej wrodzonej stacjonarnej ślepoty nocnej (Dryja i in., 2005; Zeitz i in., 2005). Preparaty błonowe mGlu6 firmy Chemicon są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych interakcji mGlu6 z jego ligandami. Linia komórkowa wykazuje odpowiedź na wapń z wartościami EC50 wynoszącymi 6,2 μM, 23,4 μM i 52,7 μM dla L-AP4, (RS)PPG i L-glutaminianu. Preparaty błonowe wykazują EC50 wynoszące 4,0 μM, 24,1 μM i 49,3 μM odpowiednio dla L-AP4, (RS)PPG i L-glutaminianu w teście wiązania GTPγS.
ludzki GRM6 cDNA
Zastosowanie
Preparat błonowy ludzkiego GPCR mGlu6 do testów wiązania radioligandów i wiązania GTPγS.
Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS
Działania biochem./fizjol.
- Klasa GPCR: C
- Białko docelowe: mGlu6
- Podrodzina docelowa: Glutaminian (metabotropowy)
Jakość
EC50 in GTPγS binding assay by Glutamate: ~ 49.3 μM
EC50 in GTPγS binding assay by (RS)PPG: ~ 24.1 μM
EC50 in GTPγS binding assay by L-AP4: ~ 4.04 μM
EC50 in GTPγS binding assay by (RS)PPG: ~ 24.1 μM
EC50 in GTPγS binding assay by L-AP4: ~ 4.04 μM
Charakterystyka techniczna
Membrany są permeabilizowane przez dodanie saponiny do równego stężenia masowego, a następnie mieszane z[35S]-GTPγS (końcowe stężenie 0,3 nM) w 20 mM HEPES, pH 7,4/100 mM NaCl/10 mM MgCl2/0,5 μM GDP w niewiążącej 96-dołkowej płytce. Nieznakowane DCG IV, (2R4R) APDC i glutaminian są dodawane do końcowego stężenia wskazanego na rysunku 1 (końcowa objętość 100 μL) i inkubowane przez 30 minut w temperaturze 30 γC. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną GF/B (Millipore MAHF B1H) uprzednio zwilżoną wodą i płukana 3 razy (1 ml na studzienkę na płukanie) zimnym 10 mM fosforanem sodu, pH 7,4. Płytka jest suszona i liczona.
Jedna fiolka zawiera wystarczającą ilość membran na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jedna jednostka to ilość membrany, która da więcej niż 1000 cpm specyficznego wiązania L-AP4, (RS)PPG lub[35S]-GTPγS stymulowanego glutaminianem.
Oczekuje się, że preparat membranowy mGlu6 będzie funkcjonalny w teście wiązania radioligandu; jednak użytkownik końcowy będzie musiał określić optymalny ligand znakowany radioligandem do stosowania z tym produktem.
Jedna fiolka zawiera wystarczającą ilość membran na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jedna jednostka to ilość membrany, która da więcej niż 1000 cpm specyficznego wiązania L-AP4, (RS)PPG lub[35S]-GTPγS stymulowanego glutaminianem.
Oczekuje się, że preparat membranowy mGlu6 będzie funkcjonalny w teście wiązania radioligandu; jednak użytkownik końcowy będzie musiał określić optymalny ligand znakowany radioligandem do stosowania z tym produktem.
Postać fizyczna
Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów.
Metoda pakowania: Białko błonowe dostosowano do 1 mg/ml w buforze do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C.
Metoda pakowania: Białko błonowe dostosowano do 1 mg/ml w buforze do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C.
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać zamrożone w temperaturze -70°C przez okres do 2 lat. Nie zamrażać i nie rozmrażać.
Informacje prawne
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktów, nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanego użytku komercyjnego.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
12 - Non Combustible Liquids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 2
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej