07-1570-S

Przeciwciało przeciw monometylowi histonu H4 (Lys20), rozmiar próbny

Upstate^®, from rabbit

• Synonim(y): H4K20me1, histon H4 (monometyl K20), rodzina histonów H4, członek A, histon 1, H4a, klaster histonów 1, H4a
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: polyclonal
• Species reactivity: human
• Application: ChIP, DB, WB, inhibition assay
• Citations: 2

Właściwości

• biological source: rabbit
• Quality Segment: 100
• antibody form: affinity isolated antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• purified by: affinity chromatography
• species reactivity: human
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, dot blot: suitable, inhibition assay: suitable (peptide), western blot: suitable
• NCBI accession no.: NM_003538.3
• UniProt accession no.: P62805
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: monomethylation (Lys20)
• Gene Information: human ... H4C1(8359)

Opis

General description

Histony to wysoce konserwatywne białka, które służą jako rusztowanie strukturalne dla organizacji jądrowego DNA w chromatynę. Modyfikacje histonów regulują transkrypcję, naprawę, rekombinację i replikację DNA. Najczęściej badanymi modyfikacjami są acetylacja, fosforylacja, metylacja i ubikwitynacja. Modyfikacje te mogą zmieniać lokalną architekturę chromatyny lub rekrutować czynniki trans-działające, które rozpoznają określone modyfikacje histonów (hipoteza "kodu histonowego"). Metylacja histonu H4 przy lizynie 20 jest związana z aktywacją transkrypcji, wyciszaniem genów, tworzeniem heterochromatyny, mitozą i naprawą DNA. Histon H4 jest stopniowo metylowany przy lizynie 20 podczas faz G(2), M i G(1) cyklu komórkowego, a metylacja H4Lys20 jest markerem heterochromatyny. U ssaków żeński chromosom X jest pokryty przez RNA Xist, który jest krytyczny dla wyciszania i jest oznaczony głównie przez metylację H3Lys9, H3Lys27 i H4Lys20.

~11 kDa

Immunogen

Epitop: Monometyl Lys20

Sprzężony z KLH, liniowy syntetyczny peptyd odpowiadający aminokwasom 15-24
(AKRHR[me1K]VLRD-C) ludzkiego histonu H4.

Application

Immunoprecypitacja chromatyny:
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek HeLa (2 X¹⁰⁶ równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 4 μg przeciwciała kontroli ujemnej lub przeciwciała Anti-Monomethyl-Histone H4
(Lys20) i zestawu Magna ChIP A Kit (nr kat. 17-610). Pomyślną immunoprecypitację fragmentów DNA związanych z monometylo-histonem H4 (Lys20) zweryfikowano za pomocą qPCR przy użyciu starterów ChIP regionu kodującego GAPDH w porównaniu ze starterami kontrolnymi odpowiadającymi promotorowi GAPDH.
Szczegóły eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna ChIP A (nr kat. 17-408) lub EZ-ChIP (nr kat. 17-371).

Analiza Dot Blot: Absurance Histone H3 Antibody Specificity Array (nr kat. 16-667) i Absurance Histone H2A, H2B, H4 Antibody Specificity Array (nr kat. 16-665), które zawierają peptydy histonowe z różnymi modyfikacjami, były sondowane za pomocą Cat. 07-1570-S Anti-monomethyl Histone H4 (Lys20) w rozcieńczeniu 1:1000. Białka były wizualizowane przy użyciu anty-króliczej IgG osła sprzężonej z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji.

Analiza Western Blot:
0,1 μg/mL białek uwidoczniono przy użyciu koziego przeciwciała drugorzędowego przeciw królikowi sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji (patrz rysunki).

Test blokowania peptydów:
40 μg peptydu histonu H4 zawierającego monometylo-Lys20 zniosło wykrywanie histonu H4 przez anty-monometylo-Histon H4 (Lys20) w analizie immunoblot kwaśnych ekstraktów komórek HeLa (patrz rysunki).

Kategoria badawcza
Epigenetyka i funkcje jądrowe

Podkategoria badawcza
Biologia chromatyny

Histony

Przeciwciało anty-monometylowe histonu H4 (Lys20), rozmiar próbny to królicze przeciwciało poliklonalne do wykrywania monometylowego histonu H4 (Lys20) znanego również jako H4K20me1, histon H4 (mono metyl K20), członek rodziny histonów H4 A i zostało zatwierdzone w WB.

Biochem/physiol Actions

Na podstawie homologii sekwencji oczekuje się szerokiej reaktywności krzyżowej między gatunkami

Rozpoznaje monometylowany histon H4
(Lys20), Mr 11 kDa.

Physical form

Chromatografia powinowactwa

Oczyszczony z surowicy przez chromatografię powinowactwa. Dostarczany w stężeniu 1 mg/ml w 0,1 M Tris-Glicyny (pH 7,4), 15 mM NaCl, 0,05% NaN3.

Preparation Note

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania.
Zalecenia dotyczące postępowania: Po otrzymaniu, a przed zdjęciem nasadki, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.

Analysis Note

Kontrola
Ekstrakty kwasowe z komórek HeLa.

Routinely evaluated by western blot analysis

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable